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根据基因工程的有关知识，回答下列问题：
（1）基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤： 、 、 、 。
（2）在基因工程的操作过程中需要用到两种工具酶——限制酶和DNA连接酶。其中限制酶能切割ＤＮＡ分子切割后产生 末端和
末端；DNA连接酶能将目的基因和载体连接起来，按其来源不同可分为两类，即 和 。（3）质粒载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下：
为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性
内切酶切割，该酶必须具有的特点是 。（4）基因工程中常用的载体有质粒、 和 。
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(12分)基因工程自20世纪70年代兴起之后，在短短40年间得到了飞速发展，目前成为生物科学核心技术，在农牧业、工业、环境、能源和医药卫生等方面展示出美好的前景，据相关资料回答下列有关问题：
图1 图2
（1）图1是转基因抗冻番茄培育过程的部分示意图(ampr为抗氨苄青霉素基因)，甲、乙表示相关结构或细胞。PstⅠ酶和Sma Ⅰ酶切割基因后将产生不同的黏性末端。图1中甲代表的是________________，乙可代表________，可用PstⅠ酶和SmaⅠ酶提取鱼的抗冻蛋白基因以避免目的基因末端发生任意连接。
（2）重症联合免疫缺陷病(简称SCID)是代表一种体液和细胞免疫严重缺陷的综合征。患者先天腺苷酸脱氨酶(ada)基因缺乏，运用现代生物技术进行治疗，可以使患者的免疫功能得到很大的修复。图2表示治疗SCID的过程，在这个实例中，携带人正常ada基因的细菌相当于________，充当“分子运输车”的是病毒，目的基因是________，受体细胞是 ，该种治疗方法称为________________。
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基因工程自20世纪70年代兴起之后，在短短40年间得到了飞速发展，目前成为生物科学核心技术，在农牧业、工业、环境、能源和医药卫生等方面展示出美好的前景，据相关资料回答下列有关问题：
（1）图1是转基因抗冻番茄培育过程的部分示意图(ampr为抗氨苄青霉素基因)，甲、乙表示相关结构或细胞。PstⅠ酶和Sma Ⅰ酶切割基因后将产生不同的黏性末端。图1中甲代表的是___________，乙可代表番茄细胞，可用PstⅠ酶和SmaⅠ酶提取鱼的抗冻蛋白基因以避免目的基因末端发生任意连接。
（2）重症联合免疫缺陷病(简称SCID)是代表一种体液和细胞免疫严重缺陷的综合征。患者先天腺苷酸脱氨酶(ada)基因缺乏，运用现代生物技术进行治疗，可以使患者的免疫功能得到很大的修复。图2表示治疗SCID的过程，在这个实例中，携带人正常ada基因的细菌相当于________，充当“分子运输车”的是病毒，目的基因是________，受体细胞是 ，该种治疗方法称为______________。
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请回答下列关于基因工程和蛋白质工程的问题：
（1） 获取真核细胞内目的基因的途径主要有 ，目的基因进人受体细胞需要 的协助。
（2） 基因工程的核心步骤是 ，此过程用到的工具酶是 。
（3）为获得能大量产生人干扰素的转基因牛，经常采用的受体细胞是 ，将目的基因导入此受体细胞常用的方法是 。
（4） 蛋白质工程是指以分子生物学相关理论为基础，通过基因修饰或基因合成，对 进行改造，或制造一种 的技术。在该工程中，引起蛋白质空间结构改变的原因是组成该蛋白质肽链的 序列发生了改变。
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转基因生物可用于生产人类所需要的药用蛋白，如激素、抗体、疫苗、酶等。下图甲是通过生物工程培育能产生人胰岛素的烟草的过程。请据图回答下列问题：
（1）基因工程的核心步骤是 （填字母）。此过程所需的工具酶是 。
（2）下图乙是载体和反转录得到的胰岛素基因的片段，已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。Gene Ⅰ和Gene Ⅱ为质粒上的标记基因，根据图示分析，应用限制酶 切割质粒，用限制酶 切割目的基因。构建的重组质粒中，除含有外源基因、标记基因外，还必须含有 。
（3）B过程中，常用 处理使细菌成为感受态细胞，从而利于重组质粒的导入。
（4）如果从分子水平检测人胰岛素基因是否表达成功，可以采用 方法。
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应用生物工程技术获得人们需要的生物新品种或新产品，是生物科学技术转化为生产力的重要体现。请回答下列问题：
（1）在培育转基因牛的过程中，需要的工具酶是，基因工程的核心步骤是。在基因表达载体中，目的基因的首端必须含有________，它是RNA聚合酶识别和结合的部位。
（2）动物细胞培养过程中，培养环境中除须提供O2外还须混入一定量的CO2，CO2的主要作用是________。为保证被培养的动物细胞处于无菌、无毒的环境，可以在细胞培养液中添加一定量的________，以防培养过程中的污染。
（3）单克隆抗体与血清抗体相比较，其最主要的优点在于________。
（4）动物体细胞核移植技术得到的动物，称为________动物，试管动物需要通过________、早期胚胎培养和胚胎移植步骤获得。
（5）生态工程建设所遵循的基本原理有：物质循环再生原理、原理、________原理、整体性原理和系统学和工程学等原理。
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应用生物工程技术获得人们需要的生物新品种或新产品，是生物科学技术转化为生产力的重要体现。请回答下列问题：
（1）在培育转基因牛的过程中，需要的工具酶是________，基因工程的核心步骤是________。在基因表达载体中，目的基因的首端必须含有________，它是RNA聚合酶识别和结合的部位。
（2）动物细胞培养过程中，培养环境中除须提供O2外还须混入一定量的CO2，CO2的主要作用是________。为保证被培养的动物细胞处于无菌、无毒的环境，可以在细胞培养液中添加一定量的________，以防培养过程中的污染。
（3）单克隆抗体与血清抗体相比较，其最主要的优点在于________。
（4）动物体细胞核移植技术得到的动物，称为________动物，试管动物需要通过________、早期胚胎培养和胚胎移植步骤获得。
（5）生态工程建设所遵循的基本原理有：物质循环再生原理、________原理、________原理、整体性原理和系统学和工程学等原理。
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生命活动的调节表现在很多方面，请根据所学知识回答下列问题
（1）下丘脑有多种功能，蝙蝠昼伏夜出的习性与下丘脑控制生物______的功能有关。
（2）当饮水不足或食物过咸会造成______升高，相关感受器兴奋进而使______释放抗利尿激素，促进肾小管和集合管对水的重吸收，同时，兴奋传至大脑皮层，使人产生______。
（3）在寒冷环境中，甲状腺激素分泌增加几乎作用于所有细胞，提高______使机体产生更多的热量以维持体温稳定。
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下图表示利用小鼠胚胎干细胞(ES细胞）做的研究，分析回答下列问题。
（1）a过程表示基因工程，则其核心步骤是__________。该过程所使用的工具酶有_______。
（2）b过程可增加ES细胞的数量，若想从早期胚胎中获得更多的ES细胞，可将早期胚胎培养至_____(时）期。d过程移入的胚胎能够存活，是因为代孕子宫不会对其发生_____________。同时能与受体子宫建立正常的___________联系。用肝癌细胞作抗原刺激B淋巴细胞，再将此淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后获得细胞产物是___________，该产物与抗癌药物结合制成“生物导弹”，从而定向杀死小鼠体内的肝癌细胞。
（3）上述研究过程中使用的技术有__________(至少2个）。若要培养试管动物，除以上技术外，还需要运用______________技术。
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下图表示利用小鼠胚胎干细胞（ES细胞）做的研究，请回答下列问题。
（1）a过程表示基因工程，则其核心步骤是_____________，该过程所使用的工具酶有_____________。
（2）将基因表达载体导入ES细胞的方法是__________________，为检测致癌基因是否已插入受体细胞DNA，可采用_________________技术。
（3）b过程可以获得更多的ES细胞，其采用的技术属于细胞工程中的________________技术。
（4）完成c、d过程的胚胎工程技术分别是_________________、__________________。若要培养试管动物，除以上两种技术外，还需要运用_____________________技术。试管动物的生殖方式属于_____________。
（5）用肝癌细胞作抗原刺激B淋巴细胞，再将此淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后获得细胞代谢产物_____________，该产物与抗癌药物结合制成“生物导弹”，从而定向杀死小鼠体内的肝癌细胞。
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