肺细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员在体外利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制，其影响机理如图，请回答下列问题：
（1）获取let-7基因后，进行基因扩增应采用_____________技术，该技术依据的原理是_____________。在操作步骤中需要加热至90～95℃使________，然后降温至55～60℃，使_____________。
（2）在进行肺癌细胞培养时，对培养液要进行无菌处理，通常还添加一定量的_____________，以防止培养过程中的杂菌污染；使用合成培养基时，通常加入_____________等一些天然成分。
（3）根据图示分析，可从细胞中提取 ______________进行分子杂交，以直接检测let-7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中_____（填“RASmRNA”或“RAS蛋白”）含量减少引起的。
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肺细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图1。
（1）基因工程的步骤中，过程①为______；载体应有RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动let-7基因转录，该部位称为_________。进行过程②时，需用____酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于细胞培养。
（2）let-7基因需采用PCR技术扩增，PCR反应体系的主要成分包含：扩增缓冲液（含Mg2+）、水，4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、耐高温的DNA聚合酶、引物Ⅰ和引物Ⅱ等，其中，模板DNA是指______。
（3）直接检测let-7基因是否转录，可从细胞中提取______进行分子杂交，肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中let-7基因的转录产物与______结合，从而导致____含量减少引起的。let-7基因表达调控的实质是______过程受阻。
（4）现有一长度为1000碱基对（bp）的DNA分子，用限制酶切开后得到仍是长度为1000bp的DNA分子，说明此DNA分子的形态为______。
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肺细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌．研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制,该基因工程技术基本流程如图1,研究发现let-7基因能影响癌基因RAS的表达，其影响机理如图2,请回答下列问题：
（1）进行图1过程①时，需用______酶切开载体以插入let-7基因．载体应有RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动let-7基因转录，该部位称为_____________．
（2）图1中重组载体导入肺癌细胞的常用方法是_____________
（3）根据图2分析，可从细胞中提取______进行分子杂交，以直接检测let-7基因是否转录．肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中______含量减少引起的，其实质是遗传信息表达时______过程受阻，导致RAS基因沉默．
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肺细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实验表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图１。
请回答：
⑴进行过程①时，需用 酶切开载体以插入let-7基因。载体应用RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动let-7基因转录，该部位称为 。
⑵进行过程②时，需用 酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。
⑶研究发现，let-7基因能影响RAS的表达，其影响机理如图２。据图分析，可从细胞提取 进行分子杂交，以直接检测let-7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中 （RASmRNA/RAS蛋白）含量减少引起的。
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肺细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let7基因导入肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图一请回答有关问题。
⑴进行过程①时，需用________酶切开载体并用_____________酶连接以插入let7基因。
（2）重组载体的基本组成成分包括_________ ________ ________ _________
(3)进行过程②时，需用______酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。
(4)研究发现，let7基因能影响癌基因RAS的表达，其影响机理如图二。据图分析，可从细胞中提取______进行分子杂交，以直接检测let7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中_____含量减少引起的。
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肺细胞中的let7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let7基因导入肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图1。
图1
图2
请回答有关问题。
(1)进行过程①时，需用________酶切开载体以插入let7基因。
(2)进行过程②时，需用______酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。
(3)研究发现，let7基因能影响癌基因RAS的表达，其影响机理如图2。据图分析，可从细胞中提取______进行分子杂交，以直接检测let7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中______(RAS mRNA/RAS蛋白)含量减少引起的。
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肺细胞中的let7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let7基因导入肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图1。
图1
图2
请回答有关问题。
(1)进行过程①时，需用________酶切开载体以插入let7基因。
(2)进行过程②时，需用______酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。
(3)研究发现，let7基因能影响癌基因RAS的表达，其影响机理如图2。据图分析，可从细胞中提取______进行分子杂交，以直接检测let7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中______(RAS mRNA/RAS蛋白)含量减少引起的。
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(10分）肺细胞中的let
7基因表达减弱,癌基因RAS表达增强,会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let7基因导入肺癌细胞实现表达,发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图1。
请回答
(1)进行过程①时,需用 酶切开载体以插入let7基因。载体应有RNA聚合酶识别和结合的部位,以驱动let7基因转录,该部位称为 。
(2)进行过程②时,需用 酶处理贴附在培养皿壁上的细胞,以利于传代培养。
(3)研究发现,let7基因能影响癌基因RAS的表达,其影响机理如图2。据图分析,可从细胞中提取 进行分子杂交,以直接检测let7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制,可能是由于细胞中 (RAS mRNA/RAS蛋白)含量减少引起的。
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肺细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌．研究人员利用基因工程技术将let-7基因导人肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制，研究发现，let-7基因能影响癌基因RAS的表达，其影响机理如图所示．则肺癌细胞增殖受到抑制的原因最可能是
A. 癌细胞中的RAS基因减少了
B. 癌细胞中的RAS mRNA增多了
C. 癌细胞中的RAS蛋白减少了
D. 癌细胞中的RAS mRNA减少了
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肺细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌．研究人员利用基因工程技术将let-7基因导人肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制，研究发现，let-7基因能影响癌基因RAS的表达，其影响机理如图所示．则肺癌细胞增殖受到抑制的原因最可能是
A. 癌细胞中的RAS基因减少了
B. 癌细胞中的RAS mRNA增多了
C. 癌细胞中的RAS蛋白减少了
D. 癌细胞中的RAS mRNA减少了
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研究发现，let-7基因能影响癌基因RAS的表达，使肺癌细胞的增殖受到抑制，其影响机理如图所示。下列相关叙述正确的是( )
A. 目的基因是否在受体细胞中转录，可用抗原-抗体杂交技术来进行检测
B. let-7基因转录的miRNA与RASmRNA的配对遵循碱基互补配对原则
C. 肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中RASmRNA含量减少引起的
D. let-7基因转录的miRNA无翻译功能是因为let-7基因缺少启动子
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