科学家将荒漠植物中的耐盐基因转移到莴苣细胞内，获得了转基因耐盐莴营新品种。在培育过程中用到了EcoRⅠ、SmaⅠ、NaeⅠ三种限制酶，如下图依次表示EcoRⅠ、SmaⅠ、NaeⅠ三种限制酶的识别序列及切割位点。请回答下列问题：
（1）限制酶能将双链DNA分子中的________________（化学键）断开。DNA分子经限制酶切割产生的片段的末端有两种形式——____________、____________。
（2）请绘出EcoRⅠ切割DNA分子后产生的末端____________，SmaⅠ和NaeⅠ切割形成的DNA片段之间________（填“能”或“不能”）连接形成重组DNA分子。
（3）将生长至四叶期的转基因幼苗转入____________中培养，进行耐盐试验，用非转基因幼苗作为对照，培养30天后观察现象。若_________________，则说明转基因植株获得了耐盐特性。
高二生物综合题中等难度题
科学家将荒漠植物中的耐盐基因转移到莴苣细胞内，获得了转基因耐盐莴苣新品种。在培育过程中用到了Ec0RⅠ、SmaⅠ、NaeⅠ三种限制酶，如下图依次表示Ec0RⅠ、SmaⅠ、NaeⅠ三种限制酶的识别序列及切割位点。请回答下列问题：
（1）限制酶主要是从___________（生物）中分离纯化而来的，限制酶能将双链DNA分子中的___________（化学键）断开。DNA分子经限制酶切割产生的片段末端有两种形式——_____________、_____________。
（2）请绘出Ec0RⅠ切割DNA分子后产生的末端_________________，SmaⅠ和NaeⅠ切割形成的DNA片段之间_____________（填“能”或“不能”）连接形成重组DNA分子。
（3）将生长至四叶期的转基因幼苗转入_____________中培养，进行耐盐试验，用非转基因幼苗作为对照，培养30天后观察现象。若_____________，则说明转基因植株获得了耐盐特性。
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我国科学家利用基因工程技术将海藻合成酶基因转移到甘蔗体内，获得了抗旱、高产、高糖的甘蔗新品种。以下关于植物基因工程的说法，正确的是（ ）
A.我国转基因抗虫棉是转入了植物凝集素基因培育出来的
B.可用于转基因植物的抗虫基因只有植物凝集素基因和蛋白酶抑制剂基因
C.抗真菌转基因植物中，可使用的基因有几丁质酶基因和抗毒素合成基因
D.提高作物的抗盐碱和抗干旱的能力，与调节渗透压的基因无关
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黑麦草具有抗除草剂草甘膦的能力，是因为黑麦草拥有编码抗草甘膦酶的基因。科学家利用该基因．通过转基因技术获得了抗除草剂草甘膦的玉米新品种。培育新品种过程中用到了PCR技术（如图所示），请回答下列问题:
（1）通过反转录法得到_______________文库，它属于部分基因文库，可从中选取抗草甘膦酶的基因。
（2）体外获得大量编码抗草甘膦酶的基因要利用PCR技术，该技术所依据的原理为_________，图中物质A是__________，B酶是__________。
（3）将目的基因导入植物细胞有多种方法，最常用的是_______________。
（4）若需要对转入抗草甘膦基因的玉米进行个体生物学水平的鉴定，需要对玉米_____。
（5）若实验结果不理想，为了提高抗草甘膦酶活性，可以通过___________工程设计和改造编码抗草甘膦酶的基因。
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培育农作物新品种的过程中，常利用植物组织培养技术。下列叙述正确的是（ ）
A. 培育转基因的外植体得到的新个体属于基因突变个体
B. 在植物组织培养过程中用理化因素诱导可获得大量有益突变体
C. 植物组织培养技术的理论基础是细胞的全能性
D. 单倍体育种中经减数分裂和组织培养两个过程能获得纯合二倍体
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培育农作物新品种的过程中，常利用植物组织培养技术。下列叙述正确的是
A．培育转基因的外植体得到的新个体属于基因突变个体
B．在植物组织培养过程中用理化因素诱导可获得大量有益突变体
C．单倍体育种中经减数分裂和组织培养两个过程能获得纯合二倍体
D．植物组织培养技术的理论基础是细胞的全能性
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科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄，使番茄细胞的耐寒能力大大提高，可以在相对寒冷的环境中生长。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ等四种限制酶切割位点，下图是转基因抗冻番茄培育过程的示意图(ampr为抗氨苄青霉素基因)，其中①～④是转基因抗冻番茄培育过程中的相关步骤，Ⅰ、Ⅱ表示相关结构或细胞。请据图回答问题。
(1)在构建基因表达载体时，可用一种或者多种限制酶进行切割。为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接，在此实例中，应该选用___________, __________限制酶，分别对_______________, ______________进行切割。
(2)培养基中的氨苄青霉素会抑制番茄愈伤组织细胞的生长，要利用该培养基筛选已导入鱼抗冻蛋白基因的番茄细胞，应使基因表达载体中含有________________________，作为标记基因。
(3)研究人员通常采用农杆菌转化法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内。通常采用______________________技术，在分子水平检测目的基因是否翻译形成了相应的蛋白质。
(4)利用组织培养技术将导入鱼抗冻蛋白基因的番茄组织细胞培育成植株。图中③、④依次表示组织培养过程中番茄组织细胞的____________, ______________过程。
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选修三、下图是某转基因植物的培育过程，将抗菜青虫的Bt毒蛋白基因转移到油菜中，培育出转基因抗虫的油菜品种。这一品种在生长过程中能产生特异的杀虫蛋白，对菜青虫有显著抗性，可大大减轻菜青虫对油菜的危害，提高油菜产量，并能减少农药使用，保护生态环境。
(1)将Bt毒蛋白基因从苏云金芽孢杆菌DNA中剪切出来的“剪刀”是__________，它的作用部位是DNA分子上特定两个核苷酸之间的 _____________；成功构建的基因表达载体又叫_________，其结构除了Bt毒蛋白基因外，还必须有启动子、终止子以及____________等。
(2)将目的基因导入受体细胞的方法有很多种，题中所用的是______________；若培育转基因动物，可用________________。
(3)转基因抗虫油菜的培育是否成功，最简便的检测方法是 __________________。
(4)已知转基因油菜中杀虫蛋白只结合某些昆虫肠上皮细胞表面的特异性受体，使细胞膜穿孔，肠细胞裂解，昆虫死亡。而该杀虫蛋白对人类的风险相对较小，原因是人类肠上皮细胞表面_____。
(5)转基因油菜获得的_______ 是由Bt毒蛋白基因的表达产物来体现的，苏云金芽孢杆菌和油菜细胞中的Bt毒蛋白基因所控制合成的Bt毒蛋白的结构和功能_________（相同或不同），合成该蛋白质的具体场所________________（相同或不同）。
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下图是某转基因植物的培育过程。将抗菜青虫的Bt毒蛋白基因转移到油菜中，培育出转基因抗虫的油菜品种。这一油菜品种在生长过程中，能产生特异的杀虫蛋白，对菜青虫有显著的抗性，可大大减轻菜青虫对油菜的危害，提高油菜的产量，并能减少农药的使用量，保护生态环境。请据图回答下列问题：
（1）将Bt毒蛋白基因从苏云金芽抱杆菌的DNA中剪切出来，所用的“剪刀”的作用部位是DNA分子上特定的两个脱氧核苷酸之间的____________。
（2）成功构建的基因表达载体又叫____________。
（3）题中所用的将目的基因导入受体细胞的方法是____________。
（4）培育的转基因抗虫油菜是否成功，最简便的检测方法是____________。
（5）已知转基因油菜中，杀虫蛋白只结合某些昆虫肠上皮细胞表面的特异性受体，使其细胞膜穿孔，肠细胞裂解，昆虫死亡，而该杀虫蛋白对人类的风险相对较小。其原因主要是________________________。
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长期以来 ,香蕉生产遭受病害的严重威胁 ,制约了其发展。目前 ,随着转基因抗病香蕉基因工程技术的日趋成熟 ,为培育抗病香蕉品种开辟了新途径。转基因抗病香蕉的培育过程如图所示，质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点。请回答：
（1）构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶 ，对 进行切割。
（2）培养基中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有 ，作为标记基因。
（3）能使抗病基因在香蕉细胞中特异性表达的调控序列是： (填字母序号)。
A.启动子 B.终止子 C.复制原点 D.标记基因
（4）将目的基因导入植物细胞常用方法有多种，图中所示方法为 。
（5）欲检测目的基因是否表达成功，可采用的技术
（6）利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成转基因植株。香蕉组织培养的培养基中除了含有一定的营养物质外还必须含有 等植物激素，它们会在 （填图中标号）阶段发挥作用，同时 （填图中标号）阶段还需要给予一定光照。
（7）从香蕉组织块到获得转基因抗病香蕉试管苗的过程中，需经过 。(填数字)
①无丝分裂 ②有丝分裂 ③减数分裂 ④ 原代培养 ⑤ 传代培养
⑥ 植物体细胞杂交 ⑦ 细胞融合 ⑧ 脱分化 ⑨ 再分化
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长期以来 ,香蕉生产遭受病害的严重威胁 ,制约了其发展。目前 ,随着转基因抗病香蕉基因工程技术的日趋成熟 ,为培育抗病香蕉品种开辟了新途径。转基因抗病香蕉的培育过程如图所示，质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点。请回答：
(1)构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶________________________________________________________________________________________________________ ，对________________________________________________________________________________ 进行切割。
(2)培养基中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有________________________________________________________________ ，作为标记基因。
（3）能使抗病基因在香蕉细胞中特异性表达的调控序列是：________________________________ (填字母序号)。
A.启动子 B.终止子 C.复制原点 D.标记基因
（4）将目的基因导入植物细胞常用方法有多种，图中所示方法为________________________________________________________________ 。
（5）欲检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因，可采用的技术是 ，欲检测目的基因是否转录出了mRNA，可采用的技术是________________________ ，欲检测目的基因是否表达成功，可采用的技术________________________________________________________ (填字母序号，各1分)。
A.分子杂交技术 B. DNA分子杂交技术 C. 抗原-抗体杂交技术 D. PCR
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