随着社会的发展，石油产品的使用越来越多，石油烃污染也越来越严重。为了筛选出分解石油烃能力更...

随着社会的发展，石油产品的使用越来越多，石油烃污染也越来越严重。为了筛选出分解石油烃能力更强的微生物，人们不断地进行研究。请回答与此筛选过程有关的问题：

（1）一般来说，微生物生长过程中需要的营养物质包括___________源、___________源、水、无机盐等。

下图为获取土壤样品后的培养研究过程：

（2）为了能有效地分离出分解石油烃的微生物，过程①一④所用培养基，其成分的特点是　　　　　　　　　　　　　　　　　 ，从而有利于　　　　　　　　　　　　　　　 的生长，抑制其他微生物的生长，这样的培养基可称做　　　　　　　　　 培养基。

（3）④中的培养基从物理特征看属于　　　　　　　　 培养基，灭菌方式为______________。对④进行接种常采用的两种方法分别是__　　　　　　　　　　　 和　　　　　　　　　　　　　　　 ；接种工具灭菌方式是_________________________。

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随着环境污染的加剧和石油危机出现，越来越多的国家使用乙醇作为代替燃料。生产中玉米和麦草的秸秆可以用来生产燃料乙醇，已知秸秆的主要成分是纤维素，回答以下问题。

（1）人们首先利用纤维素分解菌将纤维素分解，纤维素分解菌多分布在________的土壤中，该微生物产生的纤维素酶是一种复合酶，一般包括三种成分，________、________和________。前两种酶能使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。

（2）经过梯度稀释后，要将样品均匀涂布在用于鉴别纤维素分解菌的培养基上，在该培养基中需要加入的特殊染料是________，形成菌落后可根据菌落周围是否产生________来筛选纤维素分解菌。当利用涂布器涂布平板之后需要对涂布器进行________处理。（“消毒”或“灭菌”）

（3）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。培养噬盐菌的菌样应从 ________环境采集。

（4）下表所示为某微生物培养基的配方

依用途划分，该培养基属于________培养基。该培养基中的碳源是________。若用该培养基培养纤维素分解菌，应除去的物质是________，应加入的物质是________。不论何种培养基，在各成分溶化后分装前，要进行的是________，接种前要进行的是________。

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研究被石油污染过的土壤中细菌数量，并从中筛选出能分解石油的细菌。为了分离和纯化高效分解石油的细菌，科研人员利用被石油污染过的土壤，对分解石油的细菌进行分离和提纯，回答下列相关问题。

⑴配置好的培养基通常可以使用__________灭菌。培养基的营养成分包括水、无机盐、碳源和______等。其中碳源应该以_______为唯一碳源。

⑵纯化菌种时，为了得到单个菌落，常采用的接种方法有两种，即______和________。

⑶该实验中使用的是固体培养基，要得到固体培养基，应在培养基中加入______做凝固剂。

⑷为了对土壤中分解石油的细菌进行计数，科研人员把不同稀释度的菌液进行涂布（每个平板加0.1毫升菌液）、培养、计数。统计结果发现稀释倍数为103的三个平板中，菌落数分别为45、38、37。问每克土壤中能分解石油的细菌数约为______个。酵母菌细胞中有_________这是酵母菌与分解石油的细菌在结构上的最大区别。

⑸若用15N对分解石油的细菌的DNA进行标记，然后把这个细菌放在含14N培养基中培养，让其连续分裂四次，则后代中，含15N的DNA的细菌和含14N的DNA的细菌之比为______。若把分解石油的细菌的DNA提取出来用DNA酶处理得到的产物是_____。

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某研究小组欲研究被石油污染过的土壤中细菌的数量，并从中筛选出能分解石油的细菌。下列操作错误的是

A. 称取和稀释被污染的土壤时应在火焰旁

B. 用以石油为唯一碳源的培养基进行筛选

C. 分离菌种时可采用稀释涂布平板法接种

D. 对细菌进行计数时宜采用平板划线法接种

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某研究小组欲研究被石油污染过的土壤中细菌的数量，并从中筛选出能分解石油的细菌。下列操作错误的是

A. 称取和稀释被污染的土壤时应在火焰旁

B. 用以石油为唯一碳源的培养基进行筛选

C. 分离菌种时可采用稀释涂布平板法接种

D. 对细菌进行计数时宜采用平板划线法接种

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随着石油工业的迅速发展，石油这种有多种烃类的物质不断地对陆地、海洋造成污染。目前世界上不少国家的近海都遭到了石油污染，导致海洋生物数量减少。基因工程可用于被污染环境的净化。1975年，科学家用基因工程的方法，把能分解三种烃类的基因都转移到分解另一种烃类的似单胞杆菌内。创造出了能同时分解四种烃类的“超级细菌”，用超级细菌分解石油，可以大大提高细菌分解石油的效率。根据以上材料，回答下列问题。

(1)石油污染导致海洋生物数量减少的重要原因是 （______）。

A．富营养化　　

B．生物富集

C．引起海洋生物中毒

D．形成油膜，改变了海水的理化性质

(2)科学家能将不同种基因移植在一起，且不影响各基因信息的表达，这说明了不同生物的DNA_________________________。

(3)基因工程中最常用的运载体是质粒，作为运载体，需有标记基因，如抗青霉素基因、抗四环素基因等。现欲鉴别某种细菌质粒抗药性基因的类别，设计如下实验：

材料用具：青霉素、四环素的10万单位溶液，菌种试管，已经灭菌的含细菌培养基的培养皿，酒精灯，接种环，一次性注射器，蒸馏水，恒温箱。

方法步骤：

第一步：取3个含细菌培养基的培养皿并分别标上1、2、3号，在酒精灯旁，用3只注射器分别注入1mL蒸馏水、青霉素溶液、四环素溶液，并使之分布在整个培养基表面；

第二步：将接种环放在酒精灯的火焰_____（填“上”或“旁”）灼烧，并在酒精灯的火焰_____（填“上”或“旁”）取菌种，对3个培养皿分别接种；

第三步：将接种后的3个培养皿放入37℃恒温箱中培养24h。

请对结果进行预测：

①若 _______________号培养基中细菌存活，说明该细菌质粒上有两种抗性基因；

②若1号培养基中细菌存活，2、3号培养基中没有细菌存活，说明 _________ ；

③ _________________________________________________________ ；

④ _________________________________________________________ 。

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某研究小组欲研究被石油污染过的土壤中细菌的数量，并从中筛选出能分解石油的细菌。下列操作错误的是

A.称取和稀释被污染的土壤时应在火焰旁

B.用以石油为唯一碳源的培养基进行筛选

C.分离菌种时可采用稀释涂布平板法接种

D.对细菌进行计数时宜采用平板划线法接种

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某学者欲研究被石油污染过的土壤中的细菌数并从中筛选出能分解石油的细菌。下列有关操作错误的是(　　)

A. 利用平板划线法对细菌进行计数

B. 利用以石油为唯一碳源的培养基筛选能分解石油的细菌

C. 采用稀释涂布平板法分离菌种

D. 称取土壤和稀释土壤溶液时应在火焰旁操作

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某学者欲研究被石油污染过的土壤中的细菌数并从中筛选出能分解石油的细菌。下列有关操作错误的是(　　)

A. 利用平板划线法对细菌进行计数

B. 利用以石油为唯一碳源的培养基筛选能分解石油的细菌

C. 采用涂布平板法分离菌种

D. 称取土壤和稀释土壤溶液时应在火焰旁操作

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某学者欲研究被石油污染过的土壤中细菌数量，并从中筛选出能分解石油的细菌。下列操作正确的是(　　)。（多选）

A．利用平板划线法对细菌进行计数

B．用以石油为唯一碳源的培养基筛选

C．采用稀释涂布平板法分离菌种

D．称取和稀释土壤时应在火焰旁

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