科研人员利用胚胎干细胞培育转基因羊，以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子IX医用蛋白，其技...

科研人员利用胚胎干细胞培育转基因羊，以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子IX医用蛋白，其技术路线如图，下列说法不正确的是

A. 过程①取供体囊胚的内细胞团培养胚胎干细胞，原理是细胞增殖

B. 过程②利用的人凝血因子K基因可以从人的基因组文库中获取

C. 过程③中通过选择培养基，可筛选出含有目的基因的胚胎干细胞

D. 凝血因子IX只在乳腺细胞中表达，原因是其他细胞不含有该基因

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科研人员利用胚胎干细胞培育转基因羊，以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子IX医用蛋白，其技术路线如图，下列说法不正确的是

A.过程①取供体囊胚的内细胞团培养胚胎干细胞，原理是细胞增殖

B.过程②利用的人凝血因子IX基因可以从人的基因组文库中获取

C.过程③中通过选择培养基，可筛选出含有目的基因的胚胎干细胞

D.凝血因子IX只在乳腺细胞中表达，原因是其他细胞不含有该基因

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科研人员利用胚胎干细胞培育转基因羊，以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子IX医用蛋白，其技术路线如图，下列说法不正确的是

A.过程①取供体囊胚的内细胞团培养胚胎干细胞，原理是细胞增殖

B.过程②利用的人凝血因子IX基因可以从人的基因组文库中获取

C.过程③中通过选择培养基，可筛选出含有目的基因的胚胎干细胞

D.凝血因子IX只在乳腺细胞中表达，原因是其他细胞不含有该基因

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科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊，以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子IX医用蛋白，其技术路线如图。

（1）不直接将人的凝血因子IX基因导入绵羊胎儿成纤维细胞的原因是______________。由过程①获得的A称为______________。

（2）除转基因动物，通常还可以利用______________生产人凝血因子IX医用蛋白。

（3）在如图所示的过程①～④中，需依赖于碱基互补配对方能完成的是____________。

（4）从下列选项中选出基因工程的操作步骤并排序______________。

①动物细胞融合　　　　　　　　　　 ②目的基因与运载体重组　　 ③显微注射　　　　　　

④重组DNA分子导入受体细胞　　 ⑤获取目的基因　　　　　　　　 ⑥细胞核移植

⑦筛选含目的基因的受体细胞

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科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊，以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子IX医用蛋白，其技术路线如图。

⑴ ①过程构建的A是________________________。它必须将目的基因与_______________等调控组件重组在一起，才能通过分泌乳汁来生产人凝血因子IX医用蛋白。

⑵ 在核移植之前，必须先去掉受体卵母细胞的核，目的是________________

⑶ 进行胚胎移植时，代孕母羊对移入子宫的重组胚胎基本上不发生__________________，这为重组胚胎在代孕母羊体内的存活提供了可能。

⑷ 采用胎儿成纤维细胞进行转基因体细胞克隆，理论上可获得很多转基因绵羊，这是因为______________________________________。

⑸ 蛋白质工程也被称为第二代基因工程，其基本途径是从预期蛋白质功能出发，通过______________和________________，进而确定相对应的脱氧核苷酸序列，据此获得基因，再经表达、纯化获得蛋白质，之后还需要对蛋白质的生物功能进行鉴定。

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科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因牛，以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子IX医用蛋白，其技术路线如图。

（1） 由过程①获得的A为________________________。过程②③④分别采用的是胚胎工程中的___________技术、______________技术、_______________技术。

（2）图中去掉卵母细胞的核，目的是________________________。受体应选用____________期卵母细胞。

（3） 体细胞进行体外培养时，所需气体主要有O2和CO2，其中CO2的作用是____________。

（4）进行胚胎移植时，代孕母牛对移入子宫的重组胚胎基本上不发生__________________，这为重组胚胎在代孕母牛体内的存活提供了可能。为了提高已有胚胎的利用率，可采用____________________技术。

（5）采用胎儿成纤维细胞进行转基因体细胞克隆，理论上可获得无限个转基因牛，这是因为__________________________________。

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人血清白蛋白（HSA）具有重要的医用价值。科研人员通过生物工程技术获得转HSA基因母牛，以便通过乳腺生物反应器生产HSA，其主要技术流程如图所示：

回答下列问题：

（1）如图所示，将牛胎儿成纤维细胞核移入去核卵母细胞中，该技术称为____________技术；供核的牛胎儿成纤维细胞通常选用传代10代以内的细胞，其原因是_______________________。

（2）胚胎移植时，为使代孕母牛能处于适合的生理状态，需要用激素对其进行______________处理。

（3）SRY-PCR法性别鉴定的基本程序是：提取牛胎儿成纤维细胞的DNA，经PCR反应体系进行扩增，然后对扩增产物进行检测是否含SRY基因（Y染色体上特有的性别决定基因）片段。

①PCR反应体系中除含缓冲液、模板DNA、dNTP（包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP）、引物以外，还应含有____________；其中，dNTP的作用是既能提供合成DNA的原料，又能____________，引物应选用如图2中的___________（填下图中标号）。

②若扩增产物含大量SRY基因片段，则该种牛胎儿成纤维细胞_______（填“能”或“不能”）用作技术流程中转化过程的受体细胞。

（4）早期胚胎发育的过程大致为：受精卵→ ________→囊胚→原肠胚，囊胚中的___________细胞将发育成胎膜和胎盘。

（5）从细胞水平鉴定早期胚胎性别的方法是分析细胞的_________组成。

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科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊，以便生产人凝血因子IX医用蛋白，其技术路线如图。　　

（1）由过程①获得的A为_____________________。　

（2）在核移植之前，必须先去掉受体卵母细胞的核，目的是_____________________。受体细胞应选用___________期卵母细胞。　

（3）进行胚胎移植时，代孕母羊对移入子宫的重组胚胎基本上不发生免疫排斥反应，这为重组胚胎在代孕母羊体内的___________提供了可能。　

（4）采用胎儿成纤维细胞进行转基因体细胞克隆，理论上可获得无限个转基因绵羊，这是因为__________________________________________________。

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科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊，以便生产人凝血因子IX医用蛋白，其技术路线如图。　　

（1）由过程①获得的A为_____________________。　

（2）在核移植之前，必须先去掉受体卵母细胞的核，目的是_____________________。受体细胞应选用___________期卵母细胞。　

（3）进行胚胎移植时，代孕母羊对移入子宫的重组胚胎基本上不发生免疫排斥反应，这为重组胚胎在代孕母羊体内的___________提供了可能。　

（4）采用胎儿成纤维细胞进行转基因体细胞克隆，理论上可获得无限个转基因绵羊，这是因为__________________________________________________。

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人血清白蛋白（HSA）具有重要的医用价值。科研人员通过生物工程技术获得转HSA基因奶牛，并通过乳腺生物反应器生产HSA，其主要技术流程如下图所示：

回答下列问题：

（1）如上图所示，供核的牛胎儿成纤维细胞通常选用传代10代以内的细胞，其原因是 _______________________________________________________________。

（2）SRY-PCR法性别鉴定的基本程序是：提取牛胎儿成纤维细胞的DNA，经PCR反应体系扩增SRY基因（Y染色体上特有的性别决定基因）片段，然后对扩增产物进行检测。

要大量获得SRY基因，PCR扩增时需要加入两种引物：__________________（选填“引物I”、“引物II”、“引物III”、“引物IV”），原因是DNA聚合酶只能从核苷酸链的______________（2分，选填“5’端”或“3’端”）开始延伸DNA链，用两种引物才能确保______________。除引物外，PCR反应体系中还包含缓冲液、模板DNA、____________和 ____________等成分。通过SRY-PCR法进行性别鉴定，可获得更多的转HSA基因________牛，以便其通过乳腺生物反应器生产人血清白蛋白。

（3）在胚胎移植操作中，应对供体和受体母牛进行_____________处理，目的是使供体和受体处于相同的生理状态，使胚胎在移植前后所处的生理环境保持一致。由此可见，胚胎移植的实质是_____________________________________________。

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