人乳铁蛋白是一种药用保健蛋白。下图表示利用乳腺生物反应器生产人乳铁蛋白的过程，图中Tetr...

下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的过程。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。据图回答：

（1）为确保目的基因的完整性及与载体连接的方向性，需用___________(填酶的名称）限制酶同时切割载体和人乳铁蛋白基因，欲筛选出含有重组载体的大肠杆菌，需要在含_____________的培养基上进行，能驱动人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控因子是图中的_____________________。

（2）过程①采用的操作方法通常是________________，过程②代表的生物技术是__________。对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体，但胚胎发育到囊胚时，要确保_____________平均分割。

（3）为检测人乳铁蛋白基因是否成功表达，可采用________技术，对代孕牛的要求是___________。

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下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的过程，图中tet^R表示四环素抗性基因，amp^R表示氨苄青霉索抗性基因，BamHI、Bau3A I、Bst I、Haclll、Not I所指位点为限制酶的酶切位点，五种酶的识别序列及切割位点在下表中。据图表回答：

（1）将双链DNA在中性盐溶液中加热，两条单链分开，叫做DNA变性。变性后的DNA如果慢慢冷却，又能恢复为双链DNA，叫做退火。大量的如右图中N元素标记的DNA在变性后的退火过程中会形成________种DNA。

（2）若对图中质粒进行改造，插入的Not I酶切位点越多，质粒的热稳定性越________。

（3）要将人乳蛋白基因插入载体，如果只允许用一种限制酶酶切载体和人乳铁蛋白基因，应选择的限制酶是 ________。

（4）筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含________的培养基上进行。

（5）若从细胞中提取DNA和RNA，通过基因工程的方法，转移到另一种细胞时，转入DNA比转入RNA要有优势，理由是________

（6）供体牛的受精卵的性染色体组成为________。在胚胎移植过程中，供、受体牛选择好后，要用激素进行同期发情处理的原因是________，以保证移植的胚胎能够继续正常发育

（7）为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用技术。

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下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ表示三种限制酶。请据图回答：

（1）从高表达人乳铁蛋白的组织细胞中提取mRNA，通过_______过程获得cDNA，用于PCR扩增。

（2）图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用_______限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌，首先需要在含_______的培养基上进行。

（3）能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是_______(填字母代号)。

A．启动子　　　　 　　　　　 B．tetR　　　　　 　　　　　 C．复制原点　　　　 　　　　　 D．ampR

（4）过程①可采用的操作方法是_______法。进行过程②之前，需用相应的激素处理代孕牛，使其处于_______状态。

（5）对早期胚胎进行切割，可获得多个新个体，该种生殖方式是_______。

（6）为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用_______技术。

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下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ表示三种限制酶。请据图回答：

（1）从高表达人乳铁蛋白的组织细胞中提取mRNA，通过_______过程获得cDNA，用于PCR扩增。

（2）图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用_______限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌，首先需要在含_______的培养基上进行。

（3）能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是_______(填字母代号)。

A．启动子　　　　 　　　　　 B．tetR　　　　　 　　　　　 C．复制原点　　　　 　　　　　 D．ampR

（4）过程①可采用的操作方法是_______法。进行过程②之前，需用相应的激素处理代孕牛，使其处于_______状态。

（5）对早期胚胎进行切割，可获得多个新个体，该种生殖方式是_______。

（6）为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用_______技术。

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下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ表示三种限制酶。请据图回答：

（1）从高表达人乳铁蛋白的组织细胞中提取mRNA，通过______过程获得cDNA，用于PCR扩增。

（2）图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用______限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌，首先需要在含______的培养基上进行。

（3）能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是_____（填字母代号）。

A．启动子　 　　 　　　　 B．tetR　　　　　　　　 C．复制原点　　　　　　　 D．ampR

（4）进行过程②之前，需用相应的激素处理代孕牛，使其处于______状态。

（5）对早期胚胎进行切割，可获得多个新个体，该种生殖方式属于_____生殖。

（6）为检测人乳铁蛋白基因是否转录，可采用______技术。

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人乳铁蛋白是一种药用保健蛋白。下图表示利用乳腺生物反应器生产人乳铁蛋白的过程，图中Tetr表示四环素抗性基因，Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，五种限制酶的识别序列及切割位点如表所示，请回答以下问题：

（2）据图分析筛选含有重组质粒的受体细胞首先需要在含___________________（填“四环素”“氨苄青霉素”或“四环素或氨苄青霉素”）的培养基上进行，原因是_________________________________。（1）要将人乳铁蛋白基因插入质粒，若只允许使用一种限制酶，应选择的限制酶是_________，酶能起催化作用的原理是_________________________________。

（3）若 BamH I酶切的DNA末端与BclI酶切的DNA末端连接起来，连接部位的6个碱基对序列为___________，对于该部位，这两种酶___________（填“都不能”或“只有一种能”）切开。

（4）培养出早期胚胎后，科学家欲进行胚胎分割移植，则应该选择发育良好、形态正常的___________，将其移入盛有操作液的培养皿中，然后用分割针进行分割。

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下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tet^R表示四环素抗性基因，amp^R表示氨苄青霉素抗性基因，BamHI、HindIII、SmaI指示线所示为三种限制酶的酶切位点。

据图回答：

（1）图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用________限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含________的培养基上进行。

（2）能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是________（填字母代号）。

A．启动子           B．tet^R              C．复制原点         D．amp^R

（3）过程①可采用的操作方法是________。

（4）对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体。这种技术实际上是一种________繁殖。

（5）为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用________技术。

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下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性基因，BamHI、HindIII、SmaI指示线所示为三种限制酶的酶切位点。

据图回答：

（1）图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用________限制酶，同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含____________的培养基上进行。

（2）能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是（______）（填字母代号）

A．启动子　　　　　 B．tetR　　　　 C．复制原点　　　　 D．ampR

（3）过程①可采用的操作方法是（______）（填字母代号）

A．农杆菌转化　　　　 B．大肠杆菌转化　　　　 C．显微注射　　　　 D．细胞融合

（4）为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用（______）（填字母代号）技术。

A．核酸分子杂交　　 B． 基因序列分析　　 C．抗原—抗体杂交　　 D． PCR

（5）基因工程的四个基本操作步骤是_____________、_______________、_______________和_______________。

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下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tet^R表示四环素抗性基因，amp^R表示氨苄青霉素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。据图回答：

（1）图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用_▲ 限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含_▲ 的培养基上进行。

（2）能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是_▲ (填字母代号)。

A．启动子          B．tet^R         C．复制原点        D．amp^R

（3）过程①可采用的操作方法是_▲ (填字母代号)。

A．农杆菌转化      B．大肠杆菌转化      C．显微注射      D．细胞整合

（4）过程②采用的生物技术是_▲ 。

（5）对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体。这利用了细胞的_▲ 性。

（6）为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用_▲ (填字母代号)技术。

A．核酸分子杂交     B．基因序列分析    C．抗原－抗体杂交    D．PCR

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下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。

据图回答：

(1)图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用　　　　　　　 限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含　　　　　　　　　 的培养基上进行。

(2)能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是　　　　　　 (填字母代号)。

A.启动子　　　　 B.tetR　　　　　　 C.复制原点　　　　 D.ampR

(3)过程①可采用的操作方法是　　　　　　 (填字母代号)。

A．农杆菌转化  B．大肠杆菌转化  C．显微注射  D．细胞融合

(4)过程②采用的生物技术是　　　　　　　　　　 。

(5)对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体。这利用了细胞的 　　　　　　　　　　 性。

(6)为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用 　　　　　　　　 　 (填字母代号)技术。

A．核酸分子杂交  B．基因序列分析  C．抗原-抗体杂交  D．PCR

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