回答下列有关生物技术与基因表达的问题
如图所示为利用现代生物技术获得能表达某蛋白酶工程菌的过程及工程菌表达目的基因的模式图。选用的质粒A上有I、II、III、IV四种限制酶切割位点。
(1)据图推断过程①获取目的基因时,应选用的限制酶是______________。过程②是利用___________酶将目的基因与运载体连接形成重组质粒。过程③为重组质粒导入受体细胞,如受体细胞为小鼠受精卵,则选用的常规方法是_______________。
(2)如同时用酶I和酶IV切割图中质粒A,产生1.8kb和8.2kb的两种片段(1kb=1000对碱基对),如用四种酶同时切割质粒A,则产生0.6kb和8.2kb两种片段,那么用同时用酶II和酶IV切割质粒A,则产生的片段有____________。
(3)过程⑤表示______________过程,其需要的原料是_______________。
高二生物非选择题中等难度题
回答下列有关生物技术与基因表达的问题
如图所示为利用现代生物技术获得能表达某蛋白酶工程菌的过程及工程菌表达目的基因的模式图。选用的质粒A上有I、II、III、IV四种限制酶切割位点。
(1)据图推断过程①获取目的基因时,应选用的限制酶是______________。过程②是利用___________酶将目的基因与运载体连接形成重组质粒。过程③为重组质粒导入受体细胞,如受体细胞为小鼠受精卵,则选用的常规方法是_______________。
(2)如同时用酶I和酶IV切割图中质粒A,产生1.8kb和8.2kb的两种片段(1kb=1000对碱基对),如用四种酶同时切割质粒A,则产生0.6kb和8.2kb两种片段,那么用同时用酶II和酶IV切割质粒A,则产生的片段有____________。
(3)过程⑤表示______________过程,其需要的原料是_______________。
高二生物非选择题中等难度题查看答案及解析
回答下列有关生物技术与基因表达的问题
如图所示为利用现代生物技术获得能表达某蛋白酶工程菌的过程及工程菌表达目的基因的模式图。选用的质粒A上有I、II、III、IV四种限制酶切割位点。
(1)据图推断过程①获取目的基因时,应选用的限制酶是______________。过程②是利用___________酶将目的基因与运载体连接形成重组质粒。过程③为重组质粒导入受体细胞,如受体细胞为小鼠受精卵,则选用的常规方法是_______________。
(2)如同时用酶I和酶IV切割图中质粒A,产生1.8kb和8.2kb的两种片段(1kb=1000对碱基对),如用四种酶同时切割质粒A,则产生0.6kb和8.2kb两种片段,那么用同时用酶II和酶IV切割质粒A,则产生的片段有____________。
(3)过程⑤表示______________过程,其需要的原料是_______________。
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【生物——现代生物科技专题】
下面是利用奶山羊乳腺生物反应器制备药用白蛋白的流程图,请回答下列问题:
(1)若要大量获得目的基因,可使用 扩增白蛋白基因,通过③构建的重组表达载体包括目的基因、启动子、终止子和 、复制原点等部分。该重组表达载体导入的受精卵性染色体组成应为 。
(2)如果需要通过①采集到更多的卵子,常用的激素是 ;通过②采集的精子需 后才能进行受精作用。
⑶在体外培养受精卵时,除了给予一定量的O2以维持细胞呼吸外,还需要提供 (气体)以维持 。
(4)为使⑤能成功进行,需要对奶山羊C进行 处理,使之与供体的生理状况保持相同。
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请回答下列有关胚胎工程和基因工程等方面的问题:
(1)利用基因工程可以获得转基因羊。若要使获得的转基因羊分泌的乳汁中含有人抗凝血酶III蛋白,构建基因表达载体时必须把目的基因与_________________基因的______________结合,使用该启动子的原因是 _____________________________ 。
(2)应用PCR扩增目的基因时,需要在基因组数据库中査询目的基因的________________序列,以便合成引物。PCR过程第一轮循环的模板是________________。
(3)目前常用的措施是将该基因表达载体导入羊的________________细胞,导入方法是_____________________。
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下表是几种限制酶识别序列及其切割位点,下图甲是某种基因表达载体及限制酶切割位点示意图,图乙是利用图甲所示的基因表达载体获得的含目的基因的表达载体。请回答下列有关问题:
(1)基因工程操作过程中,能作为载体的除质粒外,还包括_____________。质粒作为基因工程的载体,应具备的基本条件有________________________________________________(答两点)。
(2)某DNA片段经BamHⅠ酶切割得到的目的基因,能与图甲基因表达载体被__________(填“EcoRⅠ”或“Sau3AⅠ”)酶切割后的产物连接,原因是____________________________________________________。
(3)构建基因表达载体,需要限制酶和_____________等工具酶。图乙所示的表达载体能否在宿主细胞中表达目的基因产物,并说明原因。____________________________________________________。
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根据资料,回答基因工程和胚胎工程的有关问题
利用现代生物技术可以获得人们需要的生物新品种或新产品,在获得生物新品种或新产品过程中,常常要多种工程技术相结合,请根据下面的资料和图解,回答下列问题:
材料一:Bt基因即是苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)基因,因其表达产物Bt毒蛋白杀虫效果好、安全、高效等优点而成为应用最为广泛的转杀虫基因。下图为培育转Bt基因苗的本操作过程。
1.Bt基因可从构建的Bt基因组文库中获取,也可以从其_____________文库中获取,从后者获取的基因不含启动子。
2.在构建基因表达载体的过程中,农杆菌中的___________可作运载体。将目的基因导入受体细胞时,受体细胞应选______________(填“正常叶”或“损伤叶”)的细胞。
材料二:蜘蛛丝(丝蛋白)被称为“生物钢”,有着超强的抗张强度,可制成防弹背心、降落伞绳等;她蛛丝还可被制成人造韧带和人造肌腱。科学家研究出集中生产蜘蛛丝的方法一一培育转基因蜘蛛羊。
3.过程②是将重组质粒导入山羊受体细胞,采用最多的也是最有效的导入方法是______________________________。
4.为选育出能泌乳的雌羊,移植前须从囊胚的____________________部位取样,做DNA分析鉴定性别。像这种可从乳汁中获取所需蛋白的生物称为_________________反应器。
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人们试图利用基因工程的方法,用乙种生物生产甲种生物的一种蛋白质。生产流程是:甲生物的蛋白质→mRNA目的基因构建基因表达载体导入乙细胞获得甲生物的蛋白质,下列说法正确的是
A. ①过程需要的酶是逆转录酶,原料是A、U、G、C
B. ②的目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗产给下一代
C. 如果受体细胞是细菌,可以选用枯草杆菌、炭疽杆菌等
D. ④过程中用的原料不含有A、U、G、C
高二生物单选题中等难度题查看答案及解析
以下是有关现代生物技术的两个问题,请回答:
Ⅰ(5分):下列三图分别表示基因的结构示意图和利用基因工程培育抗虫棉过程示意图。请据图回答下列有关问题:
(1)图C中的目的基因是从图A和图B中的哪一个图所表示的基因提取的?___________,图C中科学家在进行[①]操作时,要用_______分别切割运载体和目的基因,运载体的 黏性末端与目的基因DNA片段的黏性末端通过_______________而结合。
(2)[III]是导入目的基因的受体细胞,经培养、筛选获得一株有抗虫特性的转基因植株。经分析,该植株含有一个携带目的基因的DNA片段,因此可以把它看作是杂合子。理论上,在该转基因植株自交产生F1代中,仍具有抗虫特性的植株占总数的_______。
(3)将上述抗虫棉植株的后代种子种植下去后,往往有很多植株不再具有抗虫特性,原因是_____________________________。
Ⅱ(10分):现有甲、乙两种可能有一定毒性的化学物质,实验室研究人员计划通过动物细胞培养的方法来鉴定它们是否有毒性并比较二者毒性的强弱。请你以一个研究人员的身份参与此项研究,完成下列有关问题。
实验原理:_______________________________________________。(2分)根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数(以下称Q值),可判断该化学物质的毒性。
材料用具:活的小白鼠胚胎、胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、适宜浓度的化学物质甲溶液、适宜浓度的化学物质乙溶液、蒸馏水、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜、小白鼠正常有丝分裂各时期的高倍显微照片。
实验步骤:
(1)制备细胞悬浮液。
把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎,转入锥形瓶中,加入胰蛋白酶液处理,使胚胎组织离散成单个细胞,再加入动物细胞培养液,制成细胞悬浮液。
(2)进行细胞培养。
①取A、B、C3个洁净的培养瓶,分别放入___________________________________;
②向A、B两个培养瓶中分别加入等量的甲、乙溶液,C瓶中加入等量的蒸馏水,摇匀;
③把3个培养瓶放在适宜温度的恒温箱中培养。
(3)制作临时装片。
①当细胞增殖到大约8代左右时,同时从恒温箱中取出3个培养瓶,用________
处理,加入动物细胞固定液,迅速杀死细胞并固定细胞分裂相;
②静置一段时间后,分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液,滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央,滴加__________________进行染色,3—5min后,盖上盖玻片。
(4)镜检和统计。
把临时装片放在显微镜下,先用低倍镜后用高倍镜观察,为清晰观察染色体的形态,最好寻找处于______________期的细胞,并与小白鼠正常细胞有丝分裂同时期高倍显微照片进行对比,统计并计算该期变异的细胞占该期细胞总数的百分数(Q值)。
结果分析与结论:
(1)经研究人员实验得知,A、B、C三个培养瓶的Q值依次为:QA=1.3%, QB=12.5%, QC=0.1%,
由此可知该实验的结论是__________________________________________。(2分)⑵在实验中,C培养瓶起______________作用,C瓶的Q值说明____________________。
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人的淋巴细胞可以产生某种具有临床价值的蛋白质(Y),目前可以利用现代生物技术生产Y。回答下列问题:
(1)若要获得Y的基因,可以从基因文库中获得,也可以利用PCR技术扩增目的基因。基因文库包括________和_______。目前在PCR反应中使用Taq酶而不使用大肠杆菌DNA聚合酶的主要原因是_______________。
(2)若产生蛋白质(Y)的淋巴细胞为B细胞,要大量制备相关单克隆抗体,将该B淋巴细胞与小鼠的___________细胞融合, 再经过筛选、检测,最终可获得所需的杂交瘤细胞,该细胞具有的特点是_________。通过该方法得到的单克隆抗体具有__________等特性。
(3)天然的Y通常需要在低温条件下保存。假设将Y的第6位氨基酸甲改变为氨基酸乙可提高其热稳定性,若要根据蛋白质工程的原理对Y进行改造以提高其热稳定性,具体思路是______________________。
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(每空1分,共12分) 下图为利用生物技术获得生物新品种的过程,据图回答:
(1)在基因工程中,A表示目的基因,如果直接从苏云金杆菌中获得抗虫基因,①过程使用的酶是________;B表示构建的基因表达载体,其组成除了目的基因外,还必须有启动子、终止子以及________等,其中启动子是________酶识别和结合的部位。
(2)B→C为转基因绵羊的培育过程,其中②过程常用的方法是________,使用的绵羊受体细胞为________,④用到的生物技术主要有动物细胞培养和________。若转基因绵羊可通过分泌的乳汁来生产人类蛋白质,在基因表达载体中,目的基因的首端必须含有________,这种转基因动物称被为________。
(3)B→D为转基因抗虫棉的培育过程,其中③过程常用的方法是________,若使用的棉花受体细胞为体细胞,⑤表示的生物技术是________。要确定目的基因(抗虫基因)导入受体细胞后,是否能稳定遗传并表达,需进行检测和鉴定工作,请写出检测目的基因是否转录出了mRNA,方法是________,以________作为探针。
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