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正常细胞中含有抑癌的 P53 基因，能表达抗病毒蛋白，帮助修复轻度变异的基因，也能使重复变异的细胞发生凋亡而避免肿瘤的发生；若它失活而不能表达，则基因突变的细胞易形成肿瘤。基因治疗肿瘤是根本的方法，腺病毒以其嗜好增殖细胞和对人体基本无害而成为良好的基因载体。野生型腺病毒含有抑制 P53 基因活性的 55Kda 基因，以及病毒复制基因 E1，因此需要重新构建有疗效的、安全的腺病毒。图甲、乙中箭头所指为相应限制酶切点。
（1）DNA 解旋酶直接作用于脱氧核苷酸之间的_____键（化学键）；限制酶直接作用于脱氧核苷酸之间的_____键（化学键）。
（2）构建重组腺病毒时，限制酶最好选择____，理由是：既可以去除_____基因以防止病毒复制后损伤健康细胞，同时还能破坏_____基因以防止其_____。
（3）在基因工程操作中，检测目的基因是否发挥功能的第一步是_____，检测方法是____技术，若出现杂交带，则表明成功。
（4）如果需将目的基因利用 PCR 技术扩增 10 次，则需要在缓冲液中至少加入____个引物。A．210B．210+2 C．211D．211-2
（5）PCR 扩增目的基因的前提是_____，以便根据这一序列合成引物。PCR 需提供_____， 引物，dNTP，DNA 模板。反应结束后，可以利用 DNA 的_____特点进行 DNA 含量的测定。
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p53基因与肿瘤的形成有关，其表达产生p53蛋白，当DNA受到损伤，p53蛋白会阻止DNA复制，以提供足够的时间使损伤DNA修复，如果修复失败，p53蛋白会引发细胞凋亡，阻止细胞进行不正常的增殖。则下列叙述正确的是（ ）
A. p53基因是一种抑癌基因，能抑制细胞癌变
B. p53基因突变后，就会引起细胞癌变
C. 癌细胞细胞膜上糖蛋白减少是因为细胞中核糖体数量减少
D. 分化和衰老的细胞均不会发生癌变
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P53蛋白是由P53基因控制合成的一种能与DNA发生特异性结合的蛋白质。该蛋白质可以阻止损伤的DNA复制，以提供足够的时间使损伤的DNA修复；如果修复失败，P53蛋白则引发细胞凋亡；如果P53基因的两个拷贝都发生了突变，对细胞的增殖失去控制，导致细胞癌变。下列说法中错误的是（ ）
A．P53基因是一种抑癌基因，DNA受损可激活P53基因
B．P53基因位于细胞核中，P53蛋白存在于细胞质中
C．P53蛋白在某些细胞的增殖周期调控过程中，起重要作用
D．P53蛋白诱导细胞凋亡，对抑制肿瘤发生起重要作用
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“今又生”是我国为数不多的首创基因治疗药物之一，其本质是利用腺病毒和人P53基因（抑癌基因）拼装得到的重组病毒。人的P53蛋白可对癌变前的DNA损伤进行修复，使其恢复正常，或诱导其进入休眠状态或细胞凋亡，阻止细胞癌变。“今又生”的载体采用第一代人5型腺病毒，其致病力很弱，其基因不整合到宿主细胞的基因组中，无遗传毒性；载体经基因工程改造后，只对细胞实施一次感染，不能复制，不能污染。请回答下列问题：
（1）在“今又生”的生产中，为了获得更高的安全性能，在载体一般应具备的条件中，科学家选择性地放弃了一般载体都应该具有的________。检测P53基因的表达产物，还可以采用________技术。
（2）如果要获取人类基因组中抑癌基因P53，可以采取的方法通常包括________和通过化学方法人工合成。目的基因的大量扩增则可以采用________，该技术中需使用的一种特殊的酶是________。
（3）在研究中如果要获得胚胎干细胞进行研究，则胚胎干细胞可来源于囊胚期
的_________，或胎儿的原始性腺，也可以通过________技术得到重组细胞后在进行相应处理获得。在哺乳动物早期发育过程中，囊胚的后一个阶段是________。
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“今又生”是我国为数不多的首创基因治疗药物之一，其本质是利 用腺病毒和人 P53 基因（抑癌基因）拼装得到的重组病毒。人的 P53 蛋白可对癌变前的 DNA 损 伤进行修复，使其恢复正常，或诱导其进入休眠状态或细胞凋亡，阻止细胞癌变。“今又生” 的载体采用第一代人 5 型腺病毒，其致病力很弱，其基因不整合到宿主细胞的基因组中，无 遗传毒性；载体经基因工程改造后，只对细胞实施一次感染，不能复制，不能污染。请回答 下列问题：
（1）在“今又生”的生产中，为了获得更高的安全性能，在载体一般应具备的条件中，科学 家选择性地放弃了一般载体都应该具有的_____能力。检测 P53 基因的表达产物， 还可以采用_____技术。
（2）如果要获得胚胎干细胞进行研究，则胚胎干细胞可来源于囊胚的__________________， 或婴儿的原始性腺；在培养时，细胞充满培养皿底部后停止分裂，这种现象称为____________。如果想继续培养则需要重新用___________________处理，然后 分瓶继续培养，这样的培养过程通常被称为传代培养。
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2003年，我国首创的基因治疗药物“今又生”被准上市，其本质是利用腺病毒和人p53基因拼装得到的重组病毒。人的P53蛋白可对高危癌前病变的DNA损伤进行修复，对DNA损伤无法修复的细胞，P53蛋白则诱导其进入冬眠状态或细胞凋亡。“今又生”的载体采用毒性极弱的第一代人5型腺病毒，其基因不整合到宿主细胞基因组中，无遗传毒性；载体经基因工程改造后，只对细胞实施一次感染，不能复制，无环境污染。
根据以上信息，完成下列问题：
（1）从题中分析，在“今又生”的生产中，为了获得更高的安全性能，科学家选择性的放弃了一般的载体都应该具有的___________________。
（2）P53功能蛋白是由4条完全相同的肽链组装而成，每条肽链由393个氨基酸缩合而成。若考虑到翻译过程起始密码和终止密码的存在，则p53基因至少应该含有____________个核苷酸。在形成P53蛋白时，需要脱去___________个水分子，此时核糖体上不含有下列哪种结构___________。
A．密码子
B．反密码子
C．核糖核苷酸
D．脱氧核苷酸
（3）试举一种人体中不含p53基因的细胞：_______________________。
（4）已知P53蛋白微量高效，只需极微量就可以完成功能，p53基因位于常染色体上。某男谢某表现型正常，但在他还是一个受精卵时，一条染色体上的p53基因突变成为无功能的假基因。若谢某和一个无遗传病史正常女性结婚，生下一儿晓东，晓东长大后娶了一个因p53突变导致的“易患癌症者”吴婷婷，晓东和婷婷准备生个娃娃，他们的娃娃是“易患癌症者”的概率应为__________________。
（5）婷婷为了治病，接受了“今又生”的基因治疗。在她接受注射后两个月，从她血液中提取了P53蛋白做了电泳分析，以便和治疗前对比。但是婷婷慌乱中把治疗前后的底片搞混淆了，两张底片分别如下图所示，请帮婷婷判断，她的治疗_________（是、否）有效，__________（左、右）边那幅图是治疗后的电泳分析图。
婷婷经过“今又生”注射后，仍然不幸的在三十五岁就患了癌。根据已有资料判断，她的治疗效果不显著的最可能原因是：（ ）
A．p53基因没有整合到体细胞中
B．p53基因没有转录出mRNA
C．p53基因没有表达出P53蛋白
D．注射浓度或注射次数不够
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细胞中的P53蛋白是由一种抑癌基因（P53基因）表达产生的蛋白质，可以抑制DNA的复制进而影响细胞分裂；所以具有抗肿瘤的作用。请回答下列问题：
（1）P53蛋白和P53基因共有的元素是____________，P53蛋白的基本构成单位之间的不同在于____________的不同，其结构特点是________________________。
（2）组成P53基因的糖为____________，基因中该糖与____________直接相连。
（3）P53蛋白是由一条N端酸性区有75个氨基酸、中间疏水区有75个氨基酸、C端碱性区有243个氨基酸所组成的肽链经过加工而成的。该蛋白分子含有__________个肽键，起作用的场所可能在____________。
（4）要观察P53基因在细胞中的分布情况，常用____________混合染液将细胞染色。
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P53蛋白是由一种抑癌基因(P53基因)表达产生的蛋白质，可以抑制DNA的复制和细胞分裂，所以具有抗肿瘤的作用。它是由一条N端酸性区有75个氨基酸，中间疏水区有75个氨基酸，C端碱性区有243个氨基酸所组成的肽链经过加工而成的。下列叙述不正确的是( )
A. 形成P53蛋白的过程中生成了390个水分子
B. 各种氨基酸之间的不同在于R基的不同
C. P53蛋白起作用的场所可能在细胞核
D. 此蛋白结构中，至少含有一个游离的氨基和一个游离的羧基
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P53蛋白是由一种抑癌基因（P53基因）表达产生的蛋白质，可以抑制DNA的复制和细胞分裂，所以具有抗肿瘤的作用。它是由一条N端酸性区有75个氨基酸，中间疏水区有75个氨基酸，C端碱性区有243个氨基酸所组成的肽链经过加工而成的。下列叙述不正确的是（ ）
A．各种氨基酸之间的不同在于R基的不同
B．形成P53蛋白的过程中生成了390个水分子
C．P53蛋白起作用的场所可能在细胞核
D．此蛋白结构中，至少含有一个游离的氨基和一个游离的羧基
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P53蛋白对细胞分裂起监视作用。P53蛋白可判断DNA损伤的程度，如果损伤较小，该蛋白就促使细胞自我修复（过程如图所示）；若DNA损伤较大，该蛋白则诱导细胞凋亡。下列有关叙述错误的是
A．抑制P53蛋白基因的表达，细胞将不能分裂
B．P53蛋白可导致细胞内的基因选择性表达
C．P53蛋白可使DNA受损的细胞分裂间期延长
D．若P53蛋白基因突变，则可能导致细胞异常分裂