下表是筛选异养型细菌的培养基配方。（1）苯胺是致癌物质，土壤中有分解苯胺的异养型细菌，此培...

下表是筛选异养型细菌的培养基配方。

（1）苯胺是致癌物质，土壤中有分解苯胺的异养型细菌，此培养基中的成分X除了为目的菌提供能源外，还能提供　　　　 和　　　　 。制备固体培养基时调节PH在　　　　　 ______步骤后。

（2）在以尿素为唯一氮源的培养基中加_____________, 可初步鉴定该种细菌能够分解尿素，原理用方程式表示为_______________________　 。

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尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能很好地被植物利用。同学们设计了以下实验来探究土壤中微生物对尿素的分解作用，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分及操作过程如下所示。（10分）

回答问题：

（1）制备培养基的一般步骤：计算→称量→溶化→定容→调整PH→　　　　　　 →倒平板

（2）培养基的类型很多，但培养基中一般都含有　　　　　　　　 、氮源、水和无机盐，上述培养基中“目的菌”生长所需的碳源和氮源分别是　　　　　　　　 和　　　　　　　 ，从用途划分这种培养基属于　　　　　　

培养基，而从物理性质的角度划分属于　　　　　　　 培养基。

（3）分离纯化微生物最常使用的接种方法是__　　　　　　 __和___　　　　　　　 ___两种。

（4）为充分说明上表所示培养基具有选择作用，应配制牛肉膏蛋白胨培养基作为实验对照，如果该培养基上的菌落数明显　　　　　　　　 （选填“多于”或“少于” ）表中培养基中的菌落数目，说明表中培养基已筛选出一些目的菌。

（5）对分离的菌种进行鉴定时，需要在上述培养基中加入酚红指示剂，细菌合成的脲酶 将尿素分解为氨，pH增高，使指示剂变　　　　　　　　　 。

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尿素是一种重要的农业肥料，经微生物分解后能更好的被植物利用．某生物兴趣小组试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计实验并成功筛选到能高效分解尿素的细菌（目的菌）．培养基成分如下表所示．

将表中物质溶解后，用蒸馏水定容到100mL．实验过程如图所示：

回答下列问题：

（1）该培养基能筛选出目的菌的原因是______．

（2）图中将细菌转到固体培养基上接种时，可采用的方法是______．初步筛选出来的菌种还需要进一步的鉴定：在培养基中加入______指示剂，接种并培养初步筛选的菌种，若指示剂变成______色，则可说明该菌种能够分解尿素．

（3）在实验中，下列材料或用具需要灭菌的是______，需要消毒的是______（填序号）．

①培养细菌的培养基与培养皿

②玻棒、试管、锥形瓶和吸管

③实验操作者的双手

（4）在进行分离分解尿素的细菌实验时，A同学从培养基上筛选出大约50个菌落，而其他同学只选择出大约20个菌落．A同学的实验结果产生的原因可能有______（填序号）．

①所取土样不同②培养基被污染③接种操作错误④没有设置对照实验

（5）实验结束后，使用过的培养基应该进行______处理后，才能倒掉．

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原油含有大量致癌的“多环芳烃”，分子结构十分稳定，有些细菌可以利用原油中的多环芳烃为碳源，在培养基中形成分解圈。某小组以如何筛选出能降解原油的菌株为课题设计了有关实验。有关说法正确的是

①用于筛选目的菌株的培养基其主要特点是以原油（多环芳烃)为唯一碳源

②培养基配制完成之后需进行消毒处理

③在选择培养基上形成的菌落，即为能分解多环芳烃的目的菌种

④筛选出目的菌种，可用平板划线法在培养基上进行接种和计数

A. ①②③④　　 B. ③④　　 C. ①③　　 D. ①②③

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下列生物学实验操作，能够顺利达到实验目的的是

A.可通过刚果红染色法对纤维素分解菌进行筛选

B.在接种酵母菌的新鲜葡萄汁中通入无菌空气制作果酒

C.土壤浸出液接种于牛肉膏蛋白胨培养基上筛选分解尿素的细菌

D.在分离土壤中的尿素分解菌实验中，采集的土样经高温灭菌后，可以用于制取土壤稀释液

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某实验小组欲从被石油污染过的土壤中筛选出能分解石油的细菌，下列操作中错误的是

A．利用平板划线法可对细菌进行计数

B．以石油为唯一碳源的培养基可用于筛选

C．目的菌不能利用无机碳源合成有机物

D．稀释土壤时需在火焰旁的目的是防杂菌污染

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某生物兴趣小组想对土壤中能分解尿素的细菌进行分离，并统计每克土壤样品中的活菌数目，确定了培养基配方(如下表)。将配方中各种物质溶解后，用蒸馏水定容到l 000 mL，再经高温灭菌，制成固体培养基以备用。

（1）为保持干燥，培养皿用________________法灭菌；待培养基冷却到________℃(填“20”“30”“40”或“50”)左右时，在酒精灯附近倒平板；待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，可以防止____________________________，防止造成污染。

（2）根据培养基的成分判断，该同学不能分离出土壤中分解尿素的细菌，原因是____________________________________________。

（3）该同学采用稀释涂布平板法检测样液中细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是________________________________；然后，将l mL样液稀释l00倍，在3个平板上用涂布法分别接入0．1 mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37，据此可得出每升样液中的活菌数为________________。

（4）若该同学采用显微镜直接计数法测量细菌数量，左下图是一块血细胞计数板正面示意图，其上有________个计数室。右下图是计数室中一个中格的细菌分布示意图，该中格内细菌数量应计为________。

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生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，为从土壤中微生物筛选到能分解尿素的细菌。培养基成分如下表所示，实验步骤如图1所示。回答下列问题

（1）分解尿素的细菌能分泌________酶，能将尿素分解成__________。

（2）培养基中为“目的菌”生长提供氮源和碳源的物质分别来自________和_________。为了满足图示锥形瓶中目的菌对氧气的需求，在培养时应采用的操作方法是_______________________________。

（3）图中将细菌转到固体培养基上时，应采用________法接种以获得单个菌落。初步筛选出来的菌种还需要用生化的方法作进一步的鉴定，鉴定方法是检测初步筛选目的菌种培养基的pH，若pH_______（降低/不变/升高），说明该菌种能够分解尿素。

（4）A同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。有同学认为造成A同学实验结果的原因是培养基被杂菌污染。为了证实该说法，则进一步实验的操作思路是________________。

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对分解尿素细菌的初步筛选中，加入酚红指示剂的目的是

A．指示剂变蓝能认定该菌能分解尿素

B．对菌种进一步鉴定

C．筛选分解尿素的细菌

D．培养基中缺乏酚红作营养物质

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[生物--选修1：生物技术实践]

某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下。将各种物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL，再经高温灭菌，制成固体培养基备用。

（1）根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌?_____（能／不能），原因是__________________。

（2）培养基用___________方法灭菌，培养皿用__________方法灭菌，待培养基冷却到___________℃左右时，在_____附近倒平板，等平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，可以防止________，以免造成污染。

（3）要统计每克土壤样品中活菌数目，宜采用_________法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的___________就能大约推测出样品中活菌数。

（4）培养分解尿素的细菌时，需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_________。

（5）实验中使用过的培养基及其培养物必须经过___________处理后才能丢弃，以防止微生物的扩散。

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