下图是利用工程菌(大肠杆菌)生产人生长激素(由人垂体细胞产生的一种蛋白质类激素)的实验流程。所用的pBR322质粒含有限制酶pstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ的切点各一个,且三种酶切割形成的黏性末端各不相同,而Ampr表示青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因。请据图回答以下相关问题:
(1)过程①所用细胞是________________,过程②所用的酶是_________。
(2)人生长激素基因在经③处理之前需经过PCR扩增,扩增时应在PCR扩增仪中加入________酶用以催化互补链的合成。
(3)过程④所用的酶是___________________________。
(4)若用限制酶PstⅠ切割,完成过程④、⑤后,将三角瓶内的大肠杆菌先接种到甲培养基上,再将甲培养基上的单个大肠杆菌接种到丙培养基上,待形成12个菌落后,将相应菌落的一部分转接到乙培养基的相同位置上。一段时间后,菌落的生长状况如图乙、丙所示。接种到培养基乙上能存活的是导入含__质粒的大肠杆菌。生产人生长激素的工程菌应从丙培养基的菌落中选取,选取的依据是______。
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下图是利用工程菌(大肠杆菌)生产人生长激素(由人垂体细胞产生的一种蛋白质类激素)的实验流程。所用的pBR322质粒含有限制酶pstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ的切点各一个,且三种酶切割形成的黏性末端各不相同,而Ampr表示青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因。请据图回答以下相关问题:
(1)过程①所用细胞是________________,过程②所用的酶是_________。
(2)人生长激素基因在经③处理之前需经过PCR扩增,扩增时应在PCR扩增仪中加入________酶用以催化互补链的合成。
(3)过程④所用的酶是___________________________。
(4)若用限制酶PstⅠ切割,完成过程④、⑤后,将三角瓶内的大肠杆菌先接种到甲培养基上,再将甲培养基上的单个大肠杆菌接种到丙培养基上,待形成12个菌落后,将相应菌落的一部分转接到乙培养基的相同位置上。一段时间后,菌落的生长状况如图乙、丙所示。接种到培养基乙上能存活的是导入含__质粒的大肠杆菌。生产人生长激素的工程菌应从丙培养基的菌落中选取,选取的依据是______。
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下图是利用工程菌(大肠杆菌)生产人生长激素(由人垂体细胞产生的一种蛋白质类激素)的实验流程。所用的pBR322质粒含有限制酶pstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ的切点各一个,且三种酶切割形成的黏性末端各不相同,而Ampr表示青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因。请据图回答以下相关问题:
(1)过程①所用细胞是________________,过程②所用的酶是_________。
(2)人生长激素基因在经③处理之前需经过PCR扩增,扩增时应在PCR扩增仪中加入________酶用以催化互补链的合成。
(3)过程④所用的酶是___________________________。
(4)若用限制酶PstⅠ切割,完成过程④、⑤后,将三角瓶内的大肠杆菌先接种到甲培养基上,再将甲培养基上的单个大肠杆菌接种到丙培养基上,待形成12个菌落后,将相应菌落的一部分转接到乙培养基的相同位置上。一段时间后,菌落的生长状况如图乙、丙所示。接种到培养基乙上能存活的是导入含__质粒的大肠杆菌。生产人生长激素的工程菌应从丙培养基的菌落中选取,选取的依据是______。
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(8分)我国基因工程药物的研制和生产发展迅猛,下图是利用基因工程方法生产人生长激素的示意图。pBR322质粒为基因工程中经常选用的载体,Ampr表示青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因,该质粒上有限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ的识别和切割位点,如图(已知普通大肠杆菌中不含有pBR322质粒上任何基因;限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ切割形成的末端均不相同)。回答问题:
(1)过程②为 ________,质粒上的抗性基因作用是 ________。
(2)为防止④过程中出现多种重组质粒,一般用两种限制酶分别对目的基因和质粒进行剪切,从而把目的基因和质粒各自剪切出 ________(不同/相同)的黏性末端。基因表达载体中目的基因除包含以上所描述的结构外,还必须含有________。
(3)如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ中的任意两种,同时对多个质粒pBR322进行切割,则形成的DNA片段共 ________种;为提高⑤过程成功率,常用 ________溶液处理大肠杆菌。
(4)现在用限制酶PstI切割目的基因和质粒pBR322,完成过程④、⑤后,将三角瓶内的大肠杆菌先接种到甲培养基上,形成菌落后用无菌牙签挑取甲上的单个菌落,分别接种到乙和丙两个培养基的相同位置,一段时间后,菌落的生长状况如上图所示。甲培养基上能生长的大肠杆菌中含有 ________基因,与丙相比,乙培养基中少了两个菌落,说明丙培养基中这两个菌落中的大肠杆菌 ________。
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人们试图利用基因工程的方法,用乙种生物生产甲种生物的一种蛋白质。生产流程是:甲生物的蛋白质→mRNA目的基因与质粒DNA重组导入乙细胞获得甲生物的蛋白质,下列说法正确的是( )
A.如果受体细胞是细菌,可以选用枯草杆菌、炭疽杆菌等
B.①过程需要的酶是逆转录酶,原料是A、U、G、C
C.②过程要用酶将目的基因与质粒连接在一起
D.④过程中没有碱基互补配对
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人们试图利用基因工程的方法,用乙种生物生产甲种生物的一种蛋白质。生产流程是:甲生物的蛋白质→mRNA――→目的基因――→与质粒DNA重组――→导入乙细胞――→获得甲生物的蛋白质,下列说法正确的是
A.①过程需要的酶是逆转录酶,原料是A、U、G、C
B.②要用限制酶切断质粒DNA,目的基因导入乙细胞后一定会表达甲生物的蛋白质
C.质粒一般存在于原核生物细菌中,真核生物酵母菌也具有
D.④过程用的原料和工具中不含有A、U、G、C
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(2015秋•成都校级期中)人们试图利用基因工程的方法,用乙种生物生产甲种生物的一种蛋白质.生产流程是:甲生物的蛋白质→mRNA目的基因与质粒 DNA 重组导入乙细胞获得甲生物的蛋白质,下列说法正确的是( )
A.①过程需要的酶是逆转录酶,原料是A、U、G、C
B.②要用限制酶切断质粒DNA,目的基因导入乙细胞后一定会表达甲生物的蛋白质
C.质粒一般存在于原核生物细菌中,真核生物酵母菌也具有
D.④过程用的原料和工具中不含有A、U、G、C
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人们试图利用基因工程的方法,用乙种生物生产甲种生物的一种蛋白质。生产流程是:决定甲生物的蛋白质mRNA目的基因与质粒DNA重组导入乙种生物的细胞获得甲生物的蛋白质。下列说法正确的是( )
A. ①过程需要的酶是逆转录酶,原料是A、U、G、C四种核糖核苷酸
B. ②要用限制酶切断质粒,再用DNA连接酶将目的基因与质粒连接在一起
C. 如果受体细胞是细菌,可以选用枯草杆菌、炭疽杆菌等
D. ④过程中用的原料不含有A、U、G、C四种核糖核苷酸
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人们试图利用基因工程的方法,用乙种生物生产甲种生物的一种蛋白质.生产流程是:甲生物的蛋白质→mRNA目的基因与质粒 DNA 重组导入乙细胞获得甲生物的蛋白质,下列说法正确的是( )
A.①过程需要的酶是逆转录酶,原料是A、U、G、C
B.②要用限制酶切断质粒DNA,目的基因导入乙细胞后一定会表达甲生物的蛋白质
C.质粒一般存在于原核生物细菌中,真核生物酵母菌也具有
D.④过程用的原料和工具中不含有A、U、G、C
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人们试图利用基因工程的方法,用乙种生物生产甲种生物的一种蛋白质。生产流程:甲生物的蛋白质→mRNA目的基因与质粒DNA重组导入乙生物的细胞获得甲生物的蛋白质。下列说法正确的是( )
A.①过程需要的酶是逆转录酶,原料是碱基组成为A、U、G、C的四种游离的脱氧核苷酸
B.②要用限制酶切断质粒DNA,再用DNA连接酶将目的基因与质粒连接在一起
C.如果要合成的是糖蛋白,选择大肠杆菌作受体细胞
D.④过程中用的原料不含有A、U、G、C
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人们试图利用基因工程的方法,用乙种生物生产甲种生物的一种蛋白质。生产流程:甲生物的蛋白质→mRNA目的基因与质粒DNA重组导入乙细胞获得甲生物的蛋白质。下列说法正确的是( )
A. ①过程需要的酶是逆转录酶,原料是A、U、G、C
B. ②要用限制酶切断质粒DNA,再用DNA连接酶将目的基因与质粒连接在一起
C. 如果受体细胞是动物细胞,③过程可以用农杆菌转化法
D. 参与④过程的物质不含有A、U、G、C
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