金属硫蛋白(MT)是一类广泛存在的金属结合蛋白,某研究小组计 划通过多聚酶链式反应(PCR)扩增获得目的基因,构建转基因工程菌,用于重金属废水的净 化处理。PCR 扩增过程示意图如图,请回答下列问题:
(1)从高表达 MT 蛋白的生物组织中提取 mRNA,通过_____获得_____用于 PCR 扩增。
(2)设计一对与 MT 基因两端序列互补配对的引物(引物 1 和引物 2),为方便构建重组质粒, 在引物中需要增加适当的 _____ 位点。设计引物时需要避免引物之间_____,而造成引物自连。
(3)PCR 扩增时,退火温度的设定是成败的关键。退火温度过高会破坏_____的碱基配对。退 火温度的设定与引物长度、碱基组成有关,长度相同但_____的引物需要设定更高的退火温度。
(4)如果 PCR 反应得不到任何扩增产物,则可以采取的改进措施有_____(填序号:①升高退 火温度②降低退火温度③重新设计引物)。
(5)图中步骤 1 代表_____,步骤 2 代表退火,步骤 3 代表延伸。
高二生物综合题中等难度题
金属硫蛋白(MT)是一类广泛存在的金属结合蛋白,某研究小组计划通过多聚酶链式反应(PCR)扩增获得目的基因,构建转基因工程菌,用于重金属废水的净化处理。PCR扩增过程示意图如下,请回答下列问题:
(1)从高表达MT蛋白的生物组织中提取mRNA,通过___________获得___________用于PCR扩增。
(2)设计一对与MT基因两端序列互补配对的引物(引物1和引物2),为方便构建重组质粒,在引物中需要增加适当的___________位点。设计引物时需要避免引物之间形成___________,而造成引物自连。
(3)图中步骤1代表高温变性,可以使双链___________,步骤2代表退火,步骤3代表延伸,这三个步骤组成一轮循环。
(4)PCR扩增时,退火温度的设定是成败的关键。退火温度过高会破坏___________的碱基配对。退火温度的设定与引物长度、碱基组成有关,长度相同但___________的引物需要设定更高的退火温度。
(5)如果PCR反应得不到任何扩增产物,则可以采取的改进措施有___________(填序号:①升高退火温度②降低退火温度③重新设计引物)。
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金属硫蛋白(MT)是一类广泛存在的金属结合蛋白,某研究小组计划通过多聚酶链式反应(PCR)扩增获得目的基因,构建转基因工程菌,用于重金属废水的净化处理。PCR扩增过程示意图如下,请回答下列问题:
(1)设计一对与MT基因两端序列互补配对的引物(引物1和引物2),为方便构建重组质粒,在引物中需要增加适当的______________位点。设计引物时需要避免引物之间形成______________,而造成引物自连。
(2)图中步骤1代表______________,步骤2代表退火,步骤3代表延伸,这三个步骤组成一轮循环。
(3)PCR扩增时,退火温度的设定是成败的关键。退火温度过高会破坏引物与模板之间的碱基配对。退火温度的设定与引物长度、碱基组成有关,长度相同但____________的引物需要设定更高的退火温度。
(4)如果PCR反应得不到任何扩增产物,则可以采取的改进措施有_____(填序号:①升高退火温度 ②降低退火温度 ③重新设计引物)。
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金属硫蛋白(MT)是一类广泛存在的金属结合蛋白,某研究小组计 划通过多聚酶链式反应(PCR)扩增获得目的基因,构建转基因工程菌,用于重金属废水的净 化处理。PCR 扩增过程示意图如图,请回答下列问题:
(1)从高表达 MT 蛋白的生物组织中提取 mRNA,通过_____获得_____用于 PCR 扩增。
(2)设计一对与 MT 基因两端序列互补配对的引物(引物 1 和引物 2),为方便构建重组质粒, 在引物中需要增加适当的 _____ 位点。设计引物时需要避免引物之间_____,而造成引物自连。
(3)PCR 扩增时,退火温度的设定是成败的关键。退火温度过高会破坏_____的碱基配对。退 火温度的设定与引物长度、碱基组成有关,长度相同但_____的引物需要设定更高的退火温度。
(4)如果 PCR 反应得不到任何扩增产物,则可以采取的改进措施有_____(填序号:①升高退 火温度②降低退火温度③重新设计引物)。
(5)图中步骤 1 代表_____,步骤 2 代表退火,步骤 3 代表延伸。
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金属硫蛋白(MT)是一类广泛存在的金属结合蛋白,某研究小组计 划通过多聚酶链式反应(PCR)扩增获得目的基因,构建转基因工程菌,用于重金属废水的净 化处理。PCR 扩增过程示意图如图,请回答下列问题:
(1)从高表达 MT 蛋白的生物组织中提取 mRNA,通过_____获得_____用于 PCR 扩增。
(2)设计一对与 MT 基因两端序列互补配对的引物(引物 1 和引物 2),为方便构建重组质粒, 在引物中需要增加适当的 _____ 位点。设计引物时需要避免引物之间_____,而造成引物自连。
(3)PCR 扩增时,退火温度的设定是成败的关键。退火温度过高会破坏_____的碱基配对。退 火温度的设定与引物长度、碱基组成有关,长度相同但_____的引物需要设定更高的退火温度。
(4)如果 PCR 反应得不到任何扩增产物,则可以采取的改进措施有_____(填序号:①升高退 火温度②降低退火温度③重新设计引物)。
(5)图中步骤 1 代表_____,步骤 2 代表退火,步骤 3 代表延伸。
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金属硫蛋白(MT)是一类广泛存在的金属结合蛋白,某研究小组计划通过PCR技术扩增获得目的基因,构建转基因工程菌,用于重金属废水的净化处理。PCR扩增过程示意图如下,引物1和引物2分别与MT基因两端的序列互补。下列表述正确的是( )
A.引物1和引物2的序列相同,且序列已知
B.步骤1需要解旋酶,步骤2需要耐高温的DNA聚合酶,步骤3需要DNA连接酶
C.第三轮循环后,可扩增出2个所需要的目的基因分子
D.为方便构建重组质粒,可在引物中设计适当的限制性核酸内切酶位点
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研究人员将鱼的抗冻基因导入番茄体内,获得抗冻能力明显提高的番茄新品种。下列操作合理的是
A. 设计相应DNA单链片段作为引物,利用PCR技术扩增目的基因
B. 利用限制性核酸内切酶和DNA聚合酶构建基因表达载体
C. 将基因表达载体导入番茄体细胞之前需用Ca2+处理细胞
D. 运用DNA分子杂交技术检测抗冻基因是否在番茄细胞中表达
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研究人员将鱼的抗冻基因导入番茄体内,获得抗冻能力明显提高的番茄新品种。下列操作合理的是
A.设计相应DNA单链片段作为引物,利用PCR技术扩增目的基因
B.利用限制性核酸内切酶和DNA聚合酶构建基因表达载体
C.将基因表达载体导入番茄体细胞之前需用Ca2+处理细胞
D.运用DNA分子杂交技术检测抗冻基因是否在番茄细胞中表达
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【生物——现代生物科技专题】
下面是利用奶山羊乳腺生物反应器制备药用白蛋白的流程图,请回答下列问题:
(1)若要大量获得目的基因,可使用 扩增白蛋白基因,通过③构建的重组表达载体包括目的基因、启动子、终止子和 、复制原点等部分。该重组表达载体导入的受精卵性染色体组成应为 。
(2)如果需要通过①采集到更多的卵子,常用的激素是 ;通过②采集的精子需 后才能进行受精作用。
⑶在体外培养受精卵时,除了给予一定量的O2以维持细胞呼吸外,还需要提供 (气体)以维持 。
(4)为使⑤能成功进行,需要对奶山羊C进行 处理,使之与供体的生理状况保持相同。
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图1是某基因工程中构建重组质粒的过程示意图,载体质粒P0具有四环素抗性基因(tetr)和氨苄青霉素抗性基因(ampr)。请回答下列问题:
(1)用Taq DNA聚合酶进行PCR扩增获得的目的基因片段,其两端各自带有一个腺嘌呤脱氧核苷酸。载体P1用酶处理,在两端各添加了一个碱基为________的脱氧核苷酸,形成P2;P2和目的基因片段在________酶作用下,形成重组质粒P3。
(2)为筛选出含有重组质粒P3的菌落,采用含有不同抗生素的平板进行筛选,得到A、B、C三类菌落,其生长情况如下表(“+”代表生长,“-”代表不生长)。根据表中结果判断,应选择的菌落是________(填表中字母)类,另外两类菌落质粒导入情况分别是______________________、________________________。
平板类型 菌落类型 | A | B | C |
无抗生素 | + | + | + |
氨苄青霉素 | + | - | + |
四环素 | + | - | - |
氨苄青霉素+四环素 | + | - | - |
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下列有关基因工程中载体的说法错误的是( )
A.PCR技术扩增目的基因需要用解旋酶解旋
B.基因表达载体的构建是基因工程的核心
C.图中启动子位于基因的首端,是核糖体识别和结合的部位
D.抗生素抗性基因的作用是作为标记基因,用于鉴别受体细胞中是否导入了目的基因
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