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本卷共 7 题,其中:
综合题 7 题
简单题 1 题,中等难度 3 题,困难题 3 题。总体难度: 中等
综合题 共 7 题
  1. 请回答从土壤中分离产脲酶细菌和脲酶固定化实验的有关问题

    (1)LB固体培养基:取适量的蛋白胨、酵母提取物、NaCl,加入一定量的蒸馏水溶解,再加_________,灭菌备用。

    (2)尿素固体培养基:先将适宜浓度的尿素溶液用_______灭菌过的G6玻璃砂漏斗过滤,因为G6玻璃砂漏斗________,故用于过滤细菌。然后将尿素溶液加入到已经灭菌的含有酚红的培养基中,备用。

    (3)取适量含产脲酶细菌的10-4、10-5两种土壤稀释液,分别涂布接种到LB固体培养基和尿素固体培养基上,培养48h,推测固体培养基上生长的菌落数最少的是______(A. 10-5稀释液+尿素固体培养基   B. 10-5稀释液+LB固体培养基  C. 10-4稀释液+尿素固体培养基  D. 10-4稀释液+LB固体培养基)。在尿素固体培养基上产脲酶细菌菌落周围出现______,其原因是细菌产生的脲酶催化尿素分解产生______所致。

    (4)制备固定化脲酶时,用石英砂吸附脲酶,装柱。再用蒸馏水洗涤固定化酶柱,其作用是_________。

    难度: 困难查看答案及解析

  2. 生活饮用水的微生物安全性日常检测是很重要的。请回答下列问题:

    (1)培养大肠杆菌所用的LB培养基一般用________法灭菌。检验大肠杆菌的含量时,通常将水样用_________进行一系列的梯度稀释。

    (2)将稀释后的水样分别用玻璃刮刀_______到LB固体培养基,_______于恒温培养箱,在_______℃条件进行培养。用该方法统计样本菌落数时_________(填需要或不需要)设置对照组。

    (3)下图表示培养和纯化大肠杆菌的部分操作步骤,下列相关叙述正确的是_________。

    A.步骤①倒平板操作时,倒好后应立即将其倒过来放置          

    B.步骤②接种环火焰上灼烧后迅速蘸取菌液后划线   

    C.步骤③多个方向划线,使接种物逐渐稀释,培养后出现单个菌落

    D.步骤④恒温培养箱培养后可用来对大肠杆菌进行计数

    难度: 中等查看答案及解析

  3. 在“分离以尿素为氮源的微生物”的实验中,配制好的尿素固体培养基加上封口膜后用________方法灭菌,冷却后加入用G6玻璃纱漏斗过滤的尿素溶液。玻璃纱漏斗角后需用适宜浓度的______浸泡,再用____冲洗,干燥后保存。

    难度: 简单查看答案及解析

  4. 随着社会的发展,石油产品的使用越来越多,石油烃污染也越来越严重。为了筛选出分解石油烃能力强的微生物,人们不断地进行研究。下图为获取能分离出分解石油烃的微生物的土壤样品后的研究过程,请回答有关问题:

    (1)获取土壤样品的取样地点最好选在_________。为了能有效地分离出分解石油烃的微生物,过程①④所用的选择培养基只能以石油烃作为唯一碳源,其原因是_____________。

    (2)根据⑤平板上生长的菌落,对④进行接种采用的方法是______________,若发现在⑤中无法区分菌落,可以将图中③取出的菌液_____________。

    (3)纯化菌株时,通常使用的划线工具是_________。采用________方法对其进行灭菌。划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落,第二划线区域所划的第一条线上无菌落,其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误是_______________(写出一点即可)。

    难度: 困难查看答案及解析

  5. 脲酶是催化尿素分解的特异性水解酶。该酶主要从刀豆等豆科植物提取,现被广泛应用于尿素废水的净化过程。请分析回答以下问题:

    (1)脲酶可以催化尿素分解为_______,其中碱性物质可以能使酚红指示剂变为______________。

    (2)为了提高脲酶的利用效率,可以釆用固定化酶技术将其固定。酶的固定化方法有:吸附法、共价偶联法、包埋法和___________________。

    (3)实验室中可以采用吸附法将该酶制成固定化酶柱,让尿素废水过柱前,先用10倍体积的蒸馏水洗涤酶柱,目的是___________________________。

    (4)脲酶除了从植物获取外,还可以来源于土壤中的微生物。为了从土壤中分离得到队尿素为氮源的微生物,采用的分离方法操作最简便的是_____________。下列有关该分离方法的操作叙述错误的是____________。

    A.必须使用固体培养基    

    B.必须在酒精灯火焰旁接种

    C.必须将接种后的培养皿倒置培养

    D.必须将接种前的培养皿、培养基、土壤悬浮液等进行灭菌处理

    难度: 中等查看答案及解析

  6. 漆酶属于木质降解酶类,在环境修复、农业生产等领域有着广泛用途。下图是分离、纯化和保存漆酶菌株的过程。

    (1)在步骤①中,用_______稀释制成不同浓度的样品悬液。

    (2)步骤②中将保存在70%酒精中的___________放在酒精灯火焰上,待火焰熄灭,将菌液涂布到整个平面,将培养皿___________在37°C恒温培养箱中培养24〜48小时,观察菌落数。

    (3)步骤③应选择挑取涂布平板上长出的__________,再通过划线进一步_______________。

    (4)步骤④中,将菌种接种在_____________培养基中,在37°C恒温培养箱中培养24h后,置于_______冰箱中保存。

    (5)若该漆酶大量应用于环境修复,可先用石英砂对漆酶进行_________(A.包埋B.共价偶联C.吸附D.交联)法固定,再进行工业化使用。

    难度: 困难查看答案及解析

  7. 下表是用于从土壤中分离纯化细菌的培养基配方。

    请回答:

    (1)培养基的类型很多,按照“细菌喜___,霉菌喜__ ”的原则配制上述 培养基后,一般还要调节 pH 并对培养基进行___处理。

    (2)分离纯化微生物最常使用的划线分离法中,接种环在菌液中蘸菌液___(A.一 B.二 C.三 D.四)次;若用涂布分离法,则制备细菌悬液时,一般需进 行___处理,为确保操作过程不被杂菌污染,接种必须在___附近操作。

    (3)假设培养结束后,发现培养基上菌落连成一片,可能的原因是什么?(列举一项)__ 。

    难度: 中等查看答案及解析