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组织型纤溶酶原激活剂(tPA)在人体纤溶和凝血的平衡调节中发挥着关键性的作用，现欲利用基因工程技术将tPA基因导入奶牛成纤维细胞中，并通过核移植技术获得克隆转基因奶牛，最后从奶牛乳汁中获取组织型纤溶酶原激活剂。请回答：
（1）为获得大量tPA基因，可将其连接到______________上，通过大肠杆菌培养扩增。构建重组DNA分子时，需要用到的工具酶有__________________________，为了便于检测目的基因是否成功导入受体成纤维细胞中，重组DNA分子上要有________。
（2）核移植时，需将成纤维细胞的细胞核移人去核卵细胞中获得重组细胞，部分原因是卵细胞的细胞质具有调控__________发育的作用。通过__________技术,将重组细胞培养成早期囊胚。将早期囊胚移植到代孕受体之前需要经过__________处理，以便成功植入或着床。
（3）为了繁殖更多后代，可以通过胚胎分割技术，产生同卵多仔。下列关于该技术的叙述,错误的是_____。
A.增加胚胎数量，快速繁殖
B.可以采用相关酶处理卵裂球
C.该技术涉及显微操作技术
D.同卵多仔的表现型一定相同
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啤酒酵母是啤酒工业发酵菌种，对啤酒的品质、风味有很大影响。请回答：
（1）科研人员将表达乙肝病毒表面抗原的基因构建在重组质粒中，进而转入___，发酵生产 转基因酵母乙肝疫苗。在构建重组质粒过程中，通过同种限制性核酸内切酶（-G↓AATTC-）切割得到的一个目的基因和一个开环质粒，共有 __（A．1 个 B．2 个 C．3个D．4 个）粘性末端。将重组质粒导入受体细胞的操作步骤完成以后，需要对所有受体细胞进行筛选，这是因为___。该转基因技术实践应用的成功标志是 __。
（2）转基因技术结合胚胎工程在高等动物育种中也有成熟应用。人们将经过基因改造的胚胎干细胞核与 __融合，得到___，并促使其在体外分裂发育成 __，再通过胚胎移植获得后代。目前胚胎移植是胚胎工程中获得后代的唯一方法，其原因是 __。
（3）胚胎干细胞具有重要的生产和临床医学价值。在培养胚胎干细胞时，首先要在培养皿底部制备一层细胞，称为 __，其作用是 __。
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干扰素是抗病毒的特效药，干扰素基因缺失的个体，免疫力严重下降。科学家设计了以下流程，利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失的患者进行基因治疗。请回答：
(1)上图中进行的是___________(填“体内”或“体外”)基因治疗，①过程中利用的生物工程技术手段称为______________。若导入的干扰素基因序列为已知，则可通过___________获取。
(2)ES细胞是由囊胚中的___________分离出来的一类细胞，具有_________性,可以将其培养成人体各种组织器官。在培养过程中常被用作饲养层细胞的一般是___________。
(3)下列关于上述操作中的叙述正确的是_______________
A.①②操作体现了上皮细胞具有全能性
B.③过程可以用农杆菌转化法进行基因导入
C.完成基因导入的细胞就具有了合成并分泌干扰素的能力
D.基因治疗依据的变异原理是基因重组
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毛角蛋白Ⅱ型中间丝（KIFⅡ)基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。
(1)获取外源基因用到的工具酶是______________。
(2)在过程②中，用_______酶处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。把一个单细胞从群体中分离出来单独培养，使之繁衍成一个新的细胞群体的技术，叫细胞克隆。未经克隆化的细胞系具有_______性。由于人们对动物细胞所需营养物质还没有完全搞清楚，因此在培养细胞时需在培养基中加入一定量的________，在培养过程中应将培养瓶置于___________培养。
(3)若要获得多只相同的转基因山羊，可对图中早期胚胎进行_______后进行胚胎移植。
(4)下列有关转基因山羊培育过程的叙述，错误的是_____________。
A.图中重组细胞的细胞核来自导入目的基因的细胞
B.重组细胞最初分裂时开始进行DNA复制和基因的转录
C.将早期胚胎（如早期囊胚）植入到代孕母羊的输卵管或子宫角部位
D.如果KIFⅡ基因的序列是已知的，则可用化学方法合成或用聚合酶链式反应扩增该基因
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欲利用基因工程技术将人胰岛素基因转入到小鼠基因组中，以期利用小鼠生产出人胰岛素，请回答：
(1)若用逆转录的方法获得人胰岛素基因，则需要从人体相应的_________细胞中提取mRNA，获得的人胰岛素基因经过相应处理后，再利用显微注射技术将其注入到受体细胞中，下列最不适合作为受体细胞的是________(A．受精卵B．胚胎干细胞C．第一次卵裂形成的细胞D．第三次卵裂形成的细胞）
(2)为获得更多的受体细胞，可先对成年雌鼠注射激素进___________处理,将获得的卵母细胞培养成熟，与经__________处理的精子结合形成受精卵后再进行后期操作。
(3)导入胰岛素基因的受体细胞还需借助___________、___________等技术才能成为转基因小鼠。
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下图为某农户通过种植农作物，养殖猪、鸭，兴建沼气池等措施构建了新型农业生态系统。
请回答：
该系统有效促进了物质循环、能量流动和________________的畅通，经济、生态环境和社会效益的同步发展。使用化肥能在短期内能提高农作物产量，但过量使用会降低作物的产量和质量，降低经济效益，还会导致环境的破坏和________________的下降，进而影响农业生产的可持续发展。用动物粪便和农作物秸秆，通过发酵技术产生沼气为农户提供能源，利用了农业生态工程技术的________________技术。
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