将PVY病毒外壳蛋白基因(PVY-CP)导入马铃薯,并使之表达即可获得抗PVY病毒马铃薯。图示是获得抗病毒马铃薯的部分操作,PVY-CP可以从质粒pBBZY中获取;质粒pMON316是选用的运载体,其中NPTⅡ基因是卡那霉素抗性基因,另已知部分限制酶识别序列和切割位点:
BamHⅠ | HindⅢ | BglⅡ | ClaⅠ | SmaⅠ | KpnⅠ |
G↓GATCC CCTAG↑G | A↓AGCTT TTCGA↑A | A↓GATCT TCTAG↑A | AT↓CGAT TAGC↑TA | CCC↓GGG GGG↑CCC | GGTAC↓C C↑CATGG |
请结合图像,运用所学知识回答问题:
(1)含有PVY-CP的质粒pBBZY保存在某细菌群体中,各个细菌含有相关不同的基因,这样的细菌群体称为_____________.
(2)以下对于步骤②中Klenow Polymerase这种物质功能方面的猜测,合理的是______(多选)。
A.具有催化作用
B.可以将DNA片段的黏性末端变成平末端
C.可以被胰蛋白酶水解
D.与DNA连接酶的功能相似
(3)步骤④中应该使用的限制酶是_______________(注意基因接入的方向)。
(4)以上过程中构建的基因表达载体除了图中所显示的组成部分以外,还应该包括______________________和复制原点等组成部分。
(5)利用农杆菌对植物体细胞进行转化,操作过程如下:首先需要将重组质粒pEY3导入____________________细胞中,要实现重组质粒成功导入,应使其处于____________。而后将转化的细胞转移到含有______________的培养基上进行筛选,再用于侵染植物细胞,最后将转化成功的植物细胞过_____________________技术培养成转基因抗病毒马铃薯植株。
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将PVY病毒外壳蛋白基因(PVY-CP)导入马铃薯,并使之表达即可获得抗PVY病毒马铃薯。图示是获得抗病毒马铃薯的部分操作,PVY-CP可以从质粒pBBZY中获取;质粒pMON316是选用的运载体,其中NPTⅡ基因是卡那霉素抗性基因,另已知部分限制酶识别序列和切割位点:
BamHⅠ | HindⅢ | BglⅡ | ClaⅠ | SmaⅠ | KpnⅠ |
G↓GATCC CCTAG↑G | A↓AGCTT TTCGA↑A | A↓GATCT TCTAG↑A | AT↓CGAT TAGC↑TA | CCC↓GGG GGG↑CCC | GGTAC↓C C↑CATGG |
请结合图像,运用所学知识回答问题:
(1)含有PVY-CP的质粒pBBZY保存在某细菌群体中,各个细菌含有相关不同的基因,这样的细菌群体称为_____________.
(2)以下对于步骤②中Klenow Polymerase这种物质功能方面的猜测,合理的是______(多选)。
A.具有催化作用
B.可以将DNA片段的黏性末端变成平末端
C.可以被胰蛋白酶水解
D.与DNA连接酶的功能相似
(3)步骤④中应该使用的限制酶是_______________(注意基因接入的方向)。
(4)以上过程中构建的基因表达载体除了图中所显示的组成部分以外,还应该包括______________________和复制原点等组成部分。
(5)利用农杆菌对植物体细胞进行转化,操作过程如下:首先需要将重组质粒pEY3导入____________________细胞中,要实现重组质粒成功导入,应使其处于____________。而后将转化的细胞转移到含有______________的培养基上进行筛选,再用于侵染植物细胞,最后将转化成功的植物细胞过_____________________技术培养成转基因抗病毒马铃薯植株。
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将PVY病毒外壳蛋白基因(PVY-CP)导入马铃薯,并使之表达即可获得抗PVY病毒马铃薯。图示是获得抗病毒马铃薯的部分操作,PVY-CP可以从质粒A中获取;质粒B是选用的运载体,另已知部分限制酶识别序列和切割位点:
请结合图像,运用所学知识回答问题:
(1)含有PVY-CP的质粒A保存在某细菌群体中,各个细菌含有相关不同的基因,这样的细菌群体称为_____________。
(2)关于步骤②中Ⅺenow酶的猜测,合理的是_____________。
A.催化合成的片段起引物作用
B.可以将DNA片段的粘性末端变成平末端
C.能催化DNA链的合成
D.与DNA连接酶的功能相同
(3)步骤④中应该使用的限制酶是________。
(4)利用基因工程将目的基因导入植物细胞,目前采用最多的方法是 。该方法首先需要将质粒C导入________中,进而转化马铃薯薯片,然后通过________技术获得抗PVY病毒马铃薯苗。
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病毒病是马铃薯的主要病害之一,也是造成马铃薯减产的主要原因之一。科学家通过转基因技术将抗病毒的PVY基因成功导入马铃薯细胞,获得了抗病毒的马铃薯植株。请回答下列问题:
(1)获得PVY基因库,在体外常通过_________技术大量扩增目的基因,该技术的进行需要_________酶参与。该技术不需要解旋酶,这是因为____________________。
(2)马铃薯是双子叶植物,一般来说,将目的基因导入马铃薯细胞时,__________(填“适合”或“不适合”)采用农杆菌转化法,原因是____________________。
(3)检测受体细胞中是否导入了目的基因的方法是____________,该方法所利用的原理是__________。
(4)成功获得抗病毒的马铃薯后,可采用植物细胞工程进行大批量繁育,理论依据是__________。
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病毒病是马铃薯的主要病害,培育抗病毒的马铃薯植株可以采用基因工程技术,研究表明将感染马铃薯的病毒的蛋白质外壳基因导入马铃薯体内可以获得抗病毒的植株,该病毒的遗传物质是DNA,回答下列问题。
(1)获取病毒的蛋白质外壳基因可以用 酶处理病毒的DNA,扩增病毒的蛋白质外壳基因可以用 技术。
(2)将病毒的蛋白质外壳基因导入马铃薯细胞内一般采用 法 ,这种方法是先将目的基因插入到 上,将病毒的蛋白质外壳进导入马铃薯细胞还可以采用 法。
(3)检测受体细胞DNA 分子上是否插入了目的基因采用 ;检测目的基因是否翻译形成蛋白质采用 ;在个体生物学水平鉴定马铃薯植株是否具有抗病毒特性的方法是 。
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1986年,美国的Powell-Abel首次将烟草花叶病毒(TMV)的外壳蛋白基因导入烟草并获得抗TMV的转基因烟草植株。下图为转基因烟草培育过程流程图。请回答下列问题:
(1)TMV是一种RNA病毒,获取TMV外壳蛋白基因的方法是___________。携带外源基因的质粒中标记某因的作用是______________________。
(2)图中目的基因导入烟草细胞的方法是__________,感染过程利用了农杆菌中Ti质粒上的_________,使外源基因进入并整合到烟草染色体DNA上。
(3)A培养皿中发生的过程是___________,C、D培养皿中发生的过程是___________,C、D培养皿中的培养基在成分上的主要区别是___________________。
(4)检测抗TMV的转基因烟草植株是否成功的实验设计思路是______________________。
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黄瓜花叶病毒(CMV)是能侵染多种植物的RNA病毒,可危害番茄的正常生长。转基因抗病毒番茄由北京大学研发,研究人员通过农杆菌介导将该病毒外壳蛋白的cDNA导入番茄植株中,通过植物组织培养技术成功获得抗CMV的番茄植株。请回答下列问题:
(1)将转基因操作后的番茄外植体接种于含有卡那霉素和青霉素的选择培养基上培养一段时间,只有部分外植体生出愈伤组织。研究人员据此确定这些生出愈伤组织的外植体都已成功导入了cDNA,你认为他们做出以上判断的理由是___________________。
(2)在植物组织培养过程中切取的番茄茎组织块要带有____________,用幼嫩茎段比成熟老枝更易产生愈伤组织,且时间早,诱导率高,原因是_______________________。在愈伤组织成长发育的过程中要进行照光培养,其作用是__________________________。
(3)科学家利用植物组织培养技术制造出了神奇的人工种子,人工种子在适宜条件下可以萌发长成幼苗,与天然种子相比能保持原有的遗传特性,其原因是_________,人工种子萌发长成的植株不一定可育,请解释其原因_____________________。
(4)请写出将含有目的基因的番茄细胞培养成一个完整植株的基本程序________(用流程图表示)。
(5)若要验证转基因番茄具有较好的抗CMV能力,请写出实验设计思路。_____________________________________
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利用细胞工程方法,以SARS病毒蛋白质外壳为抗原制备出单克隆抗体。下列叙述正确的是( )
A.用纯化的蛋白质外壳反复注射到小鼠体内,即可获得单克隆抗体
B.体外培养单个浆细胞,即可获得针对SARS病毒的单克隆抗体
C.将等量浆细胞和骨髓瘤细胞混合,诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞
D.给小鼠注射抗原,是为了获得能产生相应抗体的浆细胞
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利用细胞工程方法,以SARS病毒蛋白质外壳为抗原制备出单克隆抗体。下列叙述正确的是( )
A.用纯化的蛋白质外壳反复注射到小鼠体内,即可获得单克隆抗体
B.体外培养单个浆细胞,即可获得针对SARS病毒的单克隆抗体
C.将等量浆细胞和骨髓瘤细胞混合,诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞
D.给小鼠注射抗原,是为了获得能产生相应抗体的浆细胞
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下列目的基因导入植物体内可达到抗真菌效果的是
A.蛋白酶抑制剂基因 B.植物凝集素基因
C.抗毒素合成基因 D.病毒外壳蛋白基因
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(7分)人感染乳头瘤病毒(HPV)可诱发宫颈癌等恶性肿瘤,为制备抗HPV病毒的疫苗,将HPV外壳蛋白L1基因与运载体连接,导入受体细胞,受体细胞将目的基因转录和翻译出L1蛋白,这样就获得了疫苗的有效成分。研究机构为评估某种HPV疫苗的效果,在志愿者中进行接种。一段时间后,统计宫颈出现癌前病变(癌变前病理变化,可发展为恶性肿瘤)的人数,结果见表。
组别 | 接种物 | 总人数 | 癌前病变人数 | |
A (接种前未检出HPV DNA) | A1 | 对照剂 | 7863 | 83 |
A2 | 疫苗 | 7848 | 4 | |
B (接种前检出HPV DNA) | B1 | 对照剂 | 1125 | 126 |
B2 | 疫苗 | 1121 | 125 | |
(1)人体接种该疫苗后,______作为抗原刺激机体产生特异性抗体,一旦HPV侵入机体,______会迅速繁殖、分化,产生大量抗体。这些抗体与游离HPV结合,阻止HPV_______。所以A2组出现癌前病变的比例明显低于对照组。
(2)B1组人群中出现癌前病变的比例显著高于________组,据此推测感染HPV是诱发癌前病变的因素之一。
(3)B2组与B1组人群中出现癌前病变的比例没有明显差异,原因可能是该疫苗未能明显诱导_________免疫清除体内HPV。
(4)在特异性免疫中,T细胞可产生 因子,受到抗原刺激的B细胞可在该因子的作用下,增殖分化为浆细胞,浆细胞产生 ,参与体液免疫过程。
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