我国拥有自主知识产权的Bt毒蛋白抗虫棉,某水稻研究中心尝试运用农杆菌转导法培育Bt毒蛋白抗虫水稻,其过程如图所示。回答下列问题:
(1)一般情况下单子叶植物不能利用农杆菌转导法,原因是______________。科学家在添加乙酰丁香酮后,可利用农杆菌将目的基因导入水稻的愈伤组织中,水稻幼胚愈伤组织在基因工程中是作为___________。
(2)获取Bt毒蛋白基因后可利用_________技术扩增Bt毒蛋白基因。表达载体除了Bt毒蛋白基因、潮霉素磷酸转移酶基因(可抗潮霉素)外,还必须有__________。
(3)要将表达载体转入农杆菌内,需用________处理农杆菌,使之成为感受态细胞。要获取幼胚愈伤组织,在培养基中除一定的营养物质以外,还需要___________。
(4)为了检测水稻的DNA上是否插入了Bt毒蛋白基因,需要使用DNA探针做标记进行DNA分子杂交,该DNA探针由_________________组成。
(5)若要验证该转基因水稻是否具有抗虫性,需进行__________________________。
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我国拥有自主知识产权的Bt毒蛋白抗虫棉,某水稻研究中心尝试运用农杆菌转导法培育Bt毒蛋白抗虫水稻,其过程如图所示。回答下列问题:
(1)一般情况下单子叶植物不能利用农杆菌转导法,原因是______________。科学家在添加乙酰丁香酮后,可利用农杆菌将目的基因导入水稻的愈伤组织中,水稻幼胚愈伤组织在基因工程中是作为___________。
(2)获取Bt毒蛋白基因后可利用_________技术扩增Bt毒蛋白基因。表达载体除了Bt毒蛋白基因、潮霉素磷酸转移酶基因(可抗潮霉素)外,还必须有__________。
(3)要将表达载体转入农杆菌内,需用________处理农杆菌,使之成为感受态细胞。要获取幼胚愈伤组织,在培养基中除一定的营养物质以外,还需要___________。
(4)为了检测水稻的DNA上是否插入了Bt毒蛋白基因,需要使用DNA探针做标记进行DNA分子杂交,该DNA探针由_________________组成。
(5)若要验证该转基因水稻是否具有抗虫性,需进行__________________________。
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我国拥有自主知识产权的抗虫棉,是将苏云金芽孢杆菌的Bt毒蛋白基因导入到棉花的叶肉细胞中培育而成。回答下列问题:
(1)在该基因工程中,Bt毒蛋白基因属于 ,离体棉花叶肉细胞属于 。Bt毒蛋白基因可从基因组文库中获取,也可从cDNA文库中获取,含有基因中启动子的文库是 文库。
(2)获取的Bt毒蛋白基因需要与载体结合构建基因表达载体。在基因工程中使用的载体有质粒,入噬菌体的衍生物、 等,其中质粒的化学成分是 。
(3)科学家最初做抗虫棉试验时,虽已经检测出棉花植株中含有抗虫基因,但让棉虫食用棉花叶片时,棉铃虫并没有被杀死,这说明Bt毒蛋白基因 。为此,科学家对棉植株中的Bt毒蛋白基因进行了修饰,结果食用了棉叶的棉铃虫中毒死亡了,从变异类型分析,这种对Bt毒蛋白基因的修饰属于 。
(4)转基因植物存在一定的安全性问题,为避免Bt毒蛋白基因通过花粉传播进入其它植物,一般将Bt毒蛋白基因转入棉花细狍的 (填“细咆核”或“叶绿体”)。
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我国科学家通过精心设计,利用Bt毒蛋白基因培育出了拥有自主知识产权的转基因抗虫棉。回答下列问题:
(1)利用PCR技术扩增Bt毒蛋白基因的原理是__________。PCR扩增时若退火温度过高,会破坏_________的碱基配对。构建重组质粒时用到的DNA连接酶的作用是将断开的两个DNA片段连接起来,形成_________键。
(2)Bt毒蛋白基因进入棉花细胞内,并在细胞内维持稳定和表达的过程,称为_________在基因表达过程中,识别启动子的是_________酶。
(3)可用于转基因植物的抗虫基因中,_________(填“蛋白酶”或“蛋白酶抑制剂”)基因的产物可使昆虫消化不良,或刺激昆虫分泌过量的消化酶,引起厌食反应。
(4)目的基因导入受体细胞后,需对其遗传特性进行检测和鉴定,可通过_________以确定抗虫特性及抗性程度。传统棉花育种往往受制于有限的种质资源,而科学家引入转基因技术的优势在于_________。
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(7分)2009年10月,我国自主研发的转基因抗虫水稻“华恢1号”获得农业部颁发的安全证书。下图表示该抗虫水稻主要培育流程,据图回答:
(1)④过程应用的主要生物技术是。
(2)杀虫基因(crylA)是人们根据几种Bt毒蛋白的分子结构,设计并人工合成的,这属于________工程技术范畴。
(3)组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造。下图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图(示部分基因及部分限制性内切酶作用位点),据图分析:
①人工改造时,要使抗虫基因表达,还应插入____________。
②人工改造时用限制酶Ⅱ处理,其目的是:第一,去除质粒上的________(基因),保证T-DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长;第二,使质粒带有单一限制酶作用位点,有利于___________。第三,使质粒大小合适,可以提高转化效率等。
③若用限制酶Ⅰ分别切割改造过的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子,并构成重组Ti质粒。分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞,观察到的细胞生长的现象是________。
(4)若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的粘性末端为,则该酶识别的核苷酸序列是________。
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2009年10月,我国自主研发的转基因抗虫水稻“华恢1号”获得农业部颁发的安全证书。下图表示该抗虫水稻主要培育流程,据图回答:
(1)④过程应用的主要生物技术是________。
(2)杀虫基因(crylA)是人们根据几种Bt毒蛋白的分子结构,设计并人工合成的,这属于________工程技术范畴。
(3)组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造。下图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图(示部分基因及部分限制性内切酶作用位点),据图分析:
①人工改造时,要使抗虫基因表达,还应插入____________。
②人工改造时用限制酶Ⅱ处理,其目的是:第一,去除质粒上的(基因),保证T-DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长;第二,使质粒带有单一限制酶作用位点,有利于___________________。第三,使质粒大小合适,可以提高转化效率等。
③若用限制酶Ⅰ分别切割改造过的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子,并构成重组Ti质粒。分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞,观察到的细胞生长的现象是________。
(4)若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的粘性末端为,则该酶识别的核苷酸序列是________。
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(10分,除注明外,其余每空2分)2009年10月,我国自主研发的转基因抗虫水稻“华恢1号”获得农业部颁发的安全证书。下图表示该抗虫水稻主要培育流程,据图回答:
(1)④过程应用的主要生物技术是________。
(2)组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造。下图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图(示部分基因及部分限制性内切酶作用位点),据图分析:
①人工改造时,要使抗虫基因表达,还应插入____________。(1分)
②人工改造时用限制酶Ⅱ处理,其目的是:第一,去除质粒上的________(1分)基因,保证T-DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长;第二,使质粒带有单一限制酶作用位点,有利于________。第三,使质粒大小合适,可以提高转化效率等。
③若用限制酶Ⅰ分别切割改造过的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子,并构成重组Ti质粒。分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞,观察到的细胞生长的现象是________。
(3)若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的粘性末端为,则该酶识别的核苷酸序列是________。
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苏云金杆菌是一种对昆虫有毒害作用的细菌,其杀虫活性物质主要是一类伴孢晶体蛋白。伴孢晶体蛋白经昆虫肠液消化成毒性肽,并因此导致昆虫死亡。自从培育转基因植物抗虫棉成功后,研究人员又试图将抗虫基因导入水稻细胞中,从而培养出转基因抗虫水稻。研究人员从相关生物体内提取出的部分物质或结构如下图所示:图1表示含有目的基因(抗虫基因)的DWA片段长度(bp为碱基对)和部分碱基序列,图2表示作为运载体的一种质粒的结构和部分碱基序列。现有Msp I,BamH I,Mbo I ,Sma I 4种限制性核酸内切酶,它们所识别的碱基序列和酶切位点(用“↓”表示)分别为C ↓CGG;G ↓ GATCC;n↓ GATC;CCC ↓ GGG。请回答下列问题:
(1)若用限制酶Sma I完全切割图1中所示DNA片段,则其产物有______种,长度分别为______。
(2)若将图2中质粒和目的基因通过同种限制酶处理后进行连接,形成重组质粒,那么应选用的限制酶是______。
(3 )在导入重组质粒后,为了筛选出含重组质粒的水稻细胞,需配置相应培养基,其中添加的碳源是______,目的是提供营养和______。另外,培养基中除了含有必要营养物质、琼脂和激素外,一般还需要添加______(抗生素A/抗生素B),该培养基从用途上看属于______培养基。
(4)在培养过程中,除必要的温度、光照和氧气等外界条件外,成功的另一个关键是操作过程必须保证无菌,镊子等器械及培养基都可使用的灭菌方法是______。
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苏云金杆菌是一种对昆虫有毒害作用的细菌,其杀虫活性物质主要是一类伴孢晶体蛋白。伴孢晶体蛋白经昆虫肠液消化成毒性肽,并因此导致昆虫死亡。自从培育转基因植物抗虫棉成功后,研究者又将抗虫基因成功地导入水稻细胞中。在培育转基因植物的研究中,抗除草剂基因(har)常作为标记基因。这样培育出来的转基因水稻既能抗虫又能抗除草剂,便于田间管理。下图为获得转基因水稻的技术流程,根据下图回答:
(1) 水稻细胞的基因结构与苏云金杆菌有所不同,其主要特点是_______________ 。
(2) 获得该抗虫基因,通常采用_______方法。
(3) 研究者在进行构建重组质粒时,用到的工具酶______ 有_______、_______。
(4)培养愈伤组织的培养基中,除了含有必要营养物质、琼脂和激素外,还必须加入_______。该培养基从用途上春属于______________。
(5)种植上述转基因植物,为了避免通过花粉传递给近缘物种造成“基因污染”,所以把目的基因导入叶绿体DNA中,原因是______________
(6)水稻体内有不同类型的细胞,控制葡萄糖分解成丙酮酸过程中,所需要酶的基因最有可能是右图中的_______号基因。比较1与6或4与5,差别较大的两类细胞是_______判断依据是______________
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我国科学家运用基因工程技术,将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞并成功表达,培育出了抗虫棉。下列叙述中,错误的是( )
A.重组DNA分子中增加一个碱基对,不一定会导致毒蛋白的毒性丧失
B.棉花细胞导入了抗虫基因后,在无菌、适宜的温度和光照条件下,置于只加入了必需矿质元素离子和激素的固体培养基上培养,可以培养成植株
C.抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递至近缘物种,从而造成基因污染
D.种植抗虫棉时,须同时种植普通的不抗虫棉,主要目的是减缓棉铃虫抗性基因频率增加的速度
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我国科学家运用基因工程技术,将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞并成功表达,培育出了抗虫棉。下列叙述中错误的是
A.重组DNA分子中增加一个碱基对,不一定会导致毒蛋白的毒性丧失
B.棉花细胞导入了抗虫基因后,在无菌、适宜的温度和光照条件下,置于只加入了必需矿质元素离子和激素的固体培养基上培养,可以培养成植株
C.抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递至近缘物种,从而造成基因污染
D.种植抗虫棉时,须同时种植普通的不抗虫棉,主要目的是减缓棉铃虫抗性基因频率增加的速度
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