利用转基因奶牛乳腺生物发生器生产人的生长激素，需要构建一种能高水平表达的表达载体，选择合适的基因启动子至关重要．由于无法由基因表达产物推知启动子的碱基序列，运用PCR技术单独克隆启动子存在困难．科研人员经过长期研究，终于发明了下图所示的一种克隆启动子的方法．请分析回答：
（1）培育转基因奶牛时，需要在生长激素编码序列前插入 的启动子．运用 将外源基因转入动物细胞．
（2）过程③需要使用的工具酶是 ，过程④中可以根据基因编码序列两端的部分碱基序列设计引物进行扩增．
（3）研究发现将真核生物的蛋白质基因导入了大肠杆菌菌株中，能转录形成正常mRNA，但其所控制合成的蛋白质却并不具有生物活性，最可能的原因是 大肠杆菌细胞内缺乏内质网与高尔基体（或大肠杆菌缺乏生物膜系统），不能对多肽链
进行折叠、组装与修饰 ．
（4）由基因表达产物无法推知启动子碱基序列，其原因是 ．
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[生物——选修3：现代生物科技专题]（10分）
利用转基因奶牛乳腺生物发生器生产人的生长激素，需要构建一种能高水平表达的表达载体，选择合适的基因启动子至关重要。由于无法由基因表达产物推知启动子的碱基序列，运用PCR技术单独克隆启动子存在困难。科研人员经过长期研究，终于发明了下图所示的一种克隆启动子的方法。请分析回答：
（1）培育转基因奶牛时，需要在生长激素编码序列前插入 的启动子。运用 将外源基因转入动物细胞。
（2）过程③需要使用的工具酶是 ，过程④中可以根据基因编码序列两端的部分碱基序列设计引物进行扩增．
（3）研究发现将真核生物的蛋
白质基因导入了大肠杆菌菌株中，能转录形成正常mRNA，但其所控制合成的蛋白质却并不具有生物活性，最可能的原因是 。
（4）由基因表达产物无法推知启动子碱基序列，其原因是 。
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利用转基因奶牛乳腺生物发生器生产人的生长激素，需要构建一种能高水平表达的表达载体，选择合适的基因启动子至关重要．由于无法由基因表达产物推知启动子的碱基序列，运用PCR技术单独克隆启动子存在困难．科研人员经过长期研究，终于发明了下图所示的一种克隆启动子的方法．请分析回答：
（1）培育转基因奶牛时，需要在生长激素编码序列前插入 的启动子．运用 将外源基因转入动物细胞．
（2）过程③需要使用的工具酶是 ，过程④中可以根据基因编码序列两端的部分碱基序列设计引物进行扩增．
（3）研究发现将真核生物的蛋白质基因导入了大肠杆菌菌株中，能转录形成正常mRNA，但其所控制合成的蛋白质却并不具有生物活性，最可能的原因是 大肠杆菌细胞内缺乏内质网与高尔基体（或大肠杆菌缺乏生物膜系统），不能对多肽链
进行折叠、组装与修饰 ．
（4）由基因表达产物无法推知启动子碱基序列，其原因是 ．
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利用基因工程可以获得转基因牛，从而改良奶牛的某些性状。若要获得的转基因牛分泌的乳汁中含有人干扰素，则所构建的基因表达载体必须包括：某种牛乳腺分泌蛋白基因的启动子、________________、______________、_______________和复制原点等。将该基因表达载体导入受体细胞所采用的方法是___________法，为获得能大量产生人干扰素的转基因牛，该基因表达载体应导入的受体细胞是____________。
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利用基因工程可以获得转基因牛，从而改良奶牛的某些性状。若要获得的转基因牛分泌的乳汁中含有人干扰素，则所构建的基因表达载体必须包括：某种牛乳腺分泌蛋白基因的启动子、________________、______________、_______________和复制原点等。将该基因表达载体导入受体细胞所采用的方法是___________法，为获得能大量产生人干扰素的转基因牛，该基因表达载体应导入的受体细胞是____________。
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下图是利用奶牛乳汁生产人类血清白蛋白的图解，根据下图回答：
(1)在基因工程中，在②进入③之前要用__________________等工具来构建基因表达载体，基因的表达载体成分除了启动子之外还有____________________________________，将构建好的表达载体导入③的常用方法是___________________。
(2)从③到④的过程中一般利用未受精的去核卵细胞为受体，而不用普通的体细胞，原因是__________________。
(3)④到⑤的过程中正确的操作方法_____，把⑤送入⑥的最佳时期是____________。
(4)⑦是⑥生出的后代，那么⑦的遗传性状和________________最相似，要实现⑦批量生产血清白蛋白，则要求③的性染色体是______。
(5)可以从哺乳动物的______________________中分离出来ES或EK细胞。这类细胞的形态特征有________________________________。
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【生物——现代生物科技专题】
下面是利用奶山羊乳腺生物反应器制备药用白蛋白的流程图，请回答下列问题：
（1）若要大量获得目的基因，可使用 扩增白蛋白基因，通过③构建的重组表达载体包括目的基因、启动子、终止子和 、复制原点等部分。该重组表达载体导入的受精卵性染色体组成应为 。
（2）如果需要通过①采集到更多的卵子，常用的激素是 ；通过②采集的精子需 后才能进行受精作用。
⑶在体外培养受精卵时，除了给予一定量的O2以维持细胞呼吸外，还需要提供 （气体）以维持 。
（4）为使⑤能成功进行，需要对奶山羊C进行 处理，使之与供体的生理状况保持相同。
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临床上对胰岛素需求量很大。如图是利用奶牛乳腺生物反应器制备胰岛素的流程图，据图回答下列问题：
（1）构建重组质粒时，为避免人胰岛素基因末端发生任意连接和载体的自身环化应选用________________________酶处理目的基因和载体。要使人胰岛素基因在奶牛乳腺中特异性表达，应将人胰岛素基因与______________________等调控元件重组在一起。
（2）①过程常用______________处理奶牛A使其排出更多的卵子，然后在恰当时期采集卵子并培养成熟。②过程采集的奶牛精子常用____________________法使其获能，与成熟的卵子在专用受精溶液中完成受精。受精过程中，在精子触及______________的瞬间会产生透明带反应，这是防止多精入卵受精的第一道屏障。
（3）对移植前的胚胎需进行性别鉴定，一般采用SRYPCR方法。SRY-PCR法基本程序是：从被测的囊胚中取出几个______________（填“滋养层”或“内细胞团”）细胞，提取DNA；经PCR反应体系扩增SRY基因（Y染色体上特有的性别决定基因）片段，然后对扩增产物进行检测。
要大量获得SRY基因，PCR扩增时需要加入两种引物：__________（选填“引物I”、“引物II”、“引物III”、“引物IV”），原因是DNA聚合酶只能从核苷酸链的_____________（选填“5’端”或“3’端”）开始延伸DNA链。除引物外，PCR反应体系中还包含缓冲液、模板DNA、___________________和_______________等成分。最后选择出现____________（填“阳性”或“阴性”）反应的胚胎进行移植。
（4）为了使胚胎移植能成功，需要对代孕奶牛C进行_________________________处理，使之与供体的生理状况保持相同。）为了提高胚胎利用率，胚胎移植前可对胚胎进行_________________________处理。
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下列哪一项不是动物基因工程的应用前景
A．转入外源生长激素基因的鲤鱼
B．将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组
C．乳腺生物反应器表达医药产品
D．利用工程菌生产干扰素
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下列哪一项不是动物基因工程的应用前景（ ）
A．转入外源生长激素基因的鲤鱼 B．将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组
C．乳腺生物反应器表达医药产品 D．利用工程菌生产干扰素
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科学家采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊，以通过乳腺生物反应器生产人
—抗胰蛋白酶，其技术路线如图：
回答下列问题：
（1）基因表达载体应当包括______，构建基因表达载体常用的酶是______，常用载体有________。
（2）核移植的受体应选用______期卵母细胞，之后通过______（写出一种具体方法）激活受体细胞使其完成细胞分裂和发育进程。
（3）进行胚胎移植时，胚胎应发育到______阶段，移植的方法有______。为一次性获得多个体，可使用胚胎分割技术，在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意________。
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