转cry1Ab/cry2Aj和G10evo一epsps基因抗虫耐除草剂玉米双抗12-5是浙...

转cry1Ab/cry2Aj和G10evo一epsps基因抗虫耐除草剂玉米双抗12-5是浙江大学自主研发的新一代复合性状转基因玉米新品种，该玉米正式获得安全证书。请回答下列问题：

（1）在将目的基因导入植物细胞时常采用农杆菌转化法，在该过程中需要添加酚类物质，作用是________________。农杆菌的Ti质粒上的T-DNA具有______________________________的特点。筛选成功导入目的基因的玉米细胞后，再通过___________技术获得转基因玉米幼苗。

（2）为获取更多的目的基因，常用PCR技术，该技术的前提是要有____________________，以便合成引物。为了便于扩增的DNA片段与表达载体连接，需在引物的5’端加上限制酶的酶切位点，且常在两条引物上设计加入不同的限制酶的酶切位点，主要目的是__________________。

（3）不同生物的基因可以“拼接”成功，外源基因可以在不同物种的受体细胞内成功表达，说明了__________。在抗虫耐除草剂玉米植株的培育过程中，____________（填“能”或“不能”）用动物病毒作为抗虫耐除草剂基因导入玉米细胞的载体，原因是_______________________________________。

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低毒性的广谱除草剂，能非特异性侵入并杀死所有的植物。为避免被草甘膦杀死，科学家将细菌的EPSPS基因（控制EPSPS合成酶合成的基因）转入小麦，提高其对草甘膦的耐受性。以下说法正确的是（　　 ）

A．EPSPS基因转录时以DNA的两条链同时作为模板，提高转录效率

B．EPSPS合成酶的合成的场所是核糖体，所需的原料为脱氧核苷酸

C．可用抗原抗体杂交的方法检测细胞中是否有EPSPS基因的表达产物

D．利用Ti质粒将EPSPS基因整合到小麦染色体上时需要DNA聚合酶

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草甘膦是一种可以杀灭多种植物（包括农作物）的除草剂。草甘膦杀死植物的原理在于能够破坏植物叶绿体或质体中的EPSPS合成酶。通过转基因的方法，让农作物产生更多的EPSPS酶，就能抵抗草甘膦，从而让农作物不被草甘膦杀死。下列有关抗草甘膦转基因大豆的培育分析正确的是

A．可通过喷洒草甘膦来检验转基因大豆是否培育成功

B．只能以大豆受精卵细胞作为基因工程的受体细胞

C．在转基因操作过程中一定要用同一种限制性核酸内切酶

D．只要EPSPS合成酶基因进入大豆细胞，大豆就会表现出抗草甘膦性状

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草甘膦的除草机制是抑制植物体内EPSPS酶的合成，最终导致植物死亡。但它的使用有时也会影响到农作物的正常生长。目前，已发现可以从一种抗草甘膦的大肠杆菌突变株中分离出EPSPS基因，若将该基因转入农作物植物细胞内，从而获得的转基因植物就能耐受高浓度的草甘膦。

（1）将图1①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反应管中有　　　　　 种DNA片段。

（2）假设图1中质粒原来BamHⅠ识别位点的碱基序列变为了另一种限制酶BclⅠ的碱基序列，现用BclⅠ和HindⅢ切割质粒，则该图1中①的DNA右侧还能选择BamHⅠ进行切割，并获得所需重组质粒吗？______ 请说明理由　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

（3）若上述假设成立，并成功形成重组质粒，则重组质粒(　　　　 )

A．既能被BamHⅠ也能被HindⅢ切开　　　　

B．能被BamHⅠ但不能被HindⅢ切开

C．既不能被BamHⅠ也不能被HindⅢ切开　

D．能被HindⅢ但不能被BamHⅠ切开

(4）要想检测导入的EPSPS基因是否表达，在分子水平上可用　　　　　　 方法进行检测。

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除草剂草甘膦会把普通大豆植株与杂草一起杀死．科学家从抗草甘膦的矮牵牛中分离克隆出EPSP合成酶基因，培育出了抗草甘膦的转基因大豆，从而大大降低了田间管理成本．抗草甘膦转基因大豆培育过程如图所示．请分析回答有关问题：

（1）科学家在进行上述基因操作时，通常要用同一种　　　　 分别切割质粒和含目的基因的DNA，质粒的黏性末端与目的基因两侧的黏性末端就可通过　　　　 而黏合．这一过程体现了质粒作为运载体必须具备的条件是　　　　 ．

（2）为了确定转基因大豆是否培育成功，既要用放射性同位素标记的　　　　 作探针进行分子杂交检测，又要用　　　　 方法从个体水平鉴定大豆植株的抗除草剂特性．

（3）有人提出，种植上述转基因大豆，它所携带的目的基因可以通过花粉传递给近缘物种造成“基因污染”．另一方观点认为，由于存在　　　　 ，它们很难与其他植物杂交．

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除草剂草甘膦会把普通大豆植株与杂草一起杀死。科学家从抗草甘膦的矮牵牛中分离克隆出EPSP合成酶基因，培育出了抗草甘膦的转基因大豆，从而大大降低了田间管理成本。抗草甘膦转基因大豆培育过程如图所示。请分析回答有关问题。

(1)科学家在进行上述操作时，通常要用同一种________分别切割质粒和含目的基因的DNA以获得相同的黏性末端，质粒的黏性末端与目的基因两侧的黏性末端就可通过_______________而黏合。这一过程体现了质粒作为运载体必须具备的条件是_____________________________________。

(2)转基因时往往需对EPSP合成酶基因进行扩增，所利用的技术是_______，利用的原理是___________。基因工程的基本步骤包括目的基因的获取、基因表达载体的构建、________________、目的基因的检测与鉴定。构建基因表达载体时，一般在基因表达载体中插入特异性表达的启动子，另外还应含有目的基因、______________、________________等。最后步骤是目的基因的检测与鉴定，在此步骤可进行分子水平的检测，可检测的物质有__________、__________、____________。

(3)与诱变育种、杂交育种相比，通过基因工程培育新品种的主要优点是_______________________。图中利用组织培养培育出转基因大豆完整个体所依据的生物学原理是_______________________。

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现有的除草剂一般通过抑制叶绿体中与光合作用有关的酶的合成来杀灭杂草。为了提高烟草植物对除草剂的抗性，科学家将EPSPS基因转入烟草的叶绿体中，使烟草植株对除草剂的抗性达5mmol/L，比野生型烟草高10倍。据此回答下列问题：　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　

（1）PCR技术是体外扩增目的基因的常用技术，其扩增目的基因的原理是__________，PCR过程所需的原料是_______________，若将目的基因扩增32倍，则需要经过_______个循环。

（2）PCR过程与细胞内的DNA复制过程相比主要有两点不同，分别是______________________________。

（3）欲获得能稳定遗传的抗除草剂转基因烟草，则至少需要导入________个EPSPS基因，并且要将EPSPS基因导入到________________（填“一条染色体上”、“一对同源染色体上”或“非同源染色体上”）。

（4）叶绿体基因工程能避免传统基因工程所带来的基因污染，其原因是___________________________。

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研究者将苏云金芽孢杆菌(Bt)的Cry1Ab基因导入水稻细胞培育成抗螟虫的克螟稻，克螟稻与普通水稻杂交，子代抗螟虫与不抗螟虫的比例为1:1。下列有关叙述正确的是(　　)

A. Cry1Ab基因已整合到克螟稻细胞的染色体上

B. 获取Cry1Ab基因需使用限制酶和DNA连接酶

C. 克螟稻的培育说明不经过地理隔离也能产生新物种

D. 克螟稻降低了农药的使用量，害虫不会出现抗药性

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研究发现某转基因抗除草剂玉米在喷洒除草剂的环境中生长良好，给农民节省了很大的 人力和物力。有人认为，这种转基因玉米不会对当地的生物多样性构成威胁，其理由是（　　 ）

①玉米花粉的传播距离有限　　　　 ②玉米花粉的存活时间有限　　 ③转基因玉米转入的基因是抗除草剂基因　　　　 ④玉米与其他植物之间存在生殖隔离　　 ⑤抗除草剂基因不可能转移到其他植物体内

A.②③④ B.①②④ C.①②⑤ D.②③⑤

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以纯合的非糯性除草剂敏感玉米（甲，基因型AAbb）为材料，经过诱变处理获得非糯性除草剂抗性玉米（乙，基因型AABb）。控制非糯性（A）与糯性（a），除草剂抗性（B）与除草剂敏感（b）的基因分别位于两对同源染色体上，下列叙述不正确的是

A.乙连续自交若干代，纯合抗性植株的比例逐代提高

B.经过诱变处理诱发的基因突变，不能决定玉米的进化方向

C.甲的花粉经诱变处理并培养等，有可能获得可育的糯性除草剂敏感的个体

D.若甲和乙杂交，后代性状分离比接近1:1:1:1

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