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本卷共 54 题,其中:
选择题 50 题,综合题 4 题
简单题 54 题。总体难度: 简单
选择题 共 50 题
  1. 我国科学家运用基因工程技术,将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞并成功表达,培育出了抗虫棉。下列叙述不正确的是

    A.抗虫基因的提取和运输都需要专用的工具

    B.重组DNA分子中增加一个碱基对,不一定导致毒蛋白的毒性丧失

    C.抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递到近缘作物,从而造成基因污染

    D.通常通过检测目的基因产物来检测重组DNA是否已导入受体细菌

    难度: 简单查看答案及解析

  2. 下列说法正确的是

    A.质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器

    B.用适当的化学物质处理受体细菌表面,将重组DNA导入受体细菌

    C.质粒是基因工程中唯一用作运载目的基因的载体

    D.利用载体在宿主细胞内对目的基因进行大量复制的过程不能称为“克隆”

    难度: 简单查看答案及解析

  3. 下图四种质粒含有E1和E2两种限制酶的识别,Apr表示抗青霉素的抗性基因,Tcr表示抗四环素的抗性基因。将两端用E1切开的Tcr基因与用E1切开的质粒X-1混合连接,连接后获得的质粒类型中不可能有

    A.X-1            B.X-2            C.X-3            D.X-4

    难度: 简单查看答案及解析

  4. “X基因”是DNA分子上一个有遗传效应的片段,若要用PCR技术特异性地拷贝“X基因”,需在PCR反应中加入两种引物(注:引物的作用是与模板形成双链后在DNA聚合酶的作用下就可以继续链的延伸),两种引物及其与模板链的结合位置(如图甲所示)。经4轮循环后产物中有五种不同的DNA分子(如图乙所示)。下列关于第4轮循环后得到的产物种类(按①②③④⑤的顺序)所对应的数量分别是

    A. 1个、1个、 2个、2个、10个

    B. 2个、2个、4个、4个、6个

    C. 1个、1个、3个、3个、8个

    D. 1个、1个、 1个、1个、12个

    难度: 简单查看答案及解析

  5. 下列与细胞工程技术相关的表述中,不正确的是

    A.动物细胞培养与植物组织培养所用的培养基成分基本相同

    B.植物体细胞杂交技术可以克服常规的远缘杂交不亲和障碍

    C.动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同

    D.植物组织培养技术的理论基础是细胞的全能性

    难度: 简单查看答案及解析

  6. 某科技活动小组将二倍体番茄植株的花粉按下图所示的程序进行实验。根据图所示实验分析错误的是

    A.由花粉培养到植株A,体现了植物的生殖细胞具有全能性

    B.植物A一定为单倍体植株,其特点之一是高度不育

    C.在植株B细胞中,每对同源染色体上的成对基因都是纯合的

    D.由花粉培养到植株B,所有过程必需在无菌条件下培养

    难度: 简单查看答案及解析

  7. 将植物离体组织或细胞培养成愈伤组织的过程中,最可能没有发生变化的有

    A.细胞内的遗传物质                   B.细胞的形态结构

    C.细胞内表达的基因种类               D.细胞的分裂能力

    难度: 简单查看答案及解析

  8. 某研究小组为测定药物对体外培养细胞的毒性,准备对某种动物的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行动物细胞培养。下列有关说法正确的是

    A.甲、乙细胞在原代培养过程中,最终均会出现停止增殖的现象

    B.细胞培养应在CO2培养箱中进行,CO2的作用是刺激细胞的呼吸

    C.取单个肝肿瘤细胞进行培养,获得细胞群的方法不属于克隆培养法

    D.在利用两种肝组织块制备肝细胞悬液时,可用胃蛋白酶处理

    难度: 简单查看答案及解析

  9. 下列有关生物工程的叙述正确的是

    A.应用基因诊断技术,可检测受体细胞中的目的基因是否表达

    B.筛选产生抗体的杂交瘤细胞需要使用特定的选择培养基

    C.茎尖细胞具有很强的分裂能为,离体培养时不需要脱分化即可培养成完整植株

    D.将牛的体细胞核移植到去核卵细胞中,获得克隆牛是一种培育新物种的方式

    难度: 简单查看答案及解析

  10. 将特定药物与单克隆抗体相结合制成的“生物导弹”,能够用于杀死人类的某些癌细胞,其过程如图所示。下列相关叙述不正确的是

    A. ①过程的原理和植物原生质体融合的原理基本相同

    B. 经①形成的杂交瘤细胞能无限增殖并产生单一抗体

    C. ②过程需要筛选并克隆单个杂交瘤细胞

    D. 抗体的靶向作用使③过程具有高度特异性

    难度: 简单查看答案及解析

  11. 下列关于现代生物技术的叙述正确的是

    A. 蛋白质工程中直接改造的对象是天然蛋白质

    B. 动物体细胞培养所依据的原理是细胞的全能性

    C. 愈伤组织脱分化和再分化需要用一定比例的植物激素调控

    D. 生态农业能够提高物种丰富度和能量传递效率

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  12. 根据现代生物技术原理,为解决如下四个问题:①快速培养名贵花卉  ②筛选抗癌药物 ③提高农作物抗病能力  ④发挥雌性优良个体的繁殖潜力。依次可以应用的技术手段是

    技术

    组织培养

    基因工程

    胚胎工程

    细胞培养

    A

    B

    C

    D

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  13. 下列有关哺乳动物受精作用和胚胎发育的说法,不正确的是

    A. 卵细胞内有机物分解的速率小于受精卵

    B. 受精过程要依赖细胞膜上受体的识别作用

    C. 胚胎的总体积随着受精卵的分裂而不断增大

    D. 受精卵的分裂意味着新生命的发育过程开始

    难度: 简单查看答案及解析

  14. 下图是通过胚胎工程培育试管牛的过程。下列有关叙述不正确的是

    A.从良种母牛采集卵母细胞时采用激素处理,常使用的激素是促性腺激素

    B.胚胎移植的最适宜时期是发育到8细胞以上的胚胎,提高优良母畜的繁殖率

    C.体外培养时,除了给予一定量的O2外,还需要提供CO2气体以维持培养液的pH

    D.将人类白细胞介素基因导入牛受精卵,获得转基因母牛后,如果母牛的体细胞中含有人类白细胞介素基因即说明目的基因表达

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  15. 华南虎是国家一级保护动物,可采用试管动物技术进行人工繁殖,该技术包括的环节有

    ①转基因  ②核移植  ③体外受精  ④体细胞克隆  ⑤胚胎移植

    A. ①③              B. ①④            C. ②⑤           D. ③⑤

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  16. 如图为哺乳动物受精卵发育过程中某一时期的示意图,下列叙述正确的是

    A.此图为桑椹胚期,可作为胚胎移植的材料

    B.此图中细胞还没有分化,图中①②③依次为透明带、滋养层、内细胞团

    C.胚胎从①中伸展出来的过程叫做孵化

    D.进行胚胎分割时,取③中的细胞做性别鉴定

    难度: 简单查看答案及解析

  17. 关于受精过程的叙述错误的是

    A.获能后的精子与卵子相遇后,释放顶体酶穿过透明带进入放射冠

    B.透明带反应是防止多精入卵的第一道屏障

    C.精子外膜与卵黄膜相互融合,精子入卵

    D.雄原核形成的同时,卵子完成减数第二次分裂

    难度: 简单查看答案及解析

  18. 研究发现,在体外一定条件下培养造血干细胞,可以形成神经细胞。下列相关叙述中,不正确的是

    A.造血干细胞仅通过有丝分裂形成三种血细胞

    B.造血干细胞在体外形成神经细胞是基因选择性表达的结果

    C.神经细胞的形成除受基因的控制外,还受到细胞所处外界环境的影响

    D.造血干细胞有细胞周期,而神经细胞不具有细胞周期

    难度: 简单查看答案及解析

  19. 第三代试管婴儿技术也称胚胎植入前遗传学诊断,指在胚胎移植前,取胚胎细胞的遗传物质进行分析,筛选出健康胚胎进行移植的方法。下列有关说法错误的是

    A.体外受精后,必须经过胚胎体外培养后才能进行胚胎移植

    B.胚胎植入前遗传学诊断过程需要进行羊膜腔穿刺取羊水细胞

    C.胚胎移植的受体从技术上来说没有必要一定是胚胎的遗传学母亲

    D.第三代试管婴儿技术的成熟并不意味着大家可以随意选择和定制孩子

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  20. 实验人员将一段外源DNA片段(包含约850个基因)与丝状支原体(一种原核生物)的DNA进行重组后,植入大肠杆菌,制造出一种“新的生命”。该生物能够正常生长、繁殖。下列有关该技术应用的叙述中,错误的是

    A.该技术可以制造某些微生物,用于生产药品、制造染料、降解有毒物质等

    B.由于存在生殖隔离,因此人造生命进入自然界并不会破坏生物多样性

    C.人造生命扩散到自然界,有可能造成环境安全性问题

    D.此项技术可能被用来制造生物武器,从而危及人类安全

    难度: 简单查看答案及解析

  21. 某生态养殖大棚内,水草丛中栖息着螃蟹,水面上有浮床,其间栽培的某种绿叶蔬菜,在水面上方,黄瓜藤枝枝蔓蔓。同时大棚里还栽种了一种特殊辣椒,能起到驱虫的作用。下列有关该生态系统的叙述中,错误的是

    A.能量主要来自于绿色植物所固定的太阳能

    B.特殊辣椒的驱虫作用依赖于生态系统的信息传递

    C.浮床遮光能抑制浮游藻类的生长繁殖,可防止水华发生

    D.螃蟹、蔬菜、黄瓜组成了生物群落,并体现了群落的垂直结构

    难度: 简单查看答案及解析

  22. 建设生态农业时巧设、增设食物链的目的不包括

    A.努力实现物质的分层次多级利用      B.减轻对环境的污染,提高抵抗力稳定性

    C.加强生物防治,控制有害生物的危害  D.实现物质和能量的循环,使废物资源化

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  23. 矿山废弃地生态修复工程的关键是

    A.优先选择农作物以提高经济效益      B.选择合适的养殖动物以增加物种多样性

    C.植被恢复和土壤微生物群落的重建    D.尽可能依靠自然演替恢复其生态功能

    难度: 简单查看答案及解析

  24. 下图是某同学绘制的我国北方农区的一种“四位一体”的生态家园示意图,其中沼气池、猪舍、厕所和日光温室等保持了合理的结构和比例。下列说法正确的是

    ①在农村发展沼气有利于保护林草植被    ②该工程充分体现了物质循环再生的原理

    ③保持生物比例合理等同遵循整体性原理  ④能量可随着沼气的使用而流入生物体内

    A.①②            B.②③            C.③④            D.①④

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  25. 2011年4月的“阴性艾滋病”事件引发社会各界关注,由此加重了人们的“恐艾”心理。关于艾滋病病毒(HIV),下列叙述正确的是

    A.HIV是一种单细胞生物,在分类在属于原核生物

    B.由于HIV体内只一种细胞器,所以其营寄生生活

    C.获取大量HIV的方法是将其接种在营养物质齐全的培养基上培养

    D.HIV的生命活动离不开最基本的生命系统

    难度: 简单查看答案及解析

  26. 下列有关对生命系统的叙述中,正确的是

    A.生命系统的每个层次都是“系统”,能完整表现生命活动的最基本的“生命系统”是“细胞”

    B.蛋白质和核酸等生物大分子本身也可算作“系统”,也属于“生命系统”的层次

    C.“生态系统”是生命系统的一个层次,它代表一定自然区域内相互间有直接或间接联系的所有生物

    D.生物个体中由功能相关的“器官”联合组成的“系统”层次,是每种生物个体都具备

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  27. 下列各项组合中,能体现生命系统由简单到复杂的正确层次是

    ①皮肤  ②血液 ③神经元 ④一株蒲公英  ⑤细胞内蛋白质等化合物 ⑥噬菌体  ⑦同一片草地上所有山羊 ⑧一片果园 ⑨一个池塘的所有生物 ⑩一片草地的所有昆虫

    A.⑤⑥③②④⑦⑧                        B.③②①④⑦⑨⑧

    C.③②①④⑦⑩⑨⑧                      D.⑤②①③④⑦⑨⑧

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  28. 细胞学说的建立过程是一个科学家研究、开拓、继承、修正和发展的过程,充满了耐人寻味的曲折。下列说法正确的是

    A.德国科学家施莱登和施旺发现细胞并创立了细胞学说

    B.细胞学说认为细胞分为原核细胞和真核细胞

    C.德国科学家魏尔肖指出“所有的细胞都来源于先前存在的细胞”

    D.细胞学说揭示了生物的统一性和多样性

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  29. 下列选项中,若用圆圈表示原核生物(a)、真核生物(b)、乳酸菌(c)、硝化细菌(d)、酵母菌(e)、细菌(f),则这些概念的从属关系正确的是

    难度: 简单查看答案及解析

  30. 下图所示最可能是

    A.哺乳动物的精子                  B.原生动物

    C.病毒                            D.细菌

    难度: 简单查看答案及解析

  31. 下列有关微生物结构的叙述正确的是

    A. 酵母菌有核膜和线粒体           B. 硝化细菌没有核膜,有线粒体

    C. 颤藻细胞有叶绿体和核糖体      D. 质粒只存在于原核生物细菌中

    难度: 简单查看答案及解析

  32. 如图所示,判断下列有关说法中正确的是

    A.该生物没有叶绿体,无法进行光合作用,属于异养生物

    B.该生物无线粒体,生命活动所需能量只能通过无氧呼吸获得

    C.此细胞与人成熟的红细胞最明显的区别在于是否具有成形的细胞核

    D.蓝藻包括蓝球藻、念珠藻和颤藻等多种类型

    难度: 简单查看答案及解析

  33. 虽然蓝藻、乳酸菌和酵母菌的细胞结构及功能有很大区别,但是它们

    A. 都能进行DNA分子的复制                 B. 都没有核膜和染色体

    C. 都能通过有丝分裂增加细胞数目           D. 都能进行繁殖和有氧呼吸

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  34. 下列藻类中属于原核生物有几项

    ⑴伞藻  ⑵衣藻  ⑶硅藻  ⑷颤藻  ⑸小球藻  ⑹蓝球藻  ⑺念珠藻  ⑻褐藻  ⑼黑藻  ⑽红藻  ⑾金鱼藻  ⑿螺旋藻

    A.7项              B.6项              C.5项              D.4项

    难度: 简单查看答案及解析

  35. 下列关于蓝藻和水绵的比较,正确的是

    A.蓝藻细胞进行有丝分裂,水绵细胞进行无丝分裂

    B.蓝藻无叶绿体不能进行光合作用,水绵细胞有叶绿体能进行光合作用

    C.蓝藻细胞没有成形的细胞核,水绵细胞有成形的细胞核

    D.蓝藻细胞没有核糖体,水绵细胞有核糖体

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  36. 下列有关大肠杆菌的叙述中,正确的是

    A.大肠杆菌没有生物膜结构,为原核生物

    B.大肠杆菌中有DNA,没有RNA

    C.大肠杆菌的可遗传变异主要来自于基因重组

    D.基因工程中大肠杆菌是常用的受体细胞,其质粒是常用的运载体

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  37. 对于下列各种结构在生物中的叙述,不正确的是

    ①叶绿体  ②染色体  ③核膜  ④核糖体  ⑤细胞壁  ⑥拟核

    A.菠菜和发菜体内都含有①③④⑤           B.①—⑤在绿藻体内都存在

    C.除①②③外,其它都在颤藻的体内存在     D.大肠杆菌和蓝藻共有的是④⑤⑥

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  38. “达菲”(又名磷酸奥司他韦),是目前人们公认的抵抗甲型H1N1流感病毒的有效药物之一。该药具有能抑制流感病毒表面的一种蛋白质——神经胺酶的作用,从而使流感病毒不能从宿主细胞中释放出来。下列判断正确的是

    A.“达菲”能阻止甲型H1N1流感病毒在人体细胞内的繁殖

    B.“达菲”能阻止甲型H1N1流感病毒在人体细胞间的扩散

    C.“达菲”能使甲型H1N1流感病毒丧失对人体细胞的识别能力

    D.“达菲”能使甲型H1N1流感病毒中控制神经胺酶的基因发生突变

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  39. 用普通光学显微镜观察组织时

    A.用10倍物镜观察组织时镜头与玻片的距离比用40倍物镜观察时近

    B.若载玻片上有d字母,则视野中呈现p字母

    C.若将玻片标本向右移动,一污点不动,则污点可能在反光镜上

    D.换上高倍物镜后一定要用凹面镜和放大光圈

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  40. 在使用高倍镜观察酵母菌和大肠杆菌时

    A.都可以观察到细胞壁、细胞核

    B.都可以观察到核糖体

    C.若发现视野上方较暗下方较亮,应调节反光镜

    D.在低倍镜观察之后,直接换上高倍物镜观察不在视野中央的目标

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  41. 美国加州大学戴维斯分校的教授Jason DeJong近来研究发现了一种被称为巴氏芽孢杆菌(Bacillus pasteurii)的细菌,这种细菌能使方解石(碳酸钙)沉积在沙砾周围,从而将它们胶合固定在一起。研究人员还发现如果向松散液态的沙砾中注射培养的细菌、附加营养和氧气,这些松散液态的沙砾就能转化为固态。固态的沙砾有助于稳固地球从而达到预防地震的目的。下列有关巴氏芽孢杆菌的叙述,正确的是

    A. 巴氏芽孢杆菌的遗传物质是DNA,抗药基因位于质粒上

    B. 巴氏芽孢杆菌的基因中无内含子,只有外显子

    C. 巴氏芽孢杆菌的异化类型为厌氧型

    D. 巴氏芽孢杆菌无核膜,也无细胞器,但能进行有氧呼吸

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  42. 下列化合物中所含化学元素的种类最少的是

    A.生长激素          B.纤维素          C.叶绿素          D.ATP

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  43. 下列都含有氮元素的一组物质是

    A.脱氧核糖和脱氧核糖核酸             B.胰岛素和核糖核酸

    C.丙酮酸和丙氨酸                     D.脂肪和脂肪酶

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  44. 下列有关组成细胞的元素的说法,正确的是

    A.组成生物的大量元素中,C是最基本的元素,在细胞鲜重中含量总是最多的

    B.微量元素在生物体内含量很低,但不可缺少,如叶绿素的组成离不开Mg元素

    C.生物体内携带氨基酸进入核糖体的有机物一定不含S元素

    D.P是磷脂、蛋白质、ATP和核糖等多种化合物的组成元素

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  45. 下列有关生命的物质基础和结构基础的阐述,错误的是

    A.C、H、O、N、P是核糖体、ATP、染色质、核苷酸共有的化学元素

    B.线粒体可在有氧条件下将丙酮酸氧化分解为CO2和水

    C.乳酸菌、酵母菌和艾滋病病毒都有核糖体、DNA、RNA

    D.糖蛋白、抗体、限制酶、载体都是具有特异性识别作用的物质

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  46. 初冬霜冻之后,植物叶片中的细胞液浓度会增高以防止结冰。细胞中物质发生的变化,正确的是

    ①淀粉分解成葡萄糖          ②葡萄糖合成淀粉

    ③自由水与结合水比例增大    ④自由水与结合水比例减小

    A.①③            B.②③            C.②④           D.①④

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  47. 下列关于一些辅助诊断疾病的分析中,不正确的是

    选项

    化学试剂

    诊断疾病

    检测原理

    检测对象

    A

    基因探针

    甲型H1N1

    流感

    分子杂交

    血液中甲型H1N1流感病毒

    B

    斐林试剂

    糖尿病

    与还原糖的显色反应

    尿液中葡萄糖

    C

    单克隆抗体

    肺结核

    与抗原基因特异性结合

    肺炎双球菌

    D

    双缩脲试剂

    肾炎

    与蛋白质的显色反应

    尿液中的蛋白质

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  48. 从细胞膜上提取了某种成分,用非酶法处理后,加入双缩脲试剂处理后出现紫色,若加入斐林或班氏试剂并加热,出现砖红色沉淀,该成分是

    A.糖脂                                  B.磷脂

    C.脂蛋白                                D.糖蛋白

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  49. 现有四种样品:水、淀粉溶液、蛋白质溶液、淀粉酶溶液,某学生用三氯乙酸(一种蛋白质变性剂)和碘液正确鉴定出这四种样品,其实验步骤和结果见下表:

    样品号

    1

    2

    3

    4

    第一步

    加三氯乙酸

    无变化

    浑浊

    无变化

    浑浊

    第二步

    加碘液

    不变蓝

    不变蓝

    变蓝

    不变蓝

    第三步

    取2号样品与3号样品混合,37 ℃保温10 min,加碘液变蓝;取4号样品与3号样品混合,37 ℃保温10 min,加碘液不变蓝

    根据上述实验结果,下列判断中正确的是

    A.1水、2淀粉酶、3淀粉、4蛋白质    B.1淀粉、2蛋白质、3淀粉酶、4水

    C.1水、2蛋白质、3淀粉、4淀粉酶    D.1蛋白质、2淀粉酶、3淀粉、4水

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  50. 下图中①~③表示的是生物体内3种有机分子的结构。其中①仅存在于植物细胞中,有关说法正确的是

    A.①~③存在于所有植物细胞              B.②中也含有与a类似的结构

    C.细胞中没有①就不能产生③              D.没有③时,细胞仍能合成①

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综合题 共 4 题
  1. 如图的四个部分(Ⅰ~Ⅳ)是四种类型细胞的部分亚显微结构模式图,请根据图示回答下列问题。

    (1)从结构上看,图中________与其它三者差别最大,主要表现在________;(2)图中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ四类细胞都具有的细胞器是________,它们与周围环境进行信息交流均依赖的结构是________,该结构的化学元素组成主要有________。

    (3)图中________类中都有生物可进行光合作用合成有机物。

    (4) 在生态系统成分中,图中Ⅰ类细胞所代表的生物属于________或________。

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  2. 现代生物科技在畜牧业生产中有着广泛的应用,以下是科学家采用不同方法培育良种牛的过程,a -- h为操作过程,请据图回答有关问题。

    (1)为提高良种奶牛的繁殖能力,在获取卵母细胞之前需用________对奶牛进行处理,目的是使其________。

    (2)“转基因牛”D培育过程中,常用受精卵作为外源基因的受体细胞,其主要原因是

    。过程h常用的方法是________。h过程的核心步骤是________,该步骤需要的工具酶是

    ________。为了能确定目的基因已经导入到受精卵,相应的载体需要有________以便于进行检测。在蛋白质水平检测目的基因的表达通常采用的方法是 。

    (3)“试管牛”技术的操作流程是。(用图中字母和箭头形式表示)

    (4)图中数字标号③代表的结构为________,c→d过程需对其均等分割的目的是

    ________。

    (5)d操作的名称是________。 若要获得遗传物质完全相同的两个新个体,可对发育到________阶段的早期胚胎进行________处理,再植入到受体内。若要对早期胚胎进行长期保存,应将其置于条件下。

    (6)受体母牛必须和供体牛属于同一物种。移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是________。

    (7)在培育良种牛的过程中,都运用了动物细胞培养技术.在动物细胞培养过程中,为防止杂菌的污染而要加入一定量的________。

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  3. 下图为典型的农作物秸秆利用生态系统,请据图回答问题。

    (1)流经此生态系统的总能量是________。

    (2)“秸秆的多级利用”充分体现了生态工程的原理,最大限度地实现了物质的循环,减轻了燃烧秸秆造成的________效应。

    (3)菌床和排泄物的杂屑最终回田,如果农作物秸秆不经此过程直接还田,两过程比较,土壤获得的有机物较多的是________(填前者或后者),土壤中的有机物不能被植物直接吸收,必需经过________的分解产生从而提高农作物的光合作用,最终提高农作物的产量。

    (4)从图中分析,此生态系统的分解者是________。

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  4. 下面是将乙肝病毒控制合成病毒表面主蛋白的基因HBsAg导入巴斯德毕赤酵母菌生产乙肝疫苗的过程及有关资料,请分析回答下列问题。

    【资料1】巴斯德毕赤酵母菌是一种甲基营养型酵母菌,能将甲醇作为其唯一碳源,此时AOX1基因受到诱导而表达【5’AOX1和3’AOX1(TT)分别是基因AOX1的启动子和终止子】。

    【资料2】巴斯德毕赤酵母菌体内无天然质粒,所以科学家改造出了图1所示的pPIC9K质粒用作载体,其与目的基因形成的重组质粒经酶切后可以与酵母菌染色体发生同源重组,将目的基因整合于染色体中以实现表达。

    (1)如果要将HBsAg基因和pPIC9K质粒重组,应该在HBsAg基因两侧的A和B位置接上、________限制酶识别序列, 这样设计的优点是避免质粒和目的基因自身环化。

    (2)酶切获取HBsAg基因后,需用________将其连接到pPIC9K质粒上,形成重组质粒,并将其导入大肠杆菌以获取________。

    (3)步骤3中应选用限制酶________来切割重组质粒获得重组DNA,然后将其导入巴斯德毕赤酵母菌细胞。

    (4)为了确认巴斯德毕赤酵母菌转化是否成功,在培养基中应该加入卡拉霉素以便筛选,转化后的细胞中是否含有HBsAg基因,可以用________方法进行检测。

    (5)转化的酵母菌在培养基上培养一段时间后,需要向其中加入________以维持其生活,同时诱导HBsAg基因表达。

    (6)与大肠杆菌等细菌相比,用巴斯德毕赤酵母菌细胞作为基因工程的受体细胞,其优点是在蛋白质合成后,细胞可以对其进行________并分泌到细胞外,便于提取。

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