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下表是几种限制酶识别序列及其切割位点，图 1、图 2 中标注了相关限制酶的酶切位点。
| 限制酶 | BamHⅠ | BclⅠ | Sau3AⅠ | HindⅢ |
| 识别序列及切割位点 | 
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1.若图 2 中目的基因 D 是人的 α-抗胰蛋白酶的基因，现在要培养乳汁中含 α-抗胰蛋白酶的羊，研究者需将该基因与质粒重组后，通过______方法）注入到羊的_____中。
2.Sau3AI 酶切割 DNA 得到的粘性末端是_________。Sau3AI 酶能不能切开 BamH I 酶与 Bcl I 酶的识别序列？_____。
3.用图 1 中质粒和图 2 目的基因构建重组质粒，应选用_____、_____两种限制酶切割。
4.被限制酶切割后的运载体和目的基因片段，通过_____酶作用后获得重组质粒。
5.若 BamH I 酶切的 DNA 末端与 Bcl I 酶切的 DNA 末端连接，连接部位的 6 个碱基对序列为_____。
6.若按照 65 题中的两种限制酶切割，并将重组质粒导入大肠杆菌，则导入成功的大肠杆菌
A.对四环素敏感对氨苄青霉素不敏感 B.对四环素不敏感对氨苄青霉素敏感
C.对四环素和氨苄青霉素都敏感 D.对四环素和氨苄青霉素都不敏感
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下表为几种限制性核酸内切酶识别的序列和切割的位点。如图，已知某DNA在目的基因的两端1、2、3、4四处有BamHⅠ或EcoRⅠ或PstⅠ的酶切位点。现用BamHⅠ和EcoRⅠ两种酶同时切割该DNA片段（假设所用的酶均可将识别位点完全切开），下列各种酶切位点情况中，可以防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状的是( )
A．1 为BamHⅠ，2为EcoRⅠ，3为BamHⅠ，4为PstⅠ
B．1 为EcoRⅠ，2为BamHⅠ，3为BamHⅠ，4为PstⅠ
C．1 为PstⅠ， 2为EcoRⅠ，3为EcoRⅠ，4为BamHⅠ
D．1 为BamHⅠ，2为EcoRⅠ，3为PstⅠ， 4为EcoRⅠ
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限制性内切酶的特点是：( )
A.只能识别GAATTC序列
B.识别特定的核苷酸序列和具有特定的酶切位点
C.识别黏性末端
D.切割质粒DNA的标记基因
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限制性内切酶的特点是（ ）
A．识别特定的核苷酸序列和具有特定的酶切位点
B．只能识别GAATTC序列
C．识别黏性末端
D．切割质粒DNA的标记基
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限制性内切酶的特点是：
A.只能识别GAATTC序列
B.识别特定的核苷酸序列和具有特定的酶切位点
C.识别黏性末端
D.切割质粒DNA的标记基因
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某线性DNA分子含有5000个碱基对（bp），先用限制性核酸内切酶a完全切割，再把得到的产物用限制性核酸内切酶b完全切割，得到的DNA片段大小如下表。限制性核酸内切酶a和b的识别序列和切割位点如下图所示。下列有关叙述错误的是( )
A．a酶与b酶切断的化学键相同
B．限制性核酸内切酶a和b切出的DNA片段不能相互连接
C．该DNA分子中a酶能识别的碱基序列有3个
D．仅用b酶切割该DNA分子至少可得到三种DNA片段
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下图一为含有目的基因的DNA（外源DNA），图二为某质粒，表中是几种限制酶识别序列及其切割位点。用图中的外源DNA与质粒构建重组质粒。
请根据上述信息分析回答：
（1）、外源DNA、质粒分别有_______、_______个游离的磷酸基团。
（2）、DNA分子的一条多核苷酸链中，两个脱氧核苷酸之间以_________和_________相连。用SmaⅠ限制酶切割外源DNA，切开的是___________和__________之间相连的键。
（3）、如果用SmaⅠ酶切割外源DNA和质粒来重组质粒，其结果是_____________。
（4）、如果使用EcoRⅠ酶切割外源DNA和质粒，将目的基因片段与切割后的质粒混合，加入_________酶，获得的环状DNA可能有哪几种情况？______________。
（5）、如果使用BamHⅠ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理外源DNA和质粒，比用EcoRⅠ酶切割的优点是_____________________。
（6）、将重组质粒导入大肠杆菌中，培养基中需加入___________进行鉴别和筛选含有___________的细胞。
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图甲、乙中的箭头表示三种限制性核酸内切酶的酶切位点，ampr表示氨苄青霉素抗性基因，neo表示新霉素抗性基因。下列叙述正确的是（ ）
A．图甲中的质粒用BamH I切割后，含有4个游离的磷酸基团
B．在构建重组质粒时，可用Pst I和BamH I切割质粒和外源DNA
C．用Pst I和HindIII酶切，可以防止质粒的自身环化
D．导入目的基因的大肠杆菌可在含氨苄青霉素的培养基中生长
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下面是5种限制性内切酶对DNA分子的识别序列和剪切位点图(↓表示剪切点、切出的断面为黏性末端)：
限制酶1：——↓GATC——; 限制酶2：——CATG↓——；
限制酶3：——G↓GATCC——； 限制酶4：——CCGC↓GG——；
限制酶5：——↓CCAGG——。
请指出下列哪组表达正确
A. 限制酶2和4识别的序列都包含4个碱基对
B. 限制酶3和5识别的序列都包含5个碱基对
C. 限制酶1和3剪出的黏性末端相同
D. 限制酶1和2剪出的黏性末端相同
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基因工程中，限制性核酸内切酶的作用是在特定的位点识别和切割
A. DNA B. 蛋白质 C. 多糖 D. RNA
