下图是利用基因工程技术培育转基因抗虫(Bt毒蛋白基因)大豆的示意图。请回答下列有关问题:
(1)培育转基因抗虫大豆的核心步骤是____________,其目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代,同时,使目的基因_______________________。这一步骤需要的工具酶中对核苷酸序列有严格要求的是________________________。
(2)将重组Ti质粒转入农杆菌之前,常用Ca2+处理农杆菌,目的是____________。用含重组Ti质粒的农杆菌侵染大豆细胞,质粒上的____________可将抗虫基因转移至大豆细胞的染色体DNA上。
(3)在分子水平上,采用抗原-抗体杂交技术检测目的基因是否在受体细胞中表达,若出现_________,则表明抗虫基因己在大豆细胞中翻译出Bt毒蛋白。抗虫基因之所以能够在大豆细胞中成功表达是因为绝大多数生物_______________________。若转基因抗虫大豆植株表现出抗虫性状,则____________(填“能够”或“不能”)表明植株发生了可遗传变异。
(4)转入抗虫基因的大豆细胞经过____________形成愈伤组织,然后发育成胚状体和试管苗。转基因抗虫大豆可以通过制作人工种子的方法大量繁殖,人工种子可以用图中的____________等材料用人工薄膜包装后得到。
高二生物非选择题中等难度题
下图是利用基因工程技术培育转基因抗虫(Bt毒蛋白基因)大豆的示意图。请回答下列有关问题:
(1)培育转基因抗虫大豆的核心步骤是____________,其目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代,同时,使目的基因_______________________。这一步骤需要的工具酶中对核苷酸序列有严格要求的是________________________。
(2)将重组Ti质粒转入农杆菌之前,常用Ca2+处理农杆菌,目的是____________。用含重组Ti质粒的农杆菌侵染大豆细胞,质粒上的____________可将抗虫基因转移至大豆细胞的染色体DNA上。
(3)在分子水平上,采用抗原-抗体杂交技术检测目的基因是否在受体细胞中表达,若出现_________,则表明抗虫基因己在大豆细胞中翻译出Bt毒蛋白。抗虫基因之所以能够在大豆细胞中成功表达是因为绝大多数生物_______________________。若转基因抗虫大豆植株表现出抗虫性状,则____________(填“能够”或“不能”)表明植株发生了可遗传变异。
(4)转入抗虫基因的大豆细胞经过____________形成愈伤组织,然后发育成胚状体和试管苗。转基因抗虫大豆可以通过制作人工种子的方法大量繁殖,人工种子可以用图中的____________等材料用人工薄膜包装后得到。
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利用基因编辑技术将病毒外壳蛋白基因导入猪细胞中,然后通过核移植技术培育基因编辑猪,可用于生产基因工程疫苗。下图为基因编辑猪培育流程,请回答下列问题:
(1)对1号猪使用激素处理,使其超数排卵,收集并选取处在__________时期的卵母细胞用于核移植。
(2)采集2号猪的组织块,用__________处理获得分散的成纤维细胞,放置于37℃的CO2培养箱中培养,其中CO2的作用是____________________________。
(3)将重组胚胎移植到3号猪的子宫中,产出的基因编辑猪的性染色体来自于_________号猪。
(4)为检测病毒外壳蛋白基因是否被导入4号猪并正常表达,可采用的方法有__________(填序号)。
①DNA测序 ②染色体倍性分析 ③体细胞结构分析 ④抗原—抗体杂交
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利用基因编辑技术将病毒外壳蛋白基因导入猪细胞中,然后通过核移植技术培育基因编辑猪,可用于生产基因工程疫苗。下图为基因编辑猪培育流程,请回答下列问题:
(1)对1号猪使用_________处理,使其超数排卵,收集并选取处在__________时期的卵母细胞用于核移植。
(2)采集2号猪的组织块,用__________处理获得分散的成纤维细胞,放置于37℃的CO2培养箱中培养,其中CO2的作用是________。
(3)为获得更多基因编辑猪,可在胚胎移植前对胚胎进行__________。产出的基因编辑猪的性染色体来自于_________号猪。
(4)为检测病毒外壳蛋白基因是否被导入4号猪并正常表达,可采用的方法有__________(填序号)。
①DNA测序 ②染色体倍性分析 ③体细胞结构分析 ④抗原—抗体杂交
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我们日常吃的大米中铁含量极低,科研人员通过基因工程等技术,培育出了铁含量比普通大米高60%的转基因水稻,改良了稻米的营养品质。下图为培育转基因水稻流程示意图,请回答下列问题:
(l)铁结合蛋白基因来自菜豆,且基因的脱氧核苷酸序列已知,可以用________法获得此目的基因。
(2)构建重组Ti质粒时,通常要用________分别切割________和________。
(3)将含有重组Ti质粒的农杆菌与水稻愈伤组织共同培养时,通过培养基2的筛选培养,可以获得________ 。
(4)为研究外源基因的遗传方式,将T。代植株上收获的种子种植成T1,代株系,检测各单株的潮霉素抗性。在检测的多数T1代株系内,抗潮霉素植株与潮霉素敏感植株的比例为3:1,此结果说明外源基因的遗传符合________定律。有少数T1代株系的所有植株都表现为对潮霉素敏感,但其体内能检测到铁结合蛋白基因,造成这一结果最可能的原因是________。
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下列三图分别表示基因的结构示意图和利用基因工程培育抗虫棉过程示意图。请据图回答下列有关问题:
(1)图C中的目的基因为__________(A.几丁质酶基因、B.Bt毒蛋白基因、C.病毒外壳蛋白基因、)
(2)在获得抗虫棉过程中,_______________是基因工程的核心。构建获得的II包括复制原点、_______、_______、目的基因、标记基因等。最后,检测基因工程是否成功:首先检测棉植株染色体的DNA上是否插入_______,其次,检测目的基因是否转录出_______,最后检测目的基因是否翻译_____ _。还可进行个体生物学水平检测,方法是。
(3)[III]是导入目的基因的受体细胞,经培养、筛选获得一株有抗虫特性的转基因植株。经分析,该植株含有一个携带目的基因的DNA片段,因此可以把它看作是杂合子。理论上,在该转基因植株自交产生F1代中,仍具有抗虫特性的植株占总数的_______。
(4)此过程引起的生物变异属于_____________。
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下列三图分别表示基因的结构示意图和利用基因工程培育抗虫棉过程示意图。请据图回答下列有关问题:
① 图C中的目的基因为__________(A.几丁质酶基因、B.Bt毒蛋白基因、C.病毒外壳蛋白基因、)
② 在获得抗虫棉过程中,_______________是基因工程的核心。构建获得的II包括复制原点、_______、_______、目的基因、标记基因等。最后,检测基因工程是否成功:首先检测棉植株染色体的DNA上是否插入_______,其次,检测目的基因是否转录出_______,最后检测目的基因是否翻译______。还可进行个体生物学水平检测。
③[III]是导入目的基因的受体细胞,经培养、筛选获得一株有抗虫特性的转基因植株。经分析,该植株含有一个携带目的基因的DNA片段,因此可以把它看作是杂合子。理论上,在该转基因植株自交产生F1代中,仍具有抗虫特性的植株占总数的_______。
④此过程引起的生物变异属于_____________
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以现有大豆品种作为受体材料,利用基因工程技术,获得转基因植株,分析其对疫霉根腐病的抗病性,筛选出抗病大豆新株(品)系。请据此回答问题:
(1)基因工程的核心技术是_________,该过程用到的酶有________。
(2)在用土壤农杆菌介导时往往要用_________处理土壤农杆菌,使之成为_________细胞,然后将它们在缓冲液中混合培养以完成转化过程。
(3)抗性植株的分子生物学检测是基因工程成功与否的重要一环,其中检测目的基因是否表达的方法是__________,其个体生物学水平的检测方法为_______________。
(4)转基因大豆细胞培养成转基因大豆植株,需要通过的过程是____________,依据的原理是________。
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以下是有关现代生物技术的两个问题,请回答:
Ⅰ(5分):下列三图分别表示基因的结构示意图和利用基因工程培育抗虫棉过程示意图。请据图回答下列有关问题:
(1)图C中的目的基因是从图A和图B中的哪一个图所表示的基因提取的?___________,图C中科学家在进行[①]操作时,要用_______分别切割运载体和目的基因,运载体的 黏性末端与目的基因DNA片段的黏性末端通过_______________而结合。
(2)[III]是导入目的基因的受体细胞,经培养、筛选获得一株有抗虫特性的转基因植株。经分析,该植株含有一个携带目的基因的DNA片段,因此可以把它看作是杂合子。理论上,在该转基因植株自交产生F1代中,仍具有抗虫特性的植株占总数的_______。
(3)将上述抗虫棉植株的后代种子种植下去后,往往有很多植株不再具有抗虫特性,原因是_____________________________。
Ⅱ(10分):现有甲、乙两种可能有一定毒性的化学物质,实验室研究人员计划通过动物细胞培养的方法来鉴定它们是否有毒性并比较二者毒性的强弱。请你以一个研究人员的身份参与此项研究,完成下列有关问题。
实验原理:_______________________________________________。(2分)根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数(以下称Q值),可判断该化学物质的毒性。
材料用具:活的小白鼠胚胎、胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、适宜浓度的化学物质甲溶液、适宜浓度的化学物质乙溶液、蒸馏水、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜、小白鼠正常有丝分裂各时期的高倍显微照片。
实验步骤:
(1)制备细胞悬浮液。
把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎,转入锥形瓶中,加入胰蛋白酶液处理,使胚胎组织离散成单个细胞,再加入动物细胞培养液,制成细胞悬浮液。
(2)进行细胞培养。
①取A、B、C3个洁净的培养瓶,分别放入___________________________________;
②向A、B两个培养瓶中分别加入等量的甲、乙溶液,C瓶中加入等量的蒸馏水,摇匀;
③把3个培养瓶放在适宜温度的恒温箱中培养。
(3)制作临时装片。
①当细胞增殖到大约8代左右时,同时从恒温箱中取出3个培养瓶,用________
处理,加入动物细胞固定液,迅速杀死细胞并固定细胞分裂相;
②静置一段时间后,分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液,滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央,滴加__________________进行染色,3—5min后,盖上盖玻片。
(4)镜检和统计。
把临时装片放在显微镜下,先用低倍镜后用高倍镜观察,为清晰观察染色体的形态,最好寻找处于______________期的细胞,并与小白鼠正常细胞有丝分裂同时期高倍显微照片进行对比,统计并计算该期变异的细胞占该期细胞总数的百分数(Q值)。
结果分析与结论:
(1)经研究人员实验得知,A、B、C三个培养瓶的Q值依次为:QA=1.3%, QB=12.5%, QC=0.1%,
由此可知该实验的结论是__________________________________________。(2分)⑵在实验中,C培养瓶起______________作用,C瓶的Q值说明____________________。
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科研人员利用基因工程技术获得了耐储存的转基因番茄,其原理如下图所示:
请回答下列问题。
(1)培育该转基因番茄过程中,目的基因是___________,核心步骤是___________。若要迅速获得大量目的基因,常用的技术是____________。
(2)重组质粒导入番茄细胞时,可以先让番茄细胞经过脱分化得到愈伤组织,再把愈伤组织浸入到含有重组质粒的___________菌液中,通过该菌的___________作用使目的基因进入番茄细胞。这种方法往往需要将目的基因结合到___________上,并最终将目 的基因插入到番茄细胞的___________上。
(3)据图分析,乙烯合成酶的反义基因与乙烯合成酶基因的异同是___________。
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转基因生物可用于生产人类所需要的药用蛋白,如激素、抗体、疫苗、酶等。下图甲是通过生物工程培育能产生人胰岛素的烟草的过程。请据图回答下列问题:
(1)基因工程的核心步骤是 (填字母)。此过程所需的工具酶是 。
(2)下图乙是载体和反转录得到的胰岛素基因的片段,已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—,限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。Gene Ⅰ和Gene Ⅱ为质粒上的标记基因,根据图示分析,应用限制酶 切割质粒,用限制酶 切割目的基因。构建的重组质粒中,除含有外源基因、标记基因外,还必须含有 。
(3)B过程中,常用 处理使细菌成为感受态细胞,从而利于重组质粒的导入。
(4)如果从分子水平检测人胰岛素基因是否表达成功,可以采用 方法。
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