酶切图谱是描述限制性内切酶的酶切点的位置和距离信息的图谱,通常选取某一特定长度的DNA分子,用多种限制酶单独或联合切割,再通过电泳技术将酶切片段进行分离,计算相对大小,从而确定每一种限制酶在DNA分子中的切点位置和相对距离。下图表示BamHⅠ、BstⅠ、BglⅡ三种限制酶识别的核苷酸序列和切割位点,表格中数据是用限制酶EcoR Ⅴ、Mbo Ⅰ单独或联合切割同一种质粒,得到DNA片段长度。请回答下列问题:
BamH Ⅰ ―→+ Bst Ⅰ ―→+
Bgl Ⅱ ―→+
酶 | DNA片段长度 |
EcoRⅤ | 14 kb |
MboⅠ | 2.5 kb、11.5 kb |
EcoRⅤ+MboⅠ | 2.5 kb、5.5 kb、6 kb |
(1)限制性内切酶BamHⅠ与BstⅠ作用的特点是________________,BamHⅠ与BglⅡ作用的特点是________________。黏性末端+重组的DNA分子________(填“能”或“不能”)被BglⅡ识别。
(2)请在图中画出质粒上EcoRⅤ、MboⅠ的切割位点。
(3)DNA连接酶与DNA聚合酶作用的共同点是都形成________键,不同点是____________________________。
(4)在基因工程中,检测受体细胞是否含有目的基因采用的方法是________________。
高二生物综合题中等难度题
酶切图谱是描述限制性内切酶的酶切点的位置和距离信息的图谱,通常选取某一特定长度的DNA分子,用多种限制酶单独或联合切割,再通过电泳技术将酶切片段进行分离,计算相对大小,从而确定每一种限制酶在DNA分子中的切点位置和相对距离。下图表示BamHⅠ、BstⅠ、BglⅡ三种限制酶识别的核苷酸序列和切割位点,表格中数据是用限制酶EcoR Ⅴ、Mbo Ⅰ单独或联合切割同一种质粒,得到DNA片段长度。请回答下列问题:
BamH Ⅰ ―→+ Bst Ⅰ ―→+
Bgl Ⅱ ―→+
酶 | DNA片段长度 |
EcoRⅤ | 14 kb |
MboⅠ | 2.5 kb、11.5 kb |
EcoRⅤ+MboⅠ | 2.5 kb、5.5 kb、6 kb |
(1)限制性内切酶BamHⅠ与BstⅠ作用的特点是________________,BamHⅠ与BglⅡ作用的特点是________________。黏性末端+重组的DNA分子________(填“能”或“不能”)被BglⅡ识别。
(2)请在图中画出质粒上EcoRⅤ、MboⅠ的切割位点。
(3)DNA连接酶与DNA聚合酶作用的共同点是都形成________键,不同点是____________________________。
(4)在基因工程中,检测受体细胞是否含有目的基因采用的方法是________________。
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为了解基因结构,通常选取一特定长度的线性DNA分子,先用一种限制酶切割,通过电泳技术将单酶水解片段分离,计算相对大小;然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解,分析片断大小。下表是某小组进行的相关实验。
(1)由实验可知,在这段已知序列上,A酶与B酶的识别序列分别为______个和_____个。
(2)根据表中数据,请在下图中标出相应限制性酶的酶切位点并注明相关片断的大小。 _________________
(3)BamH Ⅰ与BglⅡ的识别序列及切割位点如下图,用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BamHⅠ和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作,若干循环后_______序列明显增多。
(4)用于基因治疗的基因种类有:______________、_____________、_____________。
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(12分)为了解基因结构,通常选取一特定长度的线性DNA分子,先用一种限制酶切割,通过电泳技术将单酶水解片段分离,计算相对大小;然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解,分析片断大小。下表是某小组进行的相关实验。
已知一线性DNA序列共有5000bp(bp为碱基对) | 第一步水解 | 产物 (单位bp) | 第二步水解 | 产物 (单位bp) |
A酶切割 | 2100 | 将第一步水解产物分离后,分别用B酶切割 | 1900 200 | |
1400 | 800 600 | |||
1000 | 1000 | |||
500 | 500 | |||
B酶切割 | 2500 | 将第一步水解产物分离后,分别用A酶切割 | 1900 600 | |
1300 | 800 500 | |||
1200 | 1000 200 | |||
经A酶和B酶同时切割 | 1900 1000 800 600 500 200 |
(1)该实验设计主要体现了__________________原则。
(2)由实验可知,在这段已知序列上,A酶与B酶的识别序列分别为______个和_____个。
(3)根据表中数据,请在下图中标出相应限制性酶的酶切位点并注明相关片断的大小。
(4)已知BamH Ⅰ与BglⅡ的识别序列及切割位点如下图所示,用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BamH Ⅰ和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作,若干循环后“AGATCC//TCTAGG”和___________序列明显增多,该过程中DNA连接酶催化_________键的形成。
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为了解基因结构,通常选取一特定长度的线性DNA分子,先用一种限制酶切割,通过电泳技术将单酶水解片段分离,计算相对大小;然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解,分析片段大小。下表是某小组进行的相关实验。
已知第一线性DNA序列共有 5000bp (bp为碱基对) | 第一步水解 | 产物 (单位bp) | 第二步水解 | 产物 (单位bp) |
A酶切割 | 3500 | 将第一步水解产物分离后,分别用B酶切割 | 1500 2000 | |
1000 | 1000 | |||
500 | 500 | |||
B酶切割 | 2000 | 将第一步水解产物分离后,分别用A酶切割 | 500 1500 | |
3000 | 2000 1000 | |||
经A酶和B酶同时切割 | 2000 1500 1000 500 |
(1)该实验中体现出限制酶的作用特点是 。
(2)由实验可知,在这段已知序列上,A酶与B酶的识别序列分别为 个和 个。
(3)根据表中数据,请在下图中用箭头标出相应限制酶的酶切位点。
(4)已知BamH I与BglⅡ的识别序列及切割位点如下图所示,用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BamHI和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作,若干次循环后和 序列明显增多,该过程中DNA连接酶催化 键的形成。
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(6分)为了解基因结构,通常选取一特定长度的线性DNA分子,先用一种限制酶切割,通过电泳技术将单酶水解片段分离,计算相对大小;然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解,分析片断大小。下表是某小组进行的相关实验。
已知一线性DNA序列共有5000bp(bp为碱基对) | 第一步水解 | 产物 (单位bp) | 第二步水解 | 产物 |
A酶切割 | 2100 | 将第一步水解产物分离后,分别用B酶切割 | 1900 200 | |
1400 | 800 600 | |||
1000 | 1000 | |||
500 | 500 | |||
B酶切割 | 2500 | 将第一步水解产物分离后,分别用A酶切割 | 1900 600 | |
1300 | 800 500 | |||
1200 | 1000 200 | |||
经A酶和B酶同时切割 | 1900 1000 800 600 500 200 |
(1)该实验设计主要体现了________原则。
(2)由实验可知,在这段已知序列上,A酶与B酶的识别序列分别为________个和________个。
(3)根据表中数据,请在答题纸图中标出相应限制性酶的酶切位点并注明相关片断的大小。
(4)已知BamH Ⅰ与BglⅡ的识别序列及切割位点如右图所示,用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BamH Ⅰ和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作,若干循环后“AGATCC//TCTAGG”和“GGATCT//CCTAGA”序列明显增多,该过程中DNA连接酶催化________键的形成。
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有关DNA限制性内切酶的理解正确的是
A.主要存在于微生物中
B.一种限制酶可以识别多种特定的核苷酸序列
C. 一种限制酶能在不同的切点上切割DNA分子
D.其化学本质是DNA
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用限制酶EcoRⅤ单独切割某普通质粒,可产生14kb(1kb即1000个碱基对)的长链,而同时用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ联合切割该质粒,可得到三种长度的DNA片段,见下图(其中*表示EcoRⅤ限制酶切割后的一个黏性末端)。
若用MboⅠ限制酶单独切割该普通质粒,则产生的DNA片段的长度为( )
A. 2.5和5.5 B. 2.5和6 C. 5.5和8 D. 6和8
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用限制酶EcoRⅤ单独切割某普通质粒,可产生14kb(1kb即1000个碱基对)的长链,而同时用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ联合切割该质粒,可得到三种长度的DNA片段,见下图(其中*表示EcoRⅤ限制酶切割后的一个黏性末端)。
若用MboⅠ限制酶单独切割该普通质粒,则产生的DNA片段的长度为( )
A. 2.5和5.5 B. 2.5和6 C. 5.5和8 D. 6和8
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下列关于基因工程中限制酶的叙述正确的是
A. 限制酶广泛存在于各种生物中
B. 限制酶能在不同切点切割DNA分子
C. 一种限制酶可以识别一种特定的核苷酸序列
D. 所有限制酶的切点都相同
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在基因工程中用到的限制性核酸内切酶主要从原核生物中获得,一种限制酶只能识别双链DNA某种特定核苷酸序列,并且能在特定的切点上切割DNA分子,这与酶的什么性质相吻合( )
A. 高效性 B. 具有多样性
C. 专一性 D. 催化活性受外界条件影响
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