下图为利用人成纤维细胞(具分裂能力、能在 HAT 培养基上存活)和小鼠骨髓瘤细胞(具分裂能力、不能在 HAT 培养基上存活)进行人类基因定位的操作示意图,请回答相关问题:
(1)图示方法是动物细胞融合技术的应用,该技术的基础是________技术。
(2)操作所用的成纤维细胞应传代____代以内,诱导融合时需要加入的化学促融剂是____。
(3)人、鼠细胞先经过细胞融合形成多核细胞,再经过一次____分裂,形成单核细胞。
(4)HAT培养基起________培养作用,培养时温度应为________℃ ,操作中加入乌本苷的目的是____________。
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下图为利用人成纤维细胞(具分裂能力、能在HAT培养基上存活)和小鼠骨髓瘤细胞(具分裂能力、不能在HAT培养基上存活)进行人类基因定位的操作示意图,请回答相关问题。
(1)操作所用的成纤维细胞应传代_______________代以内,诱导融合时需要加入的促融剂是_________。
(2)人、鼠细胞先经过细胞膜融合形成____________细胞,再经过一次____________,形成单核细胞。HAT培养基起____________培养作用,操作中加入乌本苷的目的是____________。
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下图为利用人成纤维细胞(具分裂能力、能在 HAT 培养基上存活)和小鼠骨髓瘤细胞(具分裂能力、不能在 HAT 培养基上存活)进行人类基因定位的操作示意图,请回答相关问题:
(1)图示方法是____技术的应用,该技术的基础是____技术。
(2)操作所用的成纤维细胞应传代____代以内,诱导融合时需要加入的化学促融剂是____。
(3)人、鼠细胞先经过细胞融合形成________,再经过一次____,形成单核细胞。
(4)HAT培养基起____培养作用,培养时温度应为____℃ ,操作中加入鸟本苷的目的是_____。
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下图为利用人成纤维细胞(具分裂能力、能在HAT培养基上存活)和小鼠骨髓瘤细胞(具分裂能力、不能在HAT培养基上存活)进行人类基因定位的操作示意图,请回答相关问题。
(1)图示方法是____________________技术的应用,该技术的基础是_____________________技术。
(2)操作所用的成纤维细胞应传代_____代以内,诱导融合时需要加入的促融剂是________________。
(3)人、鼠细胞先经过细胞膜融合形成多核细胞,再经过一次____________,形成单核细胞。
(4)HAT培养基起__________培养作用,操作中加入鸟本苷的目的是________________________。细胞培养所需的气体条件是95%空气和5%CO2,其中CO2的主要目的是______________;除以上两类条件外,动物细胞体外培养还需要___________和_______两项条件。
(5)表所示为杂交细胞A、B、C中存在的人类染色体及人类特有的4 种酶(“+”表示存在,“-”表示不存在),这4种酶均为单基因编码产生,据表判断,编码________酶的基因位于染色体2上,排列方式呈____________。
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下图为利用人成纤维细胞(具分裂能力、能在HAT培养基上存活)和小鼠骨髓瘤细胞(具分裂能力、不能在HAT培养基上存活)进行人类基因定位的操作示意图,请回答相关问题:
(1)图示方法是____________技术的应用,该技术的基础是__________技术。
(2)操作所用的成纤维细胞应传代_____代以内,诱导融合时需要加入的化学促融剂是______。
(3)人、鼠细胞先经过细胞膜融合形成______细胞,再经过一次________,形成单核细胞。
(4)HAT培养基起_______培养作用,培养时温度应为_____°C,操作中加入乌本苷的目的是_________。
(5)下表所示为杂交细胞A、B、C中存在的人类染色体及人类特有的4种酶(“十”表示存在,“一”表示不存在),这4种酶均为单基因编码产生,据表判断,编码_______酶的基因位于染色体2上。
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如图为利用人成纤维细胞(具分裂能力、能在HAT培养基上存活)和小鼠骨髓瘤细胞(具分裂能力、不能在HAT培养基上存活)进行人类基因定位的操作示意图,请回答相关问题。
(1)图示方法应用的技术有 和 。
(2)操作所用的成纤维细胞应传代 代以内,诱导融合时需要加入的促融剂是 。
(3)HAT培养基起 作用,培养时温度应为36.5±0.5℃,操作中加入乌本苷的目的是 。
(4)如表所示为杂交细胞A、B、C中存在的人类染色体及人类特有的4种酶(“+”表示存在,“一”表示不存在),这4种酶均为单基因编码产生,据表判断,编码 酶和 酶的基因位于染色体2上,呈线性排列。
杂交细胞 | ||||
A | B | C | ||
人类染色体 | 1 | - | + | + |
2 | + | - | + | |
3 | + | + | - | |
酶 | m | + | - | + |
n | - | + | + | |
p | + | - | + | |
q | - | + | + | |
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如图为利用人成纤维细胞(具分裂能力、能在HAT培养基上存活)和小鼠骨髓瘤细胞(具分裂能力、不能在HAT培养基上存活)进行人类基因定位的操作示意图,请回答相关问题。
杂交细胞 | ||||
A | B | C | ||
人类 染色体 | 1 | - | + | + |
2 | + | - | + | |
3 | + | + | - | |
酶 | m | + | - | + |
n | - | + | + | |
p | + | - | + | |
q | - | + | + | |
(1)图示方法是__________技术的应用,该技术的基础是____________技术。
(2)操作所用的成纤维细胞应传代________代以内,诱导融合时需要加入的促融剂是_____。
(3)人、鼠细胞先经过细胞膜融合形成________细胞,再经过一次_________,形成单核细胞。
(4)HAT培养基起________培养作用,培养时温度应为________℃,操作中加入乌本苷的目的是____________________________。
(5)如表所示为杂交细胞A、B、C中存在的人类染色体及人类特有的4种酶(“+”表示存在,“-”表示不存在),这4种酶均为单基因编码产生,据表判断,编码________酶的基因位于染色体2上,排列方式呈________。
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人的HPRT基因缺陷(HPRT-)和小鼠的TK基因缺陷(TK-)细胞在HAT培养基中都不能存活。杂种细胞在分裂中随机丢失人的染色体,但保留所有的鼠染色体。因此,利用人—鼠细胞融合技术可以将人类基因定位于特定的染色体上。
(1)将人的HPRT-细胞与小鼠的TK-细胞用________促进融合,融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的_______细胞,称为杂交细胞。然后培养在________培养基(HAT)中,最终筛选出人—鼠杂种细胞。细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限,使____________成为可能。
(2)将存活下来的杂种细胞进行单克隆培养,获得不同的细胞株,用碱性染料染色后镜检,观察结果如下:
细胞株编号 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
所含人染色体编号 | 11,14, 17,22 | 7,11, 14,17 | 5, 7, 17,21 | 2, 9, 11,17 | 5,17, 18,20 | 2, 5, 17,19 |
由此可推测________基因在________染色体上。
(3)如果要确定人鸟苷酸(UMP)激酶基因所在染色体,应选择UMP激酶缺陷的________(填“人”或“鼠”)细胞与相应细胞杂交,这样的方法________(填“能”或“不能”)对小鼠的基因进行定位。
(4)经过基因测序发现UMP激酶缺陷是因为编码它的基因中部的部分碱基替换造成的,结果可能导致(_____)
A.转录不能进行
B.合成的蛋白质分子缺少部分氨基酸序列
C.合成的蛋白质分子增加部分氨基酸序列
D.合成的蛋白质分子氨基酸数目不变
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单克隆抗体制备过程中使用的骨髓瘤细胞是一种缺陷型细胞,在含有次黄嘌呤、氨基嘌呤和胸腺嘧啶的培养基(HAT)中无法生长;而小鼠脾细胞是正常细胞,在HAT培养基上可正常存活。用聚乙二醇诱导细胞融合后,经过数代培养,最终可在HAT培养基上存活并能产生单克隆抗体的细胞是( )。
A.骨髓瘤细胞之间形成的融合细胞
B.脾细胞之间形成的融合细胞
C.骨髓瘤细胞与脾细胞之间形成的融合细胞
D.脾细胞
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单克隆抗体制备过程中使用的骨髓瘤细胞是一种缺陷型细胞,在含有次黄嘌呤、氨基喋呤和胸腺嘧啶的培养基(HAT)中无法生长;而小鼠脾细胞是正常细胞,在HAT培养基上可正常存活。用聚乙二醇诱导细胞融合后,经过数代培养,最终可在HAT培养基上存活并能产生单克隆抗体的细胞是( )
A.骨髓瘤细胞之间形成的融合细胞 B.脾细胞之间形成的融合细胞
C.骨髓瘤细胞与脾细胞之间形成的融合细胞 D.脾细胞
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单克隆抗体制备过程中使用的骨髓瘤细胞是一种缺陷型细胞,在含有次黄嘌呤、氨基喋呤和胸腺嘧啶的培养基(HAT)中无法生长;而小鼠脾细胞是正常细胞,在HAT培养基上可正常存活。用聚乙二醇诱导细胞融合后,经过数代培养,最终可在HAT培养基上存活并能产生单克隆抗体的细胞是
A.骨髓瘤细胞之间形成的融合细胞 B.脾细胞之间形成的融合细胞
C.骨髓瘤细胞与脾细胞之间形成的融合细胞 D.脾细胞
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