制备马铃薯Y病毒(PVY)外壳蛋白单克隆抗体(A和B)的过程如图甲所示,该抗 体可用于马铃薯是否感染PVY的检测;马铃薯感病叶片粗提取液经稀释后进行的单抗 检测结果如图乙所示;利用PVY单抗检测不同马铃薯组织的实验结果如图丙所示(D 值反映单抗与抗原结合情况)。
(1)图甲中“筛选2”需要对细胞进行克隆化培养和_________。
(2)图乙和图丙分别反映单克隆抗体具有_________和 ____________的特点。
(3)利用茎尖进行_________可以生产脱毒苗。有关茎尖含病毒少的“能量竞争”假说认为:病毒核酸和茎尖细胞分裂时DNA合成均需要消耗大量能量,茎尖细胞本身很活跃, 消耗能量较多,病毒因为缺少能量而被抑制。请设计实验验证该假说____________(要求写出实验 思路和符合实验假说的预期结果。
高二生物实验题中等难度题
制备马铃薯Y病毒(PVY)外壳蛋白单克隆抗体(A和B)的过程如图甲所示,该抗 体可用于马铃薯是否感染PVY的检测;马铃薯感病叶片粗提取液经稀释后进行的单抗 检测结果如图乙所示;利用PVY单抗检测不同马铃薯组织的实验结果如图丙所示(D 值反映单抗与抗原结合情况)。
(1)图甲中“筛选2”需要对细胞进行克隆化培养和_________。
(2)图乙和图丙分别反映单克隆抗体具有_________和 ____________的特点。
(3)利用茎尖进行_________可以生产脱毒苗。有关茎尖含病毒少的“能量竞争”假说认为:病毒核酸和茎尖细胞分裂时DNA合成均需要消耗大量能量,茎尖细胞本身很活跃, 消耗能量较多,病毒因为缺少能量而被抑制。请设计实验验证该假说____________(要求写出实验 思路和符合实验假说的预期结果。
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将PVY病毒外壳蛋白基因(PVY-CP)导入马铃薯,并使之表达即可获得抗PVY病毒马铃薯。图示是获得抗病毒马铃薯的部分操作,PVY-CP可以从质粒pBBZY中获取;质粒pMON316是选用的运载体,其中NPTⅡ基因是卡那霉素抗性基因,另已知部分限制酶识别序列和切割位点:
BamHⅠ | HindⅢ | BglⅡ | ClaⅠ | SmaⅠ | KpnⅠ |
G↓GATCC CCTAG↑G | A↓AGCTT TTCGA↑A | A↓GATCT TCTAG↑A | AT↓CGAT TAGC↑TA | CCC↓GGG GGG↑CCC | GGTAC↓C C↑CATGG |
请结合图像,运用所学知识回答问题:
(1)含有PVY-CP的质粒pBBZY保存在某细菌群体中,各个细菌含有相关不同的基因,这样的细菌群体称为_____________.
(2)以下对于步骤②中Klenow Polymerase这种物质功能方面的猜测,合理的是______(多选)。
A.具有催化作用
B.可以将DNA片段的黏性末端变成平末端
C.可以被胰蛋白酶水解
D.与DNA连接酶的功能相似
(3)步骤④中应该使用的限制酶是_______________(注意基因接入的方向)。
(4)以上过程中构建的基因表达载体除了图中所显示的组成部分以外,还应该包括______________________和复制原点等组成部分。
(5)利用农杆菌对植物体细胞进行转化,操作过程如下:首先需要将重组质粒pEY3导入____________________细胞中,要实现重组质粒成功导入,应使其处于____________。而后将转化的细胞转移到含有______________的培养基上进行筛选,再用于侵染植物细胞,最后将转化成功的植物细胞过_____________________技术培养成转基因抗病毒马铃薯植株。
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将PVY病毒外壳蛋白基因(PVY-CP)导入马铃薯,并使之表达即可获得抗PVY病毒马铃薯。图示是获得抗病毒马铃薯的部分操作,PVY-CP可以从质粒A中获取;质粒B是选用的运载体,另已知部分限制酶识别序列和切割位点:
请结合图像,运用所学知识回答问题:
(1)含有PVY-CP的质粒A保存在某细菌群体中,各个细菌含有相关不同的基因,这样的细菌群体称为_____________。
(2)关于步骤②中Ⅺenow酶的猜测,合理的是_____________。
A.催化合成的片段起引物作用
B.可以将DNA片段的粘性末端变成平末端
C.能催化DNA链的合成
D.与DNA连接酶的功能相同
(3)步骤④中应该使用的限制酶是________。
(4)利用基因工程将目的基因导入植物细胞,目前采用最多的方法是 。该方法首先需要将质粒C导入________中,进而转化马铃薯薯片,然后通过________技术获得抗PVY病毒马铃薯苗。
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科学家以SARS病毒的核衣壳蛋白为抗原,制备出了单克隆抗体。下列相关叙述,正确的是( )
A.利用该单克隆抗体可以诊断是否感染SARS病毒
B.体外培养单个B淋巴细胞可以获得针对SARS病毒的单克隆抗体
C.将等量B淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合,经诱导后融合的细胞即为杂交瘤细胞
D.将纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内,从小鼠血清中分离的抗体为单克隆抗体
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新冠疫情爆发以来,世界各国都在积极应对,共同防疫。近期,某国科研团队首次绘制出2019-nCoV的一个关键抗原蛋白分子(记作H蛋白)的3D结构,这种蛋白为开发疫苗、制备治疗性抗体提供了依据。某科研小组以该蛋白为抗原制备了单克隆抗体,具体流程是:免疫小鼠→细胞融合→选择性培养→单克隆抗体的制备,请回答:
(1)根据研究的目的,为使小鼠产生特定的B淋巴细胞,应采取的措施是_________________________。将从免疫的小鼠中获取的B淋巴细胞与_______________________细胞按一定比例混合,并加入促融合剂__________________________,诱导细胞融合。
(2)细胞融合是随机的过程,因此需要筛选,第一次筛选是在__________________________培养基中进行培养,目的是__________________________。第二次筛选的目的是__________________________。
(3)将筛选后最终得到的细胞在__________________________做大规模培养,或_______________________内增殖。
(4)该单克隆抗体可用于制备蛋白质检测试剂盒,以检测是否感染2019-nCoV,其原理是__________________________,与血浆抗体相比,其具有的优点是_________________________。
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今年年初,爆发了全球性新型肺炎疫情。初步研究表明,新型冠状病毒通过其表面的S-蛋白与人细胞膜上的ACE2相互识别,感染人的呼吸道上皮细胞。请分析回答问题:
(1)新型冠状病毒表面的S-蛋白作为_________剌激淋巴细胞,使机体产生_________性免疫反应,人细胞膜上的ACE2的化学本质是_________。
(2)感染病毒后,免疫系统对肺细胞强烈攻击引发肺炎,此时可通过适度使用_________对病人进行治疗,使其免疫功能下降,以避免肺部严重受损。
(3)科学家采集了感染新型冠状病毒并已康复的甲、乙两人的血液,检测相关抗体的水平,结果如图1。据此分析,应选取_________的B淋巴细胞用以制备单克隆抗体(单抗)。
(4)将制备的多种单抗分别与病毒混合,然后检测病毒对宿主细胞的感染率,结果如图2。据此分析,对病毒抑制效果最好的单抗是__________号。
(5)患者康复后一段时间,若再次受到该病毒的攻击,机体内相应的__________细胞迅速增殖分化,产生大量的浆细胞和效应T细胞。
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带状疱疹是一种由带状疱疹病毒(HSV)引起的急性疱疹性皮肤病,利用动物细胞工程技术制备出抗 HSV 的单克隆抗体可快速检测 HSV。回答下列问题:
(1)在制备抗 HSV 单克隆抗体过程中,先给小鼠注射一种纯化的 HSV 蛋白,一段时间后,若小鼠血清中抗_________的抗体检测呈阳性,说明小鼠体内产生了_______免疫反应。
(2)依据细胞膜的_________的特点,运用化学试剂________诱导B淋巴细胞与小鼠的骨髓瘤细胞融合。再经过筛选、检测,最终可获得所需的杂交瘤细胞。杂交瘤细胞的特点是___________________。
(3)若要大量制备抗该蛋白的单克隆抗体,可将该杂交瘤细胞注射到小鼠的腹腔中使其____,再提取腹水进行离心,从而得到所需抗体,该抗体具有________等特性。
(4)科学工作者正在研究用于治疗癌症的“生物导弹”,即单克隆抗体上连接抗癌药物。 “生物导弹”治疗癌症与普通化疗相比的优势是__________________。
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人乳头状瘤病毒(HPV)与宫颈癌的发生密切相关,抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV,从而及时监控宫颈癌的发生,以下是以HPV衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程,请据图回答:
(1)单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有______________________。
(2)将经融合处理后的细胞转到HAT接着基上培养的目的是 ,该细胞 (填“能”“不能”)产生专一性抗体,所产生的抗体 (填“一定”,“不一定”)能抗HPV。
(3)对于抗体检测呈______性的杂交瘤细胞克隆应进行克隆化培养,克隆化培养的方法最常用的是有限稀释法,即稀释细胞到3~10个/mL,每孔加入细胞稀释液______mL(填“0.1”“1”或“10”),使每个孔内不多于一个细胞,达到单克隆培养的目的。
(4)科学家从某些无限增殖细胞的细胞质中分离出了无限增殖调控基因(prG),该基因能激发动物细胞分裂,这为单克隆抗体的制备提供了更多的思路。除本题描述的一种制备单克隆抗体技术外,请再简要写出一种制备单克隆抗体的思路_________________________。
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人乳头状瘤病毒(HPV)与宫颈癌的发生密切相关,抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV,从而及时监控宫颈癌的发生,以下是以HPV衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程,请据图回答:
(1)单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有_____________________________。
(2)若要分析杂交瘤细胞中染色体,可通过解离、漂洗、___、制片等过程制成装片,然后在显微镜下观察。杂交瘤细胞中染色体数目与普通淋巴细胞相比具有的特点是____,在HAT培养基上存活的细胞可能包括____(填下列序号)。
①无抗体分泌的细胞
②抗HPV抗体的分泌细胞
③其它无关抗体的分泌细胞
(3)对于抗体检测呈____性的杂交克隆应尽早进行克隆化,克隆化的方法最常用的是有限稀释法,即稀释细胞到3~10个/mL,每孔加入细胞稀释液____mL(填“0.1”“1”或“10”),使每个孔内不多于一个细胞,达到单克隆培养的目的。
(4)由上述过程生产出的单克隆抗体不能直接用于人体,理由是__________________。
(5)科学家从某些无限增殖细胞的细胞质中分离出了无限增殖调控基因(prG),该基因能激发动物细胞分裂,这为单克隆抗体的制备提供了更多的思路。除本题描述的一种制备单克隆抗体技术外,请再简要写出一种制备单克隆抗体的思路____________。
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马铃薯是一种分布广泛、适应性强、产量高、营养价值丰富的粮食和经济作物,培育脱毒和抗毒的马铃薯品种是解决马铃薯质量退化和产量下降的有效方法。
(1)马铃薯茎尖病毒极少甚至无病毒,茎尖离体培养大致过程如图1 所示,马铃薯茎尖外植体大小对苗的脱毒率和成活率的影响如图2所示。请回答问题:
①依图1分析,马铃薯脱毒苗培养依据的主要原理是______________。将微茎尖接种在添加有植物激素的培养基中,经过______________和______________完成组织培养过程,获得试管苗。对脱毒苗进行病毒检测时,可采用_____________________方法检测病毒的基因。
②由图2可知,茎尖越小,__________________________,因此大小为________mm的茎尖外植体适宜马铃薯脱毒苗的培养
(2)研究表明将感染马铃薯的病毒(遗传物质是DNA)的蛋白质外壳基因导入马铃薯体内可以获得抗病毒的植株。
①简述将马铃薯病毒的蛋白质外壳基因转入马铃薯基因组中,获得抗病毒马铃薯的基本过程____________。
②在个体水平鉴定马铃薯植株是否具有抗病毒特性的方法是________________________,观察其生长状况。
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