（8分）国家饮用水标准规定，每升饮用水中大肠杆菌不超过3个。某小组欲通过实验来检测自来水中...

（8分）国家饮用水标准规定，每升饮用水中大肠杆菌不超过3个。某小组欲通过实验来检测自来水中大肠杆菌的含量，已知大肠杆菌在伊红—美蓝培养基培养，大肠杆菌菌落呈深紫色。请根据下列有关实验步骤回答问题。

(1) 配制培养基：配制伊红—美蓝培养基时，除蛋白胨、乳糖、伊红、美蓝等原料外，还需要水、无机盐和________。在这些成分中，能为大肠杆菌提供氮源的是________。搅拌加热至完全溶解后调节________，分装到锥形瓶。

(2) 倒平板：配制好的培养基用____________法灭菌后，待培养基冷却到50℃左右倒平板。平板冷凝后应将平板______　　　 __放置，以防止皿盖上的水珠落入培养基。

(3) 接种：在右图的系列稀释操作中(101、102、103表示稀释倍数)，依次将1 mL液体移入下一个盛有________mL蒸馏水的试管中。过程a所用的接种方法为　　　　　　　　　　　　 。

(4) 观察与计数：通过一段时间的培养，观察统计培养皿表面深紫色菌落的数目，结果如图所示，则自来水样本中大肠杆菌超标　　　　　　　　　　　　 万倍

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下表为某培养基的配方，有关叙述正确的是(　　 )　　　　　　　　

A. 能在此培养基上生长的大肠杆菌，拟核上有抗青霉素的基因

B. 此培养基是天然鉴别培养基

C. 此培养基可以用来检测自来水中细菌含量是否符合饮用水标准

D. 此培养基可以用于选育转基因大肠杆菌菌种的基因工程的操作过程中

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我国规定每升饮用水中大肠杆菌不能超过3个。某兴趣小组尝试对某品牌饮用水的大肠杆菌含量进行检测，操作简图如图甲，伊红美蓝培养基配方如图乙。

回答下列相关问题：

(1)图甲中滤膜的孔径应________ (“大于”或“小于”)大肠杆菌。受此启发，对某些不耐高温的试剂可以怎样除菌？________________。

(2)配制图乙中的基础培养基时，除了水分、无机盐以外，还应加入________ (一种营养成分)以及________。伊红美蓝培养基上生长的大肠杆菌菌落呈现黑色，从功能上划分，该培养基属于________培养基。

(3)该小组通过统计____________的数目，计算出单位体积样品中大肠杆菌数目。理论上他们的统计值要比实际________ (“偏高”或“偏低”)，理由是______________________________________。

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我国规定每升饮用水中大肠杆菌不能超过3个。某兴趣小组尝试对某品牌饮用水的大肠杆菌含量进行检测，操作简图如图甲所示，据此配置伊红美蓝培养基配方如图乙所示。回答下列相关问题：

（1）图甲中滤膜的孔径应________(“大于”或“小于”)大肠杆菌。受此启发，对某些不耐高温的试剂可以怎样除菌：_________________________。

（2）配制图乙中的基础培养基时，除了水分、无机盐以外，还应加入________(一种营养成分)，以及________；伊红美蓝培养基上生长的大肠杆菌菌落呈现黑色，从功能上划分，该培养基属于_________培养基。

（3）该小组通过统计计算出单位体积样品中大肠杆菌数目，理论上他们的统计值要比实际_______(“偏高”或“偏低”)，理由是______________________________________________。

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下表为某培养基的配方，有关叙述正确的是（　　）

A. 该培养基pH调好后就可以接种菌种

B. 此培养基可以用于基因工程选育转人含青霉素抗性基因的大肠杆菌

C. 此培养基可以用来检测自来水中细菌含量是否符合饮用水标准

D. 此培养基是天然培养基

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急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌和病毒通过消化道进入人体导致的，因此检测饮用水中的细菌含量和病毒含量是有效监控疾病发生的必要措施．检测水中大肠杆菌的含量时，通常将水样进行系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种方法称为（ 　　）

A. 稀释涂布平板法　　 B. 平板划线法　　 C. 显微镜直接观察法　　 D. 目测估计法

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大肠杆菌是基因工程常用的受体菌。它既可生活在人和动物肠道内，又可随粪便排出污染环境，因而常用作饮水和食物（或药物）的卫生学标准（国家规定，每升饮用水中大肠杆菌数不应超过3个）。请回答下列与大肠杆菌有关的问题：

（1）从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于________；从生存环境分析推测，它的新陈代谢类型应该是________。

（2）某研究性学习小组对本校自来水进行了检测。一同学用无菌吸管吸取1 mL水样至盛有________ mL无菌水的试管中，得到10¹倍稀释的样品；依次稀释，得到10²、10³倍稀释的样品；把每种稀释度的样品分别接种到3个平板培养基上培养，最后统计菌落数。若3种稀释度的平均菌落数分别为402、30、2，应以_______倍稀释的样品来计算水样中的菌体数；若接种量均为0.1 mL，则该水样中大肠杆菌超标_______万倍。

（3）下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。

将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL。根据用途划分该培养基属于________(选择/鉴别)培养基。该培养基中的碳源是________。

（4）培养大肠杆菌时，常用的接种方法是平板划线法和______________。为防止杂菌污染需要对培养基和培养皿进行____________。

（5）以下微生物发酵生产特定产物时，所利用主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是________(双选)。

A．制作果酒      B．由果酒制作果醋      C．制作泡菜      D．制作腐乳

（6）利用培养基不仅可以分离培养微生物，也可以进行植物组织培养。与微生物培养明显不同的是，用于组织培养的培养基中还需要加入________。

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炎热的夏季学生更喜欢饮用直饮机中的温水，由于接水时间集中，水往往来不及加热就被接出饮用。兴趣小组的同学预检测直饮机过滤水中的大肠杆菌是否超标下列实验不合理的是（　　 ）

A.应设置未接种的培养基作为对照

B.待测水样应该灭菌后再检测

C.可用刚果红染色法鉴定大肠杆菌菌落

D.接种后的培养皿要倒置在适宜温度下培养

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大肠菌群常作为水体受粪便污染的指示菌，饮用水的卫生标准是100mL中不得检出大肠菌群。欲确定饮用水是否合格，可采用滤膜法检测饮用水中的大肠菌群，过程如下图，以下说法错误的是（　　 ）

A.滤膜的孔径大小应该可以允许大肠菌通过

B.完成过滤后需将滤膜的A面接触配置好的培养基

C.可通过菌落特征鉴定是否为大肠杆菌

D.与稀释涂布平板法相比，此方法的优势是可一次对较多水样进行检测

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牛奶中富含蛋白质，长期饮用有助于增强体质，但牛奶同时也是多种疾病的传播载体。国家标准是每毫升牛奶中细菌数小于30000个。以下是牛奶消毒及细菌检测实验。

（1）图中步骤①称为　　　　　 消毒法。步骤②是　　　　　　　　　　 。

（2）将接种后的培养基和作为对照的　　　　　　　　　　 同时放入37℃恒温培养箱中，培养36小时。取出后统计各平板的菌落数，结果如右表所示。应该选择其中稀释倍数为　　　　 的平板进行计数，经过消毒后的牛奶中，细菌数大约是　　　　　　 /mL。

（3）记录细菌数量除了用活菌计数法，还可以直接取水样用　　　　　　　　　　　　 法直接进行计数。

（4）如果接种后一个平板经培养后的菌落分布如图所示，推测接种时可能的操作失误是　　　　　　　 　　　　 。

（5）纯化细菌,最常用的方法除了本实验方法，还有　　　　　　　　　　　 。

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