回答下列有关土壤中微生物分离的问题：（1）为了筛选可分解尿素的细菌，在配制培养基时，应选择...

回答下列有关土壤中微生物分离的问题：

（1）为了筛选可分解尿素的细菌，在配制培养基时，应选择_______________（填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”）作为氮源，不选择其他两组的原因是______________。

（2）用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有________（答出两点即可）。

（3）为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表）：

注：“+”表示有，“—”表示无。

据表判断，培养基甲___（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是______________；培养基乙_________（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是______________。

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下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验”的叙述，正确的是（　　 ）

A.只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素

B.筛选分解尿素的细菌时，应以尿素作为培养基中唯一的营养物质

C.统计菌落数应注意选择菌落数在 30-100 的平板进行计数

D.以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变蓝，则表明筛选到了分解尿素的细菌

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硝基苯酚是工业污水中重要污染物，某同学欲从污水处理厂污泥中分离分解硝基苯酚的细菌。请回答下列有关问题：

（1）为了筛选污泥中可分解硝基苯酚的细菌，在配制培养基时应选择________（硝基苯酚，硝基苯酚+牛肉膏，硝基苯酚+葡萄糖）作为碳源，不采用其他两组的原因是________________________________。

（2）纯化菌株时划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。分析造成第二划线区域的第一条线无菌落的可能原因是________（答一点即可）。

（3）进行梯度稀释时的一般操作是________________；常用稀释涂布平板法进行活菌计数，其原理是________________，但统计的菌落数往往少于稀释液中的活菌数，原因是________________。

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硝基苯酚是工业污水中重要污染物，某同学欲从污水处理厂污泥中分离分解硝基苯酚的细菌。请回答下列有关问题：

（1）为了筛选污泥中可分解硝基苯酚的细菌，在配制培养基时应选择________ (硝基苯酚，硝基苯酚+牛肉膏，硝基苯酚十葡萄糖）作为唯一碳源，检测培养基灭菌是否合格的方法是_______________________________ 。

（2）纯化菌株时，通常使用的划线工具是________ 。常用________法进行活菌计数，1g样品被稀释106倍后，每个严格灭菌的培养皿中用了0.5ml稀释液，所得的菌落数分别为112、132、141、130、140，则每克样品中的菌落数为______个，但统计的菌落数往往_______（填“多于”或“少于”)稀释液中的活菌数，原因是_________________________。

（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力________。筛选出的优良菌种可以用________法长期保存。

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土壤是“微生物的天然培养基”，下面是有关土壤中分解尿素的细菌分离和计数的实验过程，请根据下图回答相关问题：

(1)能分解尿素的细菌代谢类型为＿＿，应从富含有机质的土壤表层取土样。

(2)为分离出土壤中分解尿素的细菌，应该用　　　 的培养基进行分离，并加入＿＿＿指示剂进行鉴别。

(3)若取土样5g，应加入＿＿ml的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液。因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，配制成如图所示的不同浓度的土壤溶液。取样稀释前，一定要＿＿＿以减少误差。将103-107倍的稀释液分别吸取0.1mL加入到固体培养基上，用＿＿＿＿将菌液铺平。这种接种方法称为＿＿＿＿。

(4)将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24h～48h，观察并统计具有＿＿＿＿(现象)的菌落数，结果如下表，其中＿＿＿＿倍的稀释比较合适。

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请回答微生物的培养和应用的有关问题

尿素是一种重要的农业氮肥，但是，尿素并不能直接被农作物吸收。只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨之后，才能被植物利用。某研究人员尝试从土壤中对分解尿素的微生物进行分离与计数。

1.分解尿素的微生物中含有的酶是______________；为筛选出能分解尿素的微生物，配制培养基时应以______________作为唯一氮源，因此该培养基属于______________培养基。

2.该培养基在接种前应该用______________法灭菌。

3.对初步筛选得到的分解尿素的微生物进行纯化并计数，常用来统计样品中活菌数目的方法是____________________________。在接种前，随机取若干菌后的空白平板先行培养一段时间，这样做的目的是__________________________________________。

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人和哺乳动物的尿液中含有尿素，大量尿素的排放会对环境造成污染，已知土壤中有含有脲酶，可降解尿素，下图是某同学从土壤中筛选降解尿素的细菌的实验过程，请回答有关问题：

配制土壤溶液→系列稀释→涂布平板与培养→菌落计数

（1）为筛选能分泌脲酶的细菌，一般选用　　　　　　 的培养基（从营养物质方面答）。从功能上讲，该培养基属于　　　　　　 培养基。

（2）　　　　　　　 法是将样液进行一系列的梯度稀释，然后接种培养细菌并统计菌落数目，在稀释土壤溶液的过程中每一步都要在　　　　　　　　 旁进行操作。稀释处理的目的是　　　　　　　 。

（3）若培养基中存在还有脲酶的细菌，则其菌落周围会出现红色分解圈，这是由于尿素被分解产生　　　　 ，

遇到培养基中所加酚红指示剂产生了颜色变化。

（4）实验中使用过的培养基在实验完成后应如何处理？　　　　　　　　 ；

为什么？　　　　　　　　　　　　　　 。

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生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，为从土壤中微生物筛选到能分解尿素的细菌。培养基成分如下表所示，实验步骤如图1所示。回答下列问题

（1）分解尿素的细菌能分泌________酶，能将尿素分解成__________。

（2）培养基中为“目的菌”生长提供氮源和碳源的物质分别来自________和_________。为了满足图示锥形瓶中目的菌对氧气的需求，在培养时应采用的操作方法是_______________________________。

（3）图中将细菌转到固体培养基上时，应采用________法接种以获得单个菌落。初步筛选出来的菌种还需要用生化的方法作进一步的鉴定，鉴定方法是检测初步筛选目的菌种培养基的pH，若pH_______（降低/不变/升高），说明该菌种能够分解尿素。

（4）A同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。有同学认为造成A同学实验结果的原因是培养基被杂菌污染。为了证实该说法，则进一步实验的操作思路是________________。

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[选修1一生物技术实践]

人和哺乳动物的尿液中含有尿素，大量尿素的排放会对环境造成污染。已知土壤中有些细菌含有脲酶，可降解尿素。下图是某同学从土壤中筛选降解尿素的细菌的实验流程。请回答有关问题：

配制土壤溶液→系列稀释→涂布平板与培养→菌落计数

（1）为筛选能分泌脲酶的细菌，一般选用__________的培养基（从营养物质方面答）。从功能上讲，该培养基属于__________培养基。

（2）__________法是将样液进行一系列的梯度稀释，然后接种培养细菌并统计菌落数目。在稀释土壤溶液的过程中每一步都要在__________旁进行操作。稀释处理的目的是___________________。

（3）若培养基中存在含有脲酶的细菌，则其菌落周围会出现红色分解圈，这是由于尿素被分解产生____，遇到培养基中所加酚红指示剂产生了颜色变化。

（4）实验中使用过的培养基在实验完成后应如何处理？__________；为什么？____________________。

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以下关于微生物的分离、培养和鉴定实验，说法错误的是（　　）

A.鉴定纤维素分解菌用刚果红染色法

B.鉴定分解尿素的细菌需在培养基中加入酚红指示剂

C.计数土壤中的尿素分解菌应选择菌落数在300以上的平板

D.分离土壤中的纤维素分解菌要到富含纤维素的环境中去寻找

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