苦马豆素（SW）因从灰苦马豆中分离出来而得名，被认为是“未来的肿瘤治疗药物”。以下是相关的...

苦马豆素（SW）因从灰苦马豆中分离出来而得名，被认为是“未来的肿瘤治疗药物”。以下是相关的实验研究过程及结果。

①将等量的小鼠肝癌Hepal－6细胞悬液，分别接种于若干个含有等量培养液的培养瓶中；

②将培养瓶放于37 ℃、5% CO2培养箱中培养24 h，静置、去除上清液；

③分别加入等量但含不同浓度SW的培养液，置于37 ℃、5%的CO2培养箱中继续培养；

④分别在24 h、48 h、72 h时吸取培养液，观察结果，得到不同浓度的SW对细胞存活率的影响曲线如图所示。

请回答下列问题。

（1）处于间期的肝癌Hepal－6细胞，其分子水平的主要变化是_________________。

（2）步骤③中需要设置对照组，对照组的处理方法应为___________________________。步骤③中每个实验组设置5个培养瓶同时进行培养，计数后统计平均值，这是为了_______________，使实验结果更准确。

（3）分析图中曲线可知，SW对肝癌Hepal－6细胞作用效果的特点是

①_______________________________________；

②_______________________________________。

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丹参酮是从中药丹参中提取的具有抗肿瘤活性的脂溶性菲醌化合物，其作用机制之一是诱导细胞凋亡。以下是相关的实验研究过程及结果：

实验材料：人肝癌细胞（HepG2），培养液，0.02%二甲亚砜溶液，用0.02%二甲亚砜溶解的0.5 ug/mL、1 ug/mL、1.5 ug/mL的丹参酮溶液，培养瓶等。

①将等量的人肝癌细胞（HepG2）悬液，分别接种于若干含有等量培养液的培养瓶中；将培养瓶放于37℃、5%CO2培养箱中培养24 h，静置、去掉上清液；

②______________，再加入等量的培养液，于37 ℃、5% CO2培养箱中继续培养；

③培养72 h，每24 h用细胞计数仪检测癌细胞数。

（1）请完善上述实验步骤中相关内容。____________________________________

（2）本实验的自变量是________________。

（3）设对照组癌细胞增殖率为100%，用下面公式计算各用药组癌细胞增殖率：增殖率（%）＝[（用药组各时段癌细胞数－用药组开始癌细胞数）/（对照组各时段癌细胞数－对照组开始癌细胞数）]×100。得到以下数据：

表1 丹参酮对HepG2细胞增殖率的影响 （%）

①请将表中前48 h的数据转化为相应给药组细胞增殖率随时间变化的柱形图。

②通过数据和柱形图分析可以得出丹参酮对HepG2细胞的作用效果的特点是：___________。

（4）将培养48 h的培养液离心，去除上清液后经过一系列的处理及分析，得到对照组和给药组48 h细胞周期变化、凋亡率及凋亡蛋白Bax和Bcl－2的表达量如表所示：表2 丹参酮对HepG2细胞周期、凋亡率及凋亡蛋白基因Bax和Bcl－2的表达的影响

据此推测，丹参酮使HepG2细胞周期阻滞于________期。丹参酮可能通过促进HepG2内________的表达来诱导细胞凋亡从而抑制肿瘤的生长。

（5）顺铂（DDP）是一种DNA损伤药物，也是目前临床上多种癌症化疗的首选药物。若要探究丹参酮联合顺铂对HepG2细胞生长的影响，应还需设置_______________________给药组才能得出结论。

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药物M和N都能降低血糖，且低剂量药物M降低血糖的作用最显著，对糖尿病及其并发症有一定治疗作用欲研究药物M和N的上述作用，请根据以下提供的材料与用具，完善实验思路，预测实验结果，并进行分析与讨论。

材料与用具:正常成年鼠120只、STZ（链脲佐菌素）、药物M、药物N、普通饲料、注射器、血糖测定仪等。

（要求与说明:成年鼠禁食12小时，连续两天注射STZ能获得糖尿病鼠模型；药物有效作用的时间为4周左右；实验结果每4周检测一次；实验条件适宜）

（1）完善实验思路:

①将120只正常成年鼠随机均分为5组，编号为甲、乙、丙、丁和戊。

②乙、丙、丁和戊组都以注射STZ诱发的糖尿病成年鼠为糖尿病鼠模型。

③实验分组如下:_________________________________。

④____________________________________________。

⑤对实验数据进行统计分析。

（2）预测实验结果（设计一个坐标，用柱形图表示实验后2次的检测结果）：

（3）分析与讨论：

①对于糖尿病的研究，除直接检测血糖浓度外，有时还可检测尿液中是否存在葡萄糖。根据高中生物教材内容，试列举出两种检测尿液中是否存在葡萄糖的方法名称___________和___________。

②STZ导致肺部出现轻微炎.症。肺部癌细胞凋亡___________（填“会”或“不会”）引起炎症。

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丹参酮是从中药丹参中提取的具有抗肿瘤活性的脂溶性化合物，其作用机制之一是诱导细胞凋亡。以下是相关的实验过程及结果：

实验材料：人肝癌细胞（HepG2），培养液， 0．02% 二甲亚砜溶液，用 0．02% 二甲亚砜溶解的0．5 μg/mL、1 μg/mL、1．5 μg/mL的丹参酮溶液，培养瓶，CO2培养箱等。

实验步骤：　

①将等量的人肝癌细胞（HepG2）悬液，分别接种于若干含有　　　　　　　　 的培养瓶中；将培养瓶放于　　　　　　　　　 培养24 h，静置、去掉　　　　　　 （填“上清液”或“沉淀物”）；

②给药组分别加入适量且等量的用 0．02% 二甲亚砜溶解的0．5 μg/mL、1 μg/mL、1．5 μg/mL的丹参酮溶液，对照组加入　　　　　　　　　　　　　　　 。

③培养 72 h，每 24 h 用细胞计数仪检测癌细胞数。

④　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

（1）请完善上述实验步骤中的相关内容。___________________。

（2）该实验的自变量________________。

（3）设对照组的癌细胞增殖率为100%，经计算得到各给药组的癌细胞增殖率如表：

丹参酮对HepG2细胞增殖率的影响/%

请将表中前48小时的数据转化为相应给药组细胞增殖率随时间变化的柱形图_________。

（4）顺铂（DDP）是一种DNA损伤药物，也是目前临床上多种癌症化疗的首选药物。若要探究丹参酮联合顺铂对HepG2细胞生长的影响，应还需设置___________________给药组才能得出结论。

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肿瘤的生长依赖于新生血管，为研究促性腺激素释放激素(GnRH)类似物和“顺铂”（一种化疗药物)联合作用对血管生成的影响，研究人员用鸡胚进行实验，统计单位面积平均血管数，结果如下表。

请回答问题：

（1）促性腺激素释放激素(RnRH)由_______产生，促进垂体释放_________，调节卵巢的生理活动。

（2）据表分析，GnRH类似物可______血管的生成，GnRH类似物和顺铂联合作用的效果_____顺铂单独作用。

（3）已知血管内皮生长因子(VEGF)诱导血管的新生。研究者推测，RnRH类似物可通过调控癌细胞VEGF基因的表达抑制肿瘤生长。为证明此推测，对卵巢癌细胞分别进行上表中四组处理，检测各组癌细胞产生的________含量。

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蜂毒素是工蜂毒腺分泌的多肽，体外研究发现，蜂毒素对多种癌细胞具有强烈的杀伤作用。其作用机制之一是诱导细胞凋亡。以下是相关的实验研究过程及结果：

实验材料：人肝癌细胞（HepG2），培养液，0．02% 二甲亚砜溶液，用0．02% 二甲亚砜溶解的0．5ug/mL、lug/mL、1．5ug/mL的蜂毒素溶液，培养瓶等。

实验思路：

①将等量的人肝癌细胞（HepG2）悬液，分别接种于若干含有等量培养液的培养瓶中；将培养瓶放于37℃、5%C02培养箱中培养24h,静置、去掉上清液；

②　　　　　　　　 ，再加入等量的培养液，于37℃、5%C02培养箱中继续培养；

③培养72h，每24h用细胞计数仪检测癌细胞数。

（1）请完善上述实验思路中相关内容。

（2）本实验的自变量是　　　　 。实验中，每组细胞培养瓶不止一个，统计后求平均值，目的是　　　　　　　　　 。

（3）设对照组癌细胞增殖率为100%,用下面公式计算各用药组癌细胞增殖率：增殖率（％）=[（用药组各肘段癌细胞数-用药组开始癌细数）/（对照组各时段癌细胞数-对照组开始癌细胞数）]×l00。得到以下数据：

表1蜂毒素对HepG2细胞增殖率的影响

①请将表中前48小时的数据转化为相应给药组细胞增殖率随时间变化的柱形图。

②通过数据和柱形图分析可以得出蜂毒素对HepG2细胞的作用效果的特点是：　　　　　　　　　　　　　　 。

（4）人体内癌细胞凋亡　　　　　　 （会/不会）引起炎症。

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已知有机物W是一种新型治疗癌症的药物，欲探究不同浓度的有机物W对人体急性白细胞增殖的影响。请利用以下材料进行研究。

实验材料：人体急性白细胞悬液、3mmol/L的有机物W、生理盐水、含5-溴尿嘧啶脱氧核苷(BrdU)的培养液、姬姆萨染料、卡氏瓶、显微镜等。

（要求与说明：1．人体急性白细胞的细胞周期正常情况为50小时。BrdU在结构上与胸腺嘧啶脱氧核苷类似，能够代替后者与腺嘌呤配对，掺入到新合成的一条DNA链中，此时染色体经姬姆萨染料染色为深蓝；当DNA的两条脱氧核苷酸链都掺入BrdU时，染色体经姬姆萨染料染色浅蓝。2．分裂指数是观察细胞分裂情况的常见指标，它是指某分裂细胞群中处于有丝分裂M期的细胞数占总细胞数的百分比）

（1）实验思路：

①利用浓度为3mmol/L的有机物W溶液和生理盐水配制出浓度为1mmol/L、2mmol/L的有机物W溶液；

②取卡氏瓶若干，平均分为四组，编号A、B、C、D，分别加入等量且适量的含有BrdU的培养液和人体急性白细胞悬液。

③摇匀各组卡氏瓶并取少量且等量细胞悬液，用姬姆萨染料染色后制片，用显微镜观察，统计_____________________________________________________________。

④________________________________________。

⑤在_______________的条件下培养，对各组每隔___________时间，重复步骤③。

⑥对实验数据进行统计和分析。

（2）请设计一个表格用于记录两个细胞周期的实验结果。

___________________

（3）除以上检测方法外，还可以利用_____________、___________（写出两种仪器）测量细胞的增殖情况。第二次分裂后期，显微镜下能观察到一个细胞中有____________条染色体呈浅蓝色。

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《科学》杂志评出“饿死肿瘤”研究获新进展为2004年十大科技突破之一。临床试验结果显示，用一种抑制肿瘤处血管生长的药物与传统化疗药物结合进行治疗，可延长结肠癌患者的存活期。这种治疗中利用的原理不包括 （    ）

A、抑制癌细胞的复制               B、切断癌细胞营养供应

C、阻断癌细胞的增殖               D、诱导癌细胞突变为正常细胞

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已有研究表明，中心体异常扩增能把非肿瘤细胞转化为肿瘤细胞。镉（Cd）作为已知的I类致癌物，科研人员欲探究镉诱发肿瘤的机理是否与中心体扩增有关，开展了相关实验。请根据以下实验材料，完善实验思路，分析实验结果。

实验材料：结肠癌细胞、细胞培养液、10μmol/L的CdCl2 、20μmol/L的CdCl2、生理盐水、抗氧化剂NAC、显微镜等。请回答：

（说明：中心体数目可以通过免疫荧光实验进行检测观察，其具体实验方法与过程不做要求；扩增率的计算方法不做要求）

（1）实验思路:

①取卡氏瓶若干个，平均分成甲乙丙三组，每组设置若干个，分组如下：____________

②将各组置于37℃的5%CO2培养箱中处理培养48h，收集细胞经染色后，在荧光显微镜下观察每个细胞的中心体数目，重复试验3次；

③对所得的数据进行统计分析，计算得出中心体扩增率。

（2）试验结果表明，用CdCl2处理细胞后，细胞中心体扩增率明显升高，请以坐标柱状图形表示试验结果。_____

（3）分析讨论：

①研究已显示重金属镉能引发活性氧的产生而诱发DNA氧化损伤。若想进一步探究重金属镉引起中心体扩增的原因与DNA氧化损伤途径有无关联，可设置第四组实验，即在实验组的基础上同时加入________________ ，若经处理后，中心体扩增率___________，则能进一步说明重金属镉是通过DNA氧化损伤来诱导中心体扩增。

②在动物细胞正常的分裂过程中，中心体在________________（填 “分裂间期”或“分裂期”）复制；中心体扩增的机制比较复杂，试分析可能的原因有____________ 等。

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欲研究药物乙对海拉细胞增殖的抑制作用，请根据以下提供的材料与用具，以海拉细胞的细胞数变化为测定指标，完善实验分组设计和实验思路，预测实验结果并进行分析与讨论。

材料与用具：海拉细胞悬液，药物甲溶液(对细胞增殖有影响)，药物乙溶液，培养液、培养瓶，血细胞计数板，显微镜等。

(要求与说明：细胞计数的具体操作过程不做要求，不考虑加入溶液对体积的影响，实验条件适宜)

回答下列问题：

(1)实验分组设计：

A组：海拉细胞悬液＋培养液

B组：海拉细胞悬液＋培养液＋药物甲溶液

C组：海拉细胞悬液＋培养液＋药物甲溶液，培养一段时间后，加入_______________。

(2)完善实验思路：___________________

(3)预测实验结果(以坐标曲线图形表示实验结果，并标出加入药物的时间)：

_______________

(4)分析与讨论：

药物甲的作用是________________。

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