凝乳酶是奶酪生产中的关键，从小牛胃液中分离得到的凝乳酶以其催化能力强而被广泛应用，研究人员运用基因工程技术，将编码该酶的基因转移到了微生物细胞中。请分析回答：
（1）从小牛体内提取的凝乳酶基因通常需要通过___________技术进行扩增，扩增时一般需要在引物的5′端设计一段___________酶的识别序列，以便构建重组DNA分子，并需要在反应体系中加入___________种引物。
（2）研究者利用4种限制酶切割目的基因和质粒，各限制酶的识别序列和切割位点如下图所示。酶切破坏了 DNA分子中的___________键，每一次切割会产生___________个游离的磷酸基团。酶切后的产物连接时，目的基因上SalⅠ切割产生的末端应与质粒上___________切割产生的末端相连接。连接完成后，该连接点___________（能/不能）被这两种限制酶中的某一种切割。
（3）经研究发现，如果将该凝乳酶的第20位和24位氨基酸变为半胱氨酸，则其催化能力将提高2倍，可通过___________技术对该凝乳酶进行改造。
高二生物非选择题中等难度题
凝乳酶是奶酪生产中的关键，从小牛胃液中分离得到的凝乳酶以其催化能力强而被广泛应用，研究人员运用基因工程技术，将编码该酶的基因转移到了微生物细胞中。请分析回答：
（1）从小牛体内提取的凝乳酶基因通常需要通过___________技术进行扩增，扩增时一般需要在引物的5′端设计一段___________酶的识别序列，以便构建重组DNA分子，并需要在反应体系中加入___________种引物。
（2）研究者利用4种限制酶切割目的基因和质粒，各限制酶的识别序列和切割位点如下图所示。酶切破坏了 DNA分子中的___________键，每一次切割会产生___________个游离的磷酸基团。酶切后的产物连接时，目的基因上SalⅠ切割产生的末端应与质粒上___________切割产生的末端相连接。连接完成后，该连接点___________（能/不能）被这两种限制酶中的某一种切割。
（3）经研究发现，如果将该凝乳酶的第20位和24位氨基酸变为半胱氨酸，则其催化能力将提高2倍，可通过___________技术对该凝乳酶进行改造。
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【生物——选修3:现代生物科技专题】
（1）凝乳酶是奶酪生产中的关键性酶。从牛胃液中分离到的凝乳酶以催化能力强而被广泛应用，研究人员运用基因工程技术，将编码该酶的基因转移到了微生物细胞中。
①科学家已经测出该酶的氨基酸序列，因此可以通过_________方法来获取目的基因。获得目的基因后，常利用_________技术在体外将其大量扩增。
②构建重组DNA分子(如图所示)最好选用___________限制酶，理由是________________。
③工业化生产过程中，最初多采用重组大肠杆菌或芽孢杆菌生产凝乳酶，现多采用重组毛霉或重组的酵母菌来生产，毛霉或酵母菌作为受体细胞的优势是_________________________。
④研究发现，如果将该凝乳酶20位和24位氨基酸改变为半胱氨酸，其催化能力将提高2倍。科学家可以生产上述高效凝乳酶的现代生物工程技术是________________________。
（2）转基因技术和细胞工程在动植物都有广泛应用，但是，胚胎工程只是指对动物的_______所进行的多种显微操作和处理技术。
（3）生态工程是实现循环经济最重要的手段之一，请写出它遵循的基本原理(至少答三项)：________。
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凝乳酶是奶酪生产中的关键性酶．从牛胃液中分离到的凝乳酶以催化能力强而被广泛应用，研究人员运用基因工程技术，将编码该酶的基因转移到了微生物细胞中．
（1）科学家已经测出该酶的氨基酸序列，因此可以通过_________方法来获取目的基因．获得目的基因后，常利用_________技术在体外将其大量扩增。
（2）构建重组DNA分子（如图所示）最好选用__________酶和_____________酶同时切，理由是_________________________________________。
（3）工业化生产过程中，最初多采用重组大肠杆菌或芽孢杆菌生产凝乳酶，现多采用重组毛霉或重组的酵母菌来生产，毛霉或酵母菌作为受体细胞的优势是含有_____和_______（细胞器），可对蛋白质进行加工和修饰。
（4）研究发现，如果将该凝乳酶20位和24位氨基酸改变为半胱氨酸，其催化能力将提高2倍．科学家可以生产上述高效凝乳酶的现代生物工程技术是_____________．
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凝乳酶是奶酪生产中的关键性酶．从牛胃液中分离到的凝乳酶以催化能力强而被广泛应用，研究人员运用基因工程技术，将编码该酶的基因转移到了微生物细胞中．
（1）科学家已经测出该酶的氨基酸序列，因此可以通过_________方法来获取目的基因．获得目的基因后，常利用_________技术在体外将其大量扩增。
（2）构建重组DNA分子（如图所示）最好选用__________酶和_____________酶同时切，理由是_________________________________________。
（3）工业化生产过程中，最初多采用重组大肠杆菌或芽孢杆菌生产凝乳酶，现多采用重组毛霉或重组的酵母菌来生产，毛霉或酵母菌作为受体细胞的优势是含有_____和_______（细胞器），可对蛋白质进行加工和修饰。
（4）研究发现，如果将该凝乳酶20位和24位氨基酸改变为半胱氨酸，其催化能力将提高2倍．科学家可以生产上述高效凝乳酶的现代生物工程技术是_____________．
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抗凝血酶Ⅲ蛋白是一种血浆糖蛋白，临床上主要用于血液性疾病的治疗。凝乳酶是奶酪生产中的关键性酶。下列是生产这两种酶的相关思路，请回答下列问题：
(1)图1为通过培育转基因奶牛获得抗凝血酶Ⅲ蛋白的流程。
①图中过程a指的是利用______法将目的基因导入受精卵，受体细胞不选用体细胞的理由是______。
②在胚胎移植前，需进行____________，目的是确定要培育的个体能产奶。
③可采用________法来鉴定牛奶中是否含有抗凝血酶Ⅲ蛋白。
(2)从牛胃液中分离得到的凝乳酶以其催化能力强而被广泛应用，研究人员运用基因工程技术，将编码该酶的基因转移到了微生物细胞中。
①从牛胃细胞中提取mRNA，再通过________形成cDNA。以此cDNA为模板通过PCR扩增目的基因，有时需要在引物的5′端设计________(填“限制酶”、“DNA连接酶”或“RNA聚合酶”)识别序列，以便构建重组DNA分子。
②为提高重组DNA分子的比例，在构建重组DNA分子(如图2所示)时最好选用______________作限制酶。
③经研究发现，如果将该凝乳酶的第20位和24位氨基酸变为半胱氨酸，则其催化能力将提高2倍。现已知通过蛋白质工程可生产高效凝乳酶，请写出有关制备步骤：___________。
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凝乳酶能催化乳汁凝固，常用于奶酪的生产。某研究小组进行了如下实验：
①取若干支试管，分为A、B、C、D、E、F六组，每组两支试管，其中一支试管加入2mL凝乳酶，另一支加入2mL乳汁。
②将六组试管分别置于不同温度水浴保温5min。
③将每组试管中的凝乳酶和乳汁混合后在原水浴中保温15min，记录凝乳所需时间，实验结果如下表所示。
| 组别 | A | B | C | D | E | F |
| 水浴温度（℃） | 10 | 20 | 30 | 40 | 50 | 60 |
| 凝乳时间（min） | 不凝固 | 7.0 | 4.0 | 1.5 | 4.0 | 不凝固 |
（1）凝乳酶的化学本质是蛋白质，则合成它的原料是__________，它催化乳汁凝固的机理是__________。
（2）本实验的自变量是__________。请为该实验拟一个课题名称：__________。
（3）如果将装置B内混合物升温至40℃，最可能的实验结果是__________。为什么？__________。
（4）依据上述实验结果，若进一步探究凝乳酶活性的最适温度，请完善实验思路：__________________，重复上述实验，则乳汁凝固时间最短时的温度即为最适温度。
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回答有关微生物的问题．
Ⅰ、凝乳酶是奶酪生产中的关键性酶，培育产高酶活力凝乳酶微生物菌种是目前最有前途的发展方向，图1为产高酶活力凝乳酶的枯草芽孢杆菌培育过程．
（1）枯草芽孢杆菌的芽孢是__________。A．休眠体 B．营养繁殖体 C．孢子 D．营养体
（2）图1所示的b过程的目的是为__________，接种用的平板培养基在制备时需注意的是__________。
A．待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板B．倒好的培养基和培养皿要进行高压灭菌处理
C．等到平板培养基冷却凝固后才可以盖上培养皿的皿盖D．待平板冷却凝固约5﹣10min后将平板倒过来放置
Ⅱ、在35℃、40分钟内能凝固1mL10%奶粉所需的酶量为一个酶活力单位（U）．图2表示图1中提取得到的各种凝乳酶活力检测结果。
（3）据图2所示，酶催化能力最强的是__________组，而各组酶催化能力存在差异的根本原因是_________的不定向性。
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凝乳酶能催化乳汁凝固，常用于奶酪的生产。为探究温度对凝乳酶活性的影响，某同学设计了如下实验：
① 取若干试管，分为A、B、C、D、E、F六组，每组两支试管，其中一支试管放入2 mL凝乳酶，另一支放入2 mL乳汁。
②将六组试管分别置于不同温度水浴15 min。
③将每组试管中的凝乳酶和乳汁混合后在原温度下继续水浴，记录凝乳所需时间，结果如下表所示：
| 组别 | A | B | C | D | E | F |
| 水浴温度(℃) | 10 | 20 | 30 | 40 | 50 | 60 |
| 凝乳时间(min) | 不凝 | 7.0 | 4.0 | 1.5 | 4.0 | 不凝 |
请回答问题：
(1)上述实验结果中，凝乳所需要的时间越短，表明酶的活性越__________。
(2)A组中乳汁不凝固的原因是____________________________。F组中乳汁也不凝固，若将其温度冷却至40 ℃，乳汁将__________(填“会”或“不会”)凝固，原因是__________________。
(3)通过以上实验，__________(填“能”或“不能”)得出 “凝乳酶的最适温度是40 ℃”的结论。
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凝乳酶能催化乳汁凝固，常用于奶酪的生产。为探究温度对凝乳酶活性的影响，
某同学设计了如下实验：
① 取若干试管，分为A、B、C、D、E、F六组，每组两支试管，其中一支试管放入2mL凝乳酶，另一支放入2mL乳汁。
②将六组试管分别置于不同温度水浴15min。
③将每组试管中的凝乳酶和乳汁混合后在原温度下继续水浴，记录凝乳所需时间，结果如下表所示。
请回答问题：
（1）上述实验结果中，凝乳所需要的时间越短，表明酶的活性越 。
（2）A组中乳汁不凝固的原因是 。F组中乳汁也不凝固，若将其温度冷却至40℃，乳汁将 （会、不会）凝固，原因是 。
（3）通过以上实验， （能、不能）确定凝乳酶的最适温度是40℃。
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凝乳酶能催化乳汁凝固，常用于奶酪的生产。为探究温度对凝乳酶活性的影响，
某同学设计了如下实验：
① 取若干试管，分为A、B、C、D、E、F六组，每组两支试管，其中一支试管放
入2mL凝乳酶，另一支放入2mL乳汁。
②将六组试管分别置于不同温度水浴15min。
③将每组试管中的凝乳酶和乳汁混合后在原温度下继续水浴，记录凝乳所需时间，结果如下表所示。
| 组别 | A | B | C | D | E | F |
| 水浴温度（℃） | 10 | 20 | 30 | 40 | 50 | 60 |
| 凝乳时间（min） | 不凝 | 7.0 | 4.0 | 1.5 | 4.0 | 不凝 |
请回答问题:
（1）上述实验结果中，凝乳所需要的时间越短，表明酶的活性越________。
（2）A组中乳汁不凝固的原因是________。F组中乳汁也不凝固，若将其温度冷却
至40℃，乳汁将________（会、不会）凝固，原因是________。
（3）本实验能不能说明40℃就是该种酶催化作用的最适温度？________。
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