科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如下图，请回答相关问题：
（1）过程①获得重组胚胎之前需要通过_____________技术获得重组细胞。接受细胞核的去核卵母细胞应该处于______________时期，需用物理或化学的方法激活受体细胞的目的是_______________。
（2）步骤②中，重组胚胎培养到囊胚期时，可从其______________分离出ES细胞。步骤③中，需要构建含有干扰素基因的______________。构建之前可以利用_____________技术对目的基因进行扩增，该技术的原理是_______________。
（3）将基因导入ES细胞常用的方法是______________。体外诱导ES细胞向不同方向分化是利用了ES细胞的______________。
（4）为检测干扰素基因的表达情况，可采用______________方法，若有杂交带出现，表明目的基因已成功表达。
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科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如下图，下列说法正确的是
A. ①过程中，需将体内取出的卵母细胞在体外培养至某时期，该期卵母细胞核的位置靠近第二极体
B. 重组胚胎经②过程培养到囊胚期，可从其内细胞团分离出ES细胞
C. 过程③说明此技术是利用基因工程产品治疗小鼠疾病
D. 体外诱导ES细胞要在培养液中加入促生长因子以诱导其向不同类型的组织细胞分化
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科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如下图，下列说法正确的是
A. ①过程中，需将体内取出的卵母细胞在体外培养至某时期，该期卵母细胞核的位置靠近第二极体
B. 重组胚胎经②过程培养到囊胚期，可从其内细胞团分离出ES细胞
C. 过程③说明此技术是利用基因工程产品治疗小鼠疾病
D. 体外诱导ES细胞要在培养液中加入促生长因子以诱导其向不同类型的组织细胞分化
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科研人员利用胚胎干细胞对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗， 其技术流程如图。 请回答：
⑴ 过程①获得重组胚胎之前需要通过______技术获得重组细胞， 接受细胞核的卵母细胞应处于时期， 并用微型吸管吸出______。
⑵ 步骤②中， 重组胚胎培养到囊胚期时， 可从其______分离出 ES 细胞， ES 细胞在形态上表现为细胞核______ 、明显， 在功能上具有______。
⑶ 步骤③中， 需要构建含干扰素基因的______， 构建之前可以利用______技术对目的基因进行扩增。
⑷ 步骤③中将基因导入 ES 细胞的方法通常是______法， 为了检测 ES 细胞的 DNA 上是否插入了干扰素基因， 可采用______技术。 在正常的小鼠体内， 干扰素是在______(填一种细胞器)上合成的。
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科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图，请回答下列问题：
（1）图中卵母细胞应在体外培养到______期，步骤①应先对卵母细胞进行______处理。
（2）由图可知，步骤②要分离出ES细胞，需将重组胚胎培养到______期。
（3）步骤③选择ES细胞作为受体细胞而不是上皮细胞，是因为ES细胞______，该过程需要先利用______技术扩增干扰素基因，其前提是要有一段已知干扰素基因的核苷酸序列以便合成______。
（4）步骤④应在培养液中加入______。为检测干扰素基因是否在小鼠体内成功表达，可以采用______技术。
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Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如下图：
(1)步骤①中所选的卵母细胞应处于________________________期。
(2)步骤②中，重组胚胎培养到囊胚期时，可从其________________分离出ES细胞，ES细胞在形态上表现为_____________________________的特点。
(3)步骤③中，需要构建含有Rag2基因的__________________。可以根据Rag2基因的核苷酸序列设计合成_____________，利用_______________技术扩增Rag2基因片段。用HindⅢ和PstⅠ限制酶分别在目的基因所在DNA片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段。为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有_________________酶的酶切位点。
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Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如下图：
（1）步骤①中所选的卵母细胞应处于__________________期。
（2）步骤②中，分离出ES细胞比体细胞全能性________。
（3）步骤③中，首先要获取目的基因，以下几种方法中需要模板的是___________
A．从基因组文库中获取目的基因
B．利用PCR 技术扩增目的基因
C．构建cDNA 文库
D．通过DNA 合成仪利用化学方法人工合成目的基因
（4）步骤③中，需要构建含有Rag2基因的______________。
（5）为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的蛋白质，用抗Rag2蛋白的抗体进行________。
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Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图：
请回答：
（1）该技术流程所涉及的生物工程技术有_________________。
①动物细胞培养 ②细胞核移植 ③胚胎干细胞的分离与培养 ④转基因 ⑤动物细胞融合
（2）在步骤①前，应采用______________普遍使用的方法）对卵母细胞进行处理。
（3）ES细胞在功能上的特性是______。在体外培养时，在培养液中添加____，就可以诱导ES细胞向造血干细胞分化。
（4）左图表示含有Rag2基因的DNA片段，右图表示pZHZ11质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、EcoRⅠ、SmaⅠ4种限制酶识别的碱基序列和切割位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、G↓AATTC、CCC↓GGG。
Rag2基因的获得可以从鼠的胎盘细胞中提取 ________，通过逆转录方法合成含Rag2基因的DNA片段。若将Rag2基因和如图的质粒连接形成重组质粒，那么应选用 _______限制酶切割，而后加入DNA连接酶进行连接。
（5）步骤③中，需要构建含有Rag2基因的表达载体。可以根据_____________设计引物，利用PCR技术扩增Rag2基因片段。
（6）为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞中的___________，用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验。
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Rag2 基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES 细胞）对 Rag2 基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图：
（1）步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的_____。小鼠体细胞体外培养时， 所需气体主要是 O2 和 CO2，其中 CO2 的作用是维持培养液（基）的_____。
（2）步骤②中，重组胚胎培养到_________期时，可从其内细胞团分离出 ES 细胞。体外培养条件下，ES 细胞在_____细胞上，能够维持只增殖不分化的状态。
（3）步骤③中，需要构建含有 Rag2 基因的表达载体。可以根据 Rag2 基因的__________设计引物，利用 PCR 技术扩增 Rag2 基因片段。PCR 过程需要经过多次循环，每一个循环包括：加热变性→冷却复性→_____，其中冷却复性的目的_________。用 HindⅢ和 PstⅠ限制酶分别在片段两侧进行酶切获得 Rag2 基因片段。为将该片段 直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有_____酶的酶切位点。
（4）为检测 Rag2 基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的_____，用_______________的抗体进行杂交实验。
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Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图：
(1)步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的________。
(2)步骤②中，重组胚胎培养到________期时，可从其内细胞团分离出ES细胞。
(3)步骤③中，需要构建含有Rag2基因的表达载体。可以根据Rag2基因的________设计引物，利用PCR技术扩增Rag2基因片段。用Hind Ⅲ和Pst Ⅰ限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段。为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有________________酶的酶切位点。
(4)为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的________，用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验。
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基因治疗是指将外源正常基因导入靶细胞，以纠正或补偿因基因缺陷和异常引起的疾病，以达到治疗的目的。干扰素基因缺失的小鼠不能产生成熟淋巴细胞，科研人员利用胚胎干细胞 细胞)对干扰素基因缺失的小鼠进行了基因治疗。请回答：
(1)为使干扰素基因在小鼠细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入基因表达载体的_____________和_____________之间。
(2)将干扰素基因导入ES细胞的方法是_____________，采用_____________可以鉴定目的基因是否插入到受体细胞染色体DNA分子上，再将能正常表达干扰素的细胞转入到小鼠体内，这种治疗方法称为____________。
(3)干扰素基因缺失的小鼠易患某种细菌导致的肺炎，引起这种现象的原因是小鼠缺少成熟的淋巴细胞，降低了小鼠免疫系统的_____________功能。
(4)用于基因治疗的基因有三类，一类是把正常基因导入有基因缺陷的细胞中，以表达出正常性状来治疗，第二类是反义基因，即通过产生的mRNA分子与病变基因产生的_____________进行互补结合，来阻断非正常蛋白质的合成；第三类是编码可以杀死癌细胞的蛋白酶基因。
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