肿瘤的生长依赖于新生血管，血管内皮生长因子(VEGF)是目前公认最关键的促血管形成因子。为...

肿瘤的生长依赖于新生血管，血管内皮生长因子(VEGF)是目前公认最关键的促血管形成因子。为研究促性腺激素释放激素(GnRH)类似物(药物甲)、“顺铂”(一种化疗药物乙)及其联合作用对卵巢癌动物血管生成的影响，研究人员以卵巢癌细胞为研究对象，检测细胞中血管内皮生长因子的mRNA和蛋白质的含量。

材料与用具：3 mg/L顺铂、10－7 mol·L－1 GnRH类似物、胰蛋白酶、12孔细胞培养板(每个孔可进行细胞培养)、卵巢癌细胞、细胞培养液、CO2培养箱。

(要求与说明：不考虑加入顺铂和GnRH类似物对体积的影响；VEGF的mRNA和蛋白质含量的具体检测步骤不作要求；实验条件适宜)

(1)实验思路：(其中药物加入设计画在下面的12孔细胞培养板示意图中即可，无需再文字说明；药物可用甲、乙表示；药物作用3天，每24 h检测一次，无需前测；重复实验不要求)

____________________________________

(2)若GnRH类似物、顺铂都能抑制血管生成，且联合作用效果更佳。请画出药物作用48 h时血管内皮生长因子的mRNA和蛋白质相对含量的柱形图。

__________________________________

(3)实验分析：

①促性腺激素释放激素由________产生。

②如果已得到上述第(2)小题中的实验结果，为了进一步在活体水平上验证这两种药物及其联合作用的影响，下一步你将选用身体状况一致的________动物，随机均分后，分组进行药物处理，观察__________。

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肿瘤的生长依赖于新生血管，为研究促性腺激素释放激素(GnRH)类似物和“顺铂”（一种化疗药物)联合作用对血管生成的影响，研究人员用鸡胚进行实验，统计单位面积平均血管数，结果如下表。

请回答问题：

（1）促性腺激素释放激素(RnRH)由_______产生，促进垂体释放_________，调节卵巢的生理活动。

（2）据表分析，GnRH类似物可______血管的生成，GnRH类似物和顺铂联合作用的效果_____顺铂单独作用。

（3）已知血管内皮生长因子(VEGF)诱导血管的新生。研究者推测，RnRH类似物可通过调控癌细胞VEGF基因的表达抑制肿瘤生长。为证明此推测，对卵巢癌细胞分别进行上表中四组处理，检测各组癌细胞产生的________含量。

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图1为巨噬细胞炎症反应的新机制研究，巨噬细胞受细菌感染或细菌脂多糖LPS刺激后，升高血管内皮生长因子受体3（VEGFR-3）和信号分子VEGF-C的表达。VEGFR-3形成反馈环路，抑制TLR4-NF-kB介导的炎症反应，降低细菌感染导致的败血症的发生。

（1）细菌或细菌脂多糖 LPS在免疫学上相当于_______，TLR4的本质是________。

（2）过度或持续性的 TLR4 活化引起过度炎症反应、败血症，在VEGF-C的刺激下，通过活化PI3K-Akt1通路，促进____________，从而抑制 NF-kB 活性，降低败血症的发生。

（3）该细胞能够产生溶菌酶直接杀死病原菌，该过程属于________免疫。

（4）抗原激发的体液免疫应答有两类：第一类是大多数抗原必须有T细胞参与下才能完成；第二类是有少数抗原物质，单独刺激B细胞即可完成．为了探究细菌脂多糖LPS属于哪一类免疫应答，可以选择年龄、性别等相同的小鼠进行LPS接种处理（如表）。据表分析，实验组是________组小鼠，如果___________________则该抗原属于第二类。

（5）一般情况下，接受抗原刺激的B细胞会增殖分化为_____，科学家用LPS分先后两次接种小鼠，并检测相应的抗体的产生量，如图2所示：该实验结果说明LPS____________。

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（7分）内蒙古白绒山羊的血管内皮生长因子基因（VEGF164），若在皮肤毛囊细胞中特异性表达，可促进毛囊发育和毛发生长，显著提高羊毛产量。科学家将该基因导入羊胎儿的成纤维细胞核，成功培育出转基因克隆山羊。技术流程如下图，其中EcoRⅠ、SalⅠ、SphⅠ为限制酶。

请据图回答:

⑴在构建基因表达载体的过程中，应采用_____________________（填酶名称）对质粒和含绿色荧光基因的DNA片段进行酶切，再经_____________________（填酶名称）处理形成重组质粒。其中绿色荧光基因的作用是_____________________________。

⑵要使VEGF164在皮肤毛囊中表达，须将它与羊绒蛋白基因的____________________

__________        ______等调控组件重组起来，构建基因表达载体（2分）。

⑶图中过程②应用了_______________   ______技术获得重组细胞，重组细胞进一步培养成早期胚胎，再经图中③___________  __________技术可培育成转基因克隆山羊。

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2009年2月9日，加拿大麦吉尔大学卫生中心研究所杰纳斯•雷克研究小组认为，肿瘤细胞能释放一种叫微泡的“气泡”让肿瘤与血管内皮细胞进行交流，并改变这些内皮细胞的行为。这些微泡在离开肿瘤组织时携带一种特殊的“癌症蛋白”。当微泡与内皮细胞融合，它们所携带的这些“癌症蛋白”就会触发促进新血管异常形成的机制。这些新生血管向着肿瘤方向生长并为它们提供生长所需营养。下列与此相关的叙述中不合理的是

A. “癌症蛋白”是信息分子，其作用过程也是细胞间的一种信息传递过程

B. 微泡与内皮细胞能够融合与细胞膜的流动性有关

C.“癌症蛋白”的形成与核糖体、内质网、高尔基体、线粒体等有关

D. 新生血管向着肿瘤方向生长与细胞分裂有关，而与细胞的分化无关

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研究小组发现了胎盘生长因子抗体——PLGF抗体，该抗体与肿瘤内的胎盘生长因子结合，阻断了胎盘生长因子与毛细血管结合的通路，削减了对肿瘤的养分供给，癌细胞分裂速度减缓，低于免疫系统杀死癌细胞的速度，使肿瘤明显缩小。说法正确的是

A. 人体内只有癌变的细胞内存在原癌基因

B. 癌细胞容易转移，是由于细胞表面的糖蛋白增多，细胞之间的润滑作用增强

C. PLGF抗体的化学本质是蛋白质，其合成与分泌需多种细胞器的参与

D. 肿瘤细胞细胞周期变长

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某研究小组发现了胎盘生长因子抗体——PLGF抗体,该抗体能与肿瘤内的胎盘生长因子结合,阻断胎盘生长因子与毛细血管结合的通路,削减了对肿瘤的养分供给,癌细胞分裂速率减缓,低于免疫系统杀死癌细胞的速率,使肿瘤明显缩小。下列说法正确的是

A．人体内只有癌变的细胞内存在原癌基因

B．PLGF抗体的化学本质是蛋白质,其合成与分泌需多种细胞器的参与

C．癌细胞容易转移,是由于细胞表面的糖蛋白增多,细胞之间的润滑作用增强

D．该抗体与肿瘤内的胎盘生长因子结合属于细胞免疫

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科学家研究发现，肿瘤细胞能释放一种叫“微泡”的泡状结构，这些“微泡”在离开肿瘤组织时携带一种特殊的“癌症蛋白”。当“微泡”与血管上皮细胞融合时，它所携带的“癌症蛋白”就会触发促进新血管异常形成的机制，使这些新生血管向着肿瘤方向生长。下列与此相关的叙述中不合理的是（　　 ）

A.“微泡”和血管上皮细胞能够融合与细胞膜的流动性有关

B.“癌症蛋白”的形成需要由内质网以及高尔基体进行加工

C.“癌症蛋白”的作用影响了血管上皮的分化，致使癌化

D.新生血管向着肿瘤方向生长后上皮细胞的细胞周期会延长

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科学家研究发现，肿瘤细胞能释放一种叫“微泡”的泡状结构，这些“微泡”在离开肿瘤组织时携带一种特殊的“癌症蛋白”。当“微泡”与血管上皮细胞融合时，它所携带的“癌症蛋白”就会触发促进新血管异常形成的机制，使这些新生血管向着肿瘤方向生长。下列与此相关的叙述中不合理的是

A. “癌症蛋白”的形成需要由内质网以及高尔基体进行加工

B. “癌症蛋白”的作用影响了血管上皮细胞基因的选择性表达

C. 新生血管向着肿瘤方向生长后上皮细胞的细胞周期会延长

D. “微泡”和血管上皮细胞能够融合与细胞膜的流动性有关

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科学家研究发现，肿瘤细胞能释放一种叫“微泡”的泡状结构，这些“微泡”在离开肿瘤组织时携带一种特殊的“癌症蛋白”。当“微泡”与血管上皮细胞融合时，它所携带的“癌症蛋白”就会触发促进新血管异常形成的机制，使这些新生血管向着肿瘤方向生长。下列与此相关的叙述中不合理的是

A.“微泡”和血管上皮细胞能够融合与细胞膜的流动性有关

B.“癌症蛋白”的形成需要由内质网以及高尔基体进行加工

C.“癌症蛋白”的作用影响了血管上皮细胞基因的选择性表达

D.新生血管向着肿瘤方向生长后上皮细胞的细胞周期会延长

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