噬菌体展示技术是将编码蛋白质的基因导入噬菌体的基因中，使外源蛋白和噬菌体蛋白融合表达，融合...

噬菌体展示技术是将编码蛋白质的基因导入噬菌体的基因中，使外源蛋白和噬菌体蛋白融合表达，融合蛋白质随子代噬菌体的重新组装而展示在噬菌体表面的一项技术，具体过程如图所示。下列相关叙述正确的是

A.可用动物细胞代替大肠杄菌培养噬菌体

B.外源基因表达所需要的模板和原料来自宿主细胞

C.子代噬菌体表面的融合蛋白具有特定的生物功能

D.若用35S标记噬菌体外壳，则可在子代噬菌体表面融合蛋白上检测到35S

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噬菌体展示技术是将编码蛋白质的基因导入噬菌体的基因中，使外源蛋白和噬菌体蛋白融合表达，融合蛋白质随子代噬菌体的重新组装而展示在噬菌体表面的一项技术，具体过程如图所示。下列相关叙述正确的是

A.可用动物细胞代替大肠杄菌培养噬菌体

B.外源基因表达所需要的模板和原料来自宿主细胞

C.子代噬菌体表面的融合蛋白具有特定的生物功能

D.若用35S标记噬菌体外壳，则可在子代噬菌体表面融合蛋白上检测到35S

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噬菌体展示技术是将编码蛋白质的基因导入噬菌体的基因中，使外源蛋白和噬菌体蛋白融合表达，融合蛋白质随子代噬菌体的重新组装而展示在噬菌体表面的一项技术，具体过程如图所示。下列相关叙述正确的是

A.可用动物细胞代替大肠杄菌培养噬菌体

B.外源基因表达所需要的模板和原料来自宿主细胞

C.子代噬菌体表面的融合蛋白具有特定的生物功能

D.若用35S标记噬菌体外壳，则可在子代噬菌体表面融合蛋白上检测到35S

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噬菌体展示技术是将外源蛋白或多肽的编码基因插入到噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置，使外源基因随噬菌体外壳蛋白基因的表达而表达，同时，外源蛋白或多肽随噬菌体的重新组装而展示到噬菌体表面的生物技术。利用该技术可以获得单克隆抗体（最新技术）。请问答下列问题：

（1）传统单克隆抗体的获得需先对小鼠进行_______处理，整个过程中涉及的现代科学技术有________（答出两项即可）。

（2）限制酶是基因工程常用的三大工具之一，此类酶主要是从原核生物中分离纯化出来的，请推测它在原核生物中的作用是：___________________________。

（3）为了得到大量的外源蛋白基因，可使用PCR技术进行体外扩增，合成引物________（填“需要”或“不需要”）知道整个外源DNA序列。

（4）为了扩增重组噬菌体的数量，你觉得应该如何操作？________________________。

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噬菌体展示技术是将外源蛋白基因插入噬菌体外壳蛋白结构基因，使外源蛋白基因随外壳蛋白结构基因的表达而表达，同时，外源蛋白随噬菌体的重新组装而展示到噬菌体表面的生物技术，过程如下图所示。请回答相关问题：

（1）将外源蛋白基因进行PCR扩增时，第一次加热的作用是___________，加热的作用类似于细胞内___________（填物质名称）的功能。

（2）过程①表示___________，其实质为______________________________。

（3）若用32P标记重组噬菌体的DNA，用上述过程证明DNA是遗传物质，该设计是否严谨？___________，原因是______________________________。

（4）科学工作者将人体某种抗体基因插入噬菌体外壳蛋白结构基因进行上述展示，结果没有得到抗体或得到的抗体不具有活性，原因可能是______________________________。

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噬菌体展示技术是将外源蛋白或多肽的DNA序列插入噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置，使外源基因随噬菌体外壳蛋白的表达而表达，同时，外源蛋白或多肽随噬菌体的重新组装而展示到噬菌体表面的生物技术。利用该技术可以获得单克隆抗体(最新技术）。请问答下列问题：

（1）传统单克隆抗体的获得需先对小鼠进行_______处理，整个过程中涉及的现代科学技术有________。

（2）外源DNA片段含_________个游离的磷酸。为了得到大量的外源DNA，可使用PCR技术进行体外扩增，合成引物________(填“需要”或“不需耍”)知道整个外源DNA序列，合成的引物间不能进行碱基互补配对的原因是________________。

（3）噬菌体展示技术获得的抗体还可用于定量检测抗原，如双抗体夹心法，具体原理如下图所示：

分析上图可知，固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体可与同一抗原表面的______结合。该检测方法中，酶标抗体的作用是__________，可通过测定产物量来推测抗原量。

（4）试说说噬菌体展示技术可能的局限性:_______________________。

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核酸疫苗是将编码某种抗原蛋白的外源基因（DNA或RNA片段）导入动物体细胞内，通过宿主细胞的表达系统合成抗原蛋白，诱导宿主产生对该抗原蛋白的免疫应答，以达到预防或治疗相应疾病的一类新型疫苗。研究表明核酸疫苗不仅具有良好的免疫原性与安全性，且由于核酸更易于修饰与改造，较以往蛋白疫苗具有更大的灵活性和更广阔的应用前景。请回答：

（1）研发DNA疫苗时，构建含有病原体抗原基因表达载体的过程中需要用到的工具酶有_____________。

（2）图中所用的载体是_______________，构建基因表达载体的目的是________________，基因表达载体中，驱动病原体抗原基因转录的结构为________________。将该DNA疫苗导入受体细胞的方法是肌肉注射法或__________________。

（3）mRNA疫苗可以由计算机设计、制造并通过高速机器大批量生产。目前用于制造疫苗的RNA有两种，非复制型mRNA和自我扩增型mRNA，从图中可以看出自我扩增型mRNA的优点是可在细胞内_____________。mRNA常被包裹在脂质体颗粒中注射到相关人员的手臂肌肉，脂质体颗粒的作用是____________________。

（4）病毒核酸检测试剂盒通常以病毒独特的基因序列为检测靶标。PCR扩增时每一个循环分为_______________三步，使靶标DNA序列呈指数增加。每一个扩增出来的DNA序列都与预先加入的一段荧光标记_________________结合，产生荧光信号，扩增出来的靶标DNA序列越多，累积的荧光信号就越强。在没有病毒的样本中，因为没有靶标DNA序列扩增，所以就检测不到荧光信号增强。

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基因疫苗指的是DNA疫苗，是将编码外源性抗原的基因插入到含真核表达系统的质粒上，然后将质粒直接导入人或动物体内，让其在宿主细胞中表达抗原蛋白，诱导机体产生免疫应答。回答下列问题：

（1）要获得编码抗原的基因，首先要提取出病原体的DNA或RNA，并将RNA_________，要大量获得表达特异抗原的基因，可采用________方法。

（2）将抗原基因插入质粒的过程，即构建基因表达载体的过程，通常一个基因表达载体的组成，除了抗原基因（目的基因）外，还有___________、___________、___________。

（3）一般将重组质粒利用_____________的方法送入受体的肌肉细胞，进入细胞核并表达抗原蛋白。

（4）一个质粒载体可插入多个抗原基因组成多价疫苗，该多价疫苗可达到_______的目的。

（5）基因疫苗是在基因治疗技术的基础上发展而来的。基因治疗是把_____________导入病人体内，使该基因表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的。

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基因疫苗即DNA疫苗，是将编码外源性抗原的基因插入到含真核表达系统的质粒上，然后将质粒直接导入人或动物体内，让其在宿主细胞中表达抗原蛋白，诱导机体通过产生免疫应答来预防疾病。回答下列有关问题：

(1)要获得编码抗原的基因，首先要提取出病原体的DNA或RNA，并将RNA___________，要大量获得表达特异抗原的基因，可采用___________方法。

(2)将抗原基因插入质粒的过程，即构建基因表达载体的过程。通常一个基因表达载体的组成，除了抗原基因（目的基因）外，还有___________________。

(3)一般将重组质粒利用_______________的方法送入动物细胞并表达抗原蛋白；要想检测导入的抗原基因是否表达,在分子水平上可用_______法进行检测。

(4)基因疫苗不仅能在宿主体内较长时间存在，还可以诱导产生__________(填“体液免疫”“细胞免疫”或“体液免疫和细胞免疫”）。

(5)基因疫苗是在基因治疗技术的基础上发展而来的。基因治疗是把_____________导入病人体内，使该基因表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的。

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基因疫苗是指编码外源性抗原的基因导入人和动物体内，让其在宿主细胞中表达抗原蛋白，诱导机体产生免疫应答. 某科研所计划利用基因疫苗，通过基因工程和胚胎工程技术培育具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛. 请回答下列问题：

(1)基因表达载体的构建是基因工程的核心，一个完整的基因表达载体至少包括目的基因，_____________，_____________，标记基因等.

(2)动物基因工程常用的受体细胞是_____________和_____________，因为该细胞的全能性高，一般用_____________法将目的基因导入受体细胞.

(3)欲检测高产奶牛体内是否出现口蹄疫病毒的抗原蛋白，在分子水平上检测的方法及结果是从基因牛中提取_____________，用__________________________杂交，如果出现杂交带，表明奶牛中出现了抗原蛋白，如果不出现杂交带，表明奶牛中未出现抗原蛋白.

(4)胚胎工程最后一道工序是胚胎移植，其实质是__________________________________________.

(5)为提高胚胎的利用率，可以采用胚胎分割技术，应该选用什么样的胚胎进行分割？

_____________________________________________________________________________________.

(6)现已经通过基因工程和胚胎工程技术培育出一头具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛，可以采用_____________技术获得具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛.请简要叙述过程.

_____________________________________________________________________________________.

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