钙依赖蛋白激酶(CDPK)在植物的信号传导和提高植物抗性方面发挥着重要作用,科学家通过将CDPK基因导入拟南芥中,来获得具有抗性的新品种。下图为某种质粒表达载体和含CDPK基因的DNA片段示意图,图中标记了限制酶的切割位点。回答下列问题。
(1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以从基因文库中获得。基因文库包括_______________,为了使CDPK基因插入质粒中,应选取________________两种限制性核酸内切酶分别切割质粒和含目的基因的DNA片段。
(2)将获取的CDPK基因进行PCR扩增,目前在PCR反应中使用Taq酶而不使用大肠杆菌DNA聚合酶主要原因是_____________________________________。
(3)图中所示的质粒为Ti质粒,操作过程中需要把CDFK基因插入到质粒的T-DNA片段中,T-DNA片段在转化中的作用是____________________________。为了检测CDPK基因是否导入成功,可以用________________________________作探针检测CDPK基因是否导入拟南芥细胞,导入成功的标志是________________ 。
(4)为研究CDPK基因表达载体对拟南芥的遗传转化的影响,将转化后的拟南芥植株生长成熟后,采集其种子,播种于含________________________的MS培养基中进行抗性筛选。
(5)基因工程的核心是_________________ ,目的是 ____________________________。
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钙依赖蛋白激酶(CDPK)在植物的信号传导和提高植物抗性方面发挥着重要作用,科学家通过将CDPK基因导入拟南芥中,来获得具有抗性的新品种。下图为某种质粒表达载体和含CDPK基因的DNA片段示意图,图中标记了限制酶的切割位点。回答下列问题。
(1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以从基因文库中获得。基因文库包括_______________,为了使CDPK基因插入质粒中,应选取________________两种限制性核酸内切酶分别切割质粒和含目的基因的DNA片段。
(2)将获取的CDPK基因进行PCR扩增,目前在PCR反应中使用Taq酶而不使用大肠杆菌DNA聚合酶主要原因是_____________________________________。
(3)图中所示的质粒为Ti质粒,操作过程中需要把CDFK基因插入到质粒的T-DNA片段中,T-DNA片段在转化中的作用是____________________________。为了检测CDPK基因是否导入成功,可以用________________________________作探针检测CDPK基因是否导入拟南芥细胞,导入成功的标志是________________ 。
(4)为研究CDPK基因表达载体对拟南芥的遗传转化的影响,将转化后的拟南芥植株生长成熟后,采集其种子,播种于含________________________的MS培养基中进行抗性筛选。
(5)基因工程的核心是_________________ ,目的是 ____________________________。
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科研人员将潮霉素抗性基因(H基因,答题涉及“潮霉素抗性基因”一律用字母H表示)转入至拟南芥(2n=10)中,获得不同株系的拟南芥。
(1)将目的基因导入拟南芥常用的方法是______________,具体方法为:将目的基因插入到________________上,此结构具有可转移至受体细胞并整合到受体细胞染色体上的特点。
(2)为确定不同拟南芥株系导入的基因在染色体上的相对位置,科研人员筛选并通过自交获得转基因成功的4个纯合株系:1、2、3、4,做了如下杂交实验。
①4个纯合株系植株分别与非转基因植株正、反交得F1,F1自交获得F2。F2中抗潮霉素性状与不抗潮霉素性状的植株比例为_______,表明每个株系的H基因均位于一对同源染色体上的同一位点,但不能确定4个株系的H基因是否位于同一对同源染色体上。
②将上述4个纯合株系植株间进行配组形成6个杂交组合(1×2、1×3、1×4、2×3、2×4、3×4),每个组合得F1,F1自交获得F2。
a.除2×4组合外,其它杂交组合F2中抗潮霉素性状与不抗潮霉素性状的植株比例均为15:1,表明1、2、3三个株系相比较,它们的H基因位于________________(同源染色体/非同源染色体)上,F2中不抗潮霉素性状的植株比例为1/16的原因是___________________________(请从F1中与此比例直接相关的配子类型和比例的角度作答)。
b.2×4组合F2植株全表现抗潮霉素性状。假设株系1中H基因在染色体上的位置如图1(竖线代表染色体,横线代表基因的位置)所示,请推测株系2中H基因的位置和株系4中H基因的两种可能的位置(参照图1的模式在答题卡中的图2中标注)。___
c.根据上述实验推测,利用上述方法导入到拟南芥中的基因的插入位置是_____(随机/固定)的。
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microRNA(miRNA)是存在于动植物体内的短RNA分子,其虽然在细胞内不参与蛋白质的编码,但作为基因调控因子发挥重要作用。最近美国加州大学的一个遗传研究小组以拟南芥为研究对象,发现了miRNA对靶基因的抑制位置。如图为发生在拟南芥植株体内的相应变化,请回答:
(1)图甲中②③过程主要在_________中进行,图乙过程发生的场所是________。
(2)密码子是指_________上决定1个氨基酸的3个相邻碱基,图乙中甲硫氨酸对应的密码子是__________。
(3)图丙所示的DNA若部分碱基发生了变化,但其编码的氨基酸可能不变,其原因是____。
(4)若在体外研究miRNA的功能,需先提取拟南芥的DNA,图丙所示为拟南芥的部分DNA,若对其进行大量复制共得到64个相同的DNA片段,则该DNA片段复制了_______次,其复制方式为__________________。
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(microRNA(miRNA)是存在于动植物体内的短RNA分子,其虽然在细胞内不参与蛋白质的编码,但作为基因调控因子发挥重要作用。最近美国加州大学的一个遗传研究小组以拟南芥为研究对象,发现了miRNA对靶基因的抑制位置。如图为发生在拟南芥植株体内的相应变化,请回答:
(1)图甲中主要在细胞核中进行的过程是________(填序号)。
(2)图乙对应图甲中的过程_______(填序号),参与该过程的RNA分子有________。RNA适于用作DNA的信使,原因是____________________________________________。
(3)图丙所示的DNA若部分碱基发生了变化,但其编码的氨基酸可能不变,其原因是_____________。
(4)若在体外研究miRNA的功能,需先提取拟南芥的DNA,图丙所示为拟南芥的部分DNA,若对其进行大量复制共得到128个相同的DNA片段,则至少要向试管中加入______个鸟嘌呤脱氧核苷酸。
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我国科学家利用Bt毒蛋白基因转入普通棉花,培育出转基因的抗虫棉,对棉铃虫有较强抗性。回答下列问题:
(1)从苏云金芽孢杆菌中分离出Bt毒蛋白基因,构建基因表达载体导入棉花细胞。获得的抗虫棉也能产生相同的Bt毒蛋白,从翻译的角度分析,其原理是___________________________________。
(2)从分子水平检测抗虫棉是否培育成功,可以利用抗原-抗体杂交来检测。若有__________出现,说明已形成Bt毒蛋白。在该检测方法中,Bt毒蛋白属于____________ 。
(3)从个体水平鉴定抗虫棉是否培育成功,取一定量长势良好的转基因棉花植株接种适量的棉铃虫作为实验组,对照组如何设置:_______________________________。在相同且适宜的条件下培养一段时间,观察并统计两组棉花叶片的受损程度。获得的抗虫棉若要扩大生产, 可以通过_________________________ 技术进行微型繁殖。
(4)在农业生产中,抗虫棉大面积种植的区域还需配套种植一定量的普通棉花,从进化的角度分析,原因是__________________________________________________________________ 。
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利用基因工程等技术手段可以生产各种抗性棺物品种。如科学家将鱼的抗冻蛋白基因导入番茄,使番茄的耐寒能力大大提高。回答下列问题:
(1)基因工程技术的核心步骤是___________,这一过程中需要用到的工具酶是___________。
(2)在基因工程中,将鱼的抗冻蛋白基因导入番茄细胞最常采用的方法是_______。通常采用_______技术来检测鱼的抗冻蛋白基因是否插入了番茄的基因组。鱼的抗冻蛋白基因在番茄细胞中表达时是遵循中心法则的,请用箭头和文字写出基因表达的过程中遗传信息在不同分子之间的流动情况:_________________。
(3)将含有鱼的抗冻蛋白基因的番茄细胞培育成具有抗冻能力的番茄植株,运用的生物技术是_______,该技术的理论基础是___________。所用培养基中需要添加生长素和细胞分裂素,它们的作用是启动细胞进行有丝分裂,诱导离体细胞经过___________,从而形成具有抗冻能力的番茄植株。
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科学家常选用的细菌质粒往往带有一个抗菌素抗性基因,该抗性基因的主要作用是
A. 提高受体细胞在自然环境中的耐热性
B. 有利于检测目的基因否导入受体细胞
C. 增加质粒分子的相对分子质量
D. 便于与外源基因连接
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科学家常选用的细菌质粒往往带有一个抗生素抗性基因,该抗性基因的主要作用是( )
A.提高受体细胞在自然环境中的耐热性
B.有利于检测目的基因是否导入受体细胞
C.增加质粒分子的相对分子质量
D.便于与外源基因连接
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科学家常选用的细菌质粒往往带有一个抗菌素抗性基因,该抗性基因的主要作用是
A.提高受体细胞在自然环境中的耐热性 B.有利于检测目的基因否导入受体细胞
C.增加质粒分子的相对分子质量 D.便于与外源基因连接
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科学家常选用的细菌质粒往往带有一个抗菌素抗性基因,该抗性基因的主要作用是
A.提高受体细胞在自然环境中的耐热性
B.有利于检测目的基因否导入受体细胞
C.增加质粒分子的相对分子质量
D.便于与外源基因连接
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