科学家从某细菌中提取抗盐基因，转入烟草并培育成转基因抗盐烟草。下图是转基因抗盐烟草的培育过...

科学家从某细菌中提取抗盐基因，转入烟草并培育成转基因抗盐烟草。如图是转基因抗盐烟草的培育过程，含目的基因的DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。请分析回答下面的问题。

(1)①过程获得的抗盐基因可用PCR技术进行扩增，该技术须用________酶，所需的原料是________。

(2)已知几种限制酶识别序列及其切割位点(如下表)：

用图中的质粒和目的基因构建重组质粒，不能使用Sma　 Ⅰ酶切割，原因是

__________________________________________________________________

_________________________________________________________________。

图中①②过程为防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，应选用________酶对外源DNA、质粒进行切割。

(3)图中⑤、⑥依次表示组织培养过程中抗盐烟草细胞的________、________过程。

(4)为确定转基因抗盐烟草是否培育成功，既要用放射性同位素标记的________作探针进行分子杂交检测，又要在个体水平上鉴定，后者具体过程是___________________________________________________。

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科学家从某细菌中提取抗盐基因，转入烟草并培育成转基因抗盐烟草。下图是转基因抗盐烟草的培育过程，含目的基因的DNA和质粒上的箭头表示相关的酶切位点。请分析回答下列问题：

（1）在该过程中，研究人员首先获取了抗盐基因（目的基因），并采用　　　　　　　 技术对目的基因进行扩增，该技术需要的条件是　　　　　　　 、酶、原料、模板,该技术必须用　　　　　　 酶；然后构建基因表达载体，基因表达载体中除了具有目的基因、启动子和终止子之外，还需具有　　　　　　　　　　 。

（2）用图中的质粒和目的基因构建重组质粒，不能使用SmaⅠ酶切割，原因是　　　　　　

　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。图中①②过程为防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，应选用　　　　　　　　　　　 酶对外源DNA、质粒进行切割。

（3）为确定转基因抗盐烟草是否培育成功，既要用放射性同位素标记的　　　　　　　　　　　　 作探针进行分子杂交检测，又要在个体水平上鉴定，后者具体过程是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 _________　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

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科学家从某细菌中提取抗盐基因，转入烟草并培育成转基因抗盐烟草。下图是转基因抗盐烟草的培育过程，虚线箭头表示转录的方向。请分析回答下列问题：

（1）在该过程中，研究人员首先获取了抗盐基因（目的基因），并采用PCR技术（中文名称_____________）对目的基因进行扩增，该技术所用的酶是__酶，引物的设计依据是_____________。

（2）图中①②过程为防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，以及提高实验的成功率。应选用_______________两种酶对外源DNA和质粒进行切割。

（3）为筛选出成功导入重组质粒的农杆菌，④过程中培养基中需加入_________。

（4）通过农杆菌转化作用，可以使目的基因进入植物细胞，插入到________________，使其遗传特性得以稳定维持和表达。

（5）为了确定抗盐烟草是否培育成功，需要进一步做检测，进行如下图所示的操作。

①使用___________________________作探针进行分子杂交；

②将薄膜曝光在显影胶片上，放射自显影的结果表明____________________，继而对提供该细胞的转基因植株用_____________________的方法从个体水平鉴定烟草植株的耐盐性。

（6）将抗盐基因导入烟草细胞内，使烟草植株产生抗盐性状，这种新性状（变异）的来源属于__________________。

（7）若一个抗盐基因随机整合的一条染色体上，则其自交，子代抗盐与不抗盐个体的比例约为___________。

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普通烟草转入抗盐基因培育抗盐烟草的过程如下图所示。已知含抗盐基因的DNA和质粒上均有salⅠ、HindⅢ、BamHⅠ酶切位点，质粒上另有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。请回答问题：

（1）构建重组质粒时，应选用的限制酶是____________，然后对质粒和________进行切割，以保证它们定向连接。

（2）质粒的基本单位是　　　　　　　　　　　　 。

（3）切割后的目的基因与质粒由_______酶连接成重组质粒。筛选导入重组质粒的细菌，应在培养基中加入______________________________，

理由是___________________________________________________________________。

（4）若质粒被某一限制酶识别的序列是一GAATTC一，并在G与A之间切割。请画出被切割后所形成的黏性末端

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美国科学家将萤火虫的荧光素基因转入烟草植物细胞，获得高水平的表达，长成的植物通体光亮，堪称奇迹。下列有关发光烟草培育的叙述正确的是(　　)

A．在培育过程中需用同一种限制酶分别切割荧光素基因和质粒

B．将目的基因直接导入烟草细胞常用的方法是显微注射法

C．受体细胞只能用烟草的受精卵，因为受精卵的全能性最高

D．导入目的基因的烟草细胞不需进行植物组织培养就能发育成一个完整的植株

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下图是培育抗冻番茄的过程示意图。下列相关叙述正确的是（　　 ）

A.过程①和过程②所用的酶相同

B.转基因抗冻番茄植株的获得是定向变异的结果

C.重组质粒转入农杆菌的主要目的是筛选目的基因

D.可用DNA探针检测抗冻基因是否在番茄植株中表达

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我国科学家通过基因工程成功培育出抗虫棉,大致过程如图所示。以下说法，错误的是

A．作为载体的Ti质粒必须具有标记基因以便于筛选

B．目的基因必须插入到Ti质粒的T-DNA上

C．目的基因最终会整合到植物的染色体DNA上

D．抗虫棉能够抵抗各种病虫害

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科学家在河南华溪蟹中找到了金属硫蛋白基因，并以农杆菌的质粒为载体，采用转基因方法培育出了汞吸收能力极强的转基因烟草。下列有关该烟草培育的说法正确的是

A. 金属硫蛋白基因需插入到质粒的T-DNA上，才能转移到受体细胞中

B. 为培育出转基因烟草植株，应选择的受体细胞一定是烟草的受精卵

C. 同种限制酶既可以切割目的基因又可以切割质粒，因此不具有专一性

D. 转基因烟草与原烟草相比基因组成发生变化，导致两者出现生殖隔离

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科学家在河南华溪蟹中找到了金属硫蛋白基因，并以农杆菌的质粒为载体，采用转基因方法培育出了汞吸收能力极强的转基因烟草。下列有关该烟草培育的说法正确的是

A．金属硫蛋白基因需插入到质粒的T-DNA上，才能转移到受体细胞中

B．为培育出转基因烟草植株，应选择的受体细胞一定是烟草的受精卵

C．同种限制酶既可以切割目的基因又可以切割质粒，因此不具有专一性

D．转基因烟草与原烟草相比基因组成发生变化，导致两者出现生殖隔离

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土壤农杆菌是一种能引起双子叶植物产生冠瘿瘤的土壤细菌，它带有一个大的质粒叫Ti质粒，它是携带细菌DNA向宿主植物基因组转化所需信息的重要片段，只有T—DNA片段才转入植物细胞的基因组。转化过程如图所示，回答相关问题：

（1）从细胞结构的特点与复杂程度看，土壤农杆菌属于 　细胞，其质粒是能够自主________的环状DNA分子。

（2）为了使某种植物具有抗旱性状而又不引起植物产生冠瘿瘤，需对Ti质粒进行修饰，即去除瘤基因，将抗旱基因插入至________，然后在一定条件下将外植体在含________的稀释培养基上培养，此时修饰的T—DNA转入植物细胞并整合到植物基因组中。

（3）将上述外植体置于一个含有某种抗生素的合适培养基中进行筛选，发生转化的外植体开始增殖，形成________，通过产生不定芽和体细胞胚再长出整个植物。

（4）基因转化是否成功应对转基因植物进行鉴定，可以直接在 ________水平对转基因植物与非转基因植物进行比较；为获得纯合的转基因植株，还需要对转基因植株进行________。

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