如图表示转基因抗冻番茄的培育过程，含抗冻基因的DNA片段和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点，Ⅰ、Ⅱ表示相关结构或细胞。回答下列问题：
(1)图中构建重组质粒时，不能使用AluⅠ切割，原因是__________;为了避免目的基因和载体经酶切后产生的末端发生任意连接，应该选用____对含鱼抗冻蛋白质基因的DNA片段和质粒进行切割。
(2)M抗生素抗性基因在Ⅰ中又称为___基因。①过程所用的DNA连接酶作用的化学键是___。
(3)常采用农杆菌转化法将抗冻蛋白基因导入番茄细胞。将含有抗冻蛋白基因的重组质粒转入农杆菌时，常用Ca2+处理农杆菌，其目的是______。用农杆菌感染番茄叶肉细胞时，应优先选用番茄受伤的叶片与含重组质粒的农杆菌共同培养，选用受伤叶片的理由是__________。
(4)图中得到的胚状体经过人工薄膜包装可以制造出人工种子。与天然种子相比，人工种子具有的优点有______________(答出两点)。若从个体水平检测获得的转基因番茄植株有无抗严寒能力，可以采用的方法是____。
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如图表示转基因抗冻番茄的培育过程，含抗冻基因的DNA片段和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点，Ⅰ、Ⅱ表示相关结构或细胞。回答下列问题：
(1)图中构建重组质粒时，不能使用AluⅠ切割，原因是__________;为了避免目的基因和载体经酶切后产生的末端发生任意连接，应该选用____对含鱼抗冻蛋白质基因的DNA片段和质粒进行切割。
(2)M抗生素抗性基因在Ⅰ中又称为___基因。①过程所用的DNA连接酶作用的化学键是___。
(3)常采用农杆菌转化法将抗冻蛋白基因导入番茄细胞。将含有抗冻蛋白基因的重组质粒转入农杆菌时，常用Ca2+处理农杆菌，其目的是______。用农杆菌感染番茄叶肉细胞时，应优先选用番茄受伤的叶片与含重组质粒的农杆菌共同培养，选用受伤叶片的理由是__________。
(4)图中得到的胚状体经过人工薄膜包装可以制造出人工种子。与天然种子相比，人工种子具有的优点有______________(答出两点)。若从个体水平检测获得的转基因番茄植株有无抗严寒能力，可以采用的方法是____。
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科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄，使番茄细胞的耐寒能力大大提高，可以在相对寒冷的环境中生长。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ等四种限制酶切割位点，下图是转基因抗冻番茄培育过程的示意图(ampr为抗氨苄青霉素基因)，其中①～④是转基因抗冻番茄培育过程中的相关步骤，Ⅰ、Ⅱ表示相关结构或细胞。请据图回答问题。
(1)在构建基因表达载体时，可用一种或者多种限制酶进行切割。为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接，在此实例中，应该选用___________, __________限制酶，分别对_______________, ______________进行切割。
(2)培养基中的氨苄青霉素会抑制番茄愈伤组织细胞的生长，要利用该培养基筛选已导入鱼抗冻蛋白基因的番茄细胞，应使基因表达载体中含有________________________，作为标记基因。
(3)研究人员通常采用农杆菌转化法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内。通常采用______________________技术，在分子水平检测目的基因是否翻译形成了相应的蛋白质。
(4)利用组织培养技术将导入鱼抗冻蛋白基因的番茄组织细胞培育成植株。图中③、④依次表示组织培养过程中番茄组织细胞的____________, ______________过程。
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图甲为构建重组质粒过程中的三种备选质粒，其中Ap为氨苄青霉素抗性基因，Tc为四环素抗性基因。图乙为培育转AFPs基因(抗冻基因)番茄的示意图，外源DNA和质粒上均标出了酶切位点及相关抗性基因，请回答下列问题。
(1)图甲中通常选用质粒C构建重组质粒，而不选用质粒A或质粒B的原因分别是______________________。
(2)据图乙分析，若需使用插入灭活法筛选并鉴定重组质粒，应优先选用限制酶________切割目的基因和质粒。
(3)从cDNA文库中获得的目的基因________(填“含有”或“不含有”)启动子和终止子。
(4)在构建基因表达载体过程中常把两个启动子串联在一起形成双启动子，加在目的基因上游。双启动子的作用可能是________。
(5)为使改造后的AFPs基因能够表达，人工设计质粒D并对它的多个酶切位点进行研究。若用Hind Ⅲ酶或Kpn Ⅰ酶单独切割质粒D，均获得一条长链，若用HindⅢ酶和EcoRⅠ酶同时切割，则获得2个500bp和1个2666片段，若用KpnⅠ酶和EcoRⅠ酶同时切割，则获得2个250bp和1个3166 bp片段。若以HindⅢ酶切割位点为计算起点，则KpnⅠ酶切割位点与Hind Ⅲ酶切割位点最短长度为________bp。
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图甲为构建重组质粒过程中的三种备选质粒，其中Ap为氨苄青霉素抗性基因，Tc为四环素抗性基因。图乙为培育转AFPs基因（抗冻基因）番茄的示意图，外源DNA和质粒上均标出了酶切位点及相关抗性基因，请回答下列问题。
（1）图甲中通常选用质粒C构建重组质粒，而不选用质粒A或质粒B,其中不用质粒A原因是____________________________________。
（2）据图乙分析，若需使用插入灭活法筛选并鉴定重组质粒，应优先选用限制酶_____切割目的基因和质粒。
（3）从cDNA文库中获得的目的基因______（填“含有”或“不含有”）启动子和终止子。
（4）在构建基因表达载体过程中常把两个启动子串联在一起形成双启动子，加在目的基因上游。双启动子作用是________________________。
（5）图乙农杆菌中的质粒应含有______，其作用是携带目的基因进入番茄细胞并整合到番茄细胞的染色体DNA。从分子水平检测AFPs基因是否成功表达的方法是_____________。若要获得抗冻能力更强的抗冻番茄，可以对AFPs基因进行改造，最终得到相应的蛋白质，该过程需用到______工程。
（6）为使改造后的AFPs基因能够表达，人工设计质粒D并对它的多个酶切位点进行研究。若用HindⅢ酶或KpnⅠ酶单独切割质粒D，均获得一条长链，若用HindⅢ酶和EcoRⅠ酶同时切割，则获得2个500bp和1个2666bp片段，若用KpnⅠ酶和EcoRⅠ酶同时切割，则获得2个250bp和1个3166bp片段。若以HindⅢ酶切割位点为计算起点，则KpnⅠ酶切割位点与HindⅢ酶切割位点最短长度为_______，EcoRⅠ酶的两个切割位点与HindⅢ切割位点的最短距离为_________。
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科学家从某细菌中提取抗盐基因，转入烟草并培育成转基因抗盐烟草。如图是转基因抗盐烟草的培育过程，含目的基因的DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。请分析回答下面的问题。
(1)①过程获得的抗盐基因可用PCR技术进行扩增，该技术须用________酶，所需的原料是________。
(2)已知几种限制酶识别序列及其切割位点(如下表)：
| 限制酶 | BamHⅠ | Hind Ⅲ | EcoR Ⅰ | Sma Ⅰ |
| 识别序列及 切割位点 |
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用图中的质粒和目的基因构建重组质粒，不能使用Sma Ⅰ酶切割，原因是
__________________________________________________________________
_________________________________________________________________。
图中①②过程为防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，应选用________酶对外源DNA、质粒进行切割。
(3)图中⑤、⑥依次表示组织培养过程中抗盐烟草细胞的________、________过程。
(4)为确定转基因抗盐烟草是否培育成功，既要用放射性同位素标记的________作探针进行分子杂交检测，又要在个体水平上鉴定，后者具体过程是___________________________________________________。
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请回答下列有关基因工程的问题。下表是基因工程中几种限制酶识别序列及其切割位点。图是转基因香蕉的培育过程，含目的基因的外源DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。
（1）从转基因香蕉培育图中反映了质粒作为运载体的特点是_______________答出其中两点即可），基因工程中还可以用_____________作为运载体。
（2）图中的质粒和目的基因构建重组质粒，不能使用SmaI酶切割，原因是_____________。
（3）下图是用___________ (限制）酶进行切割得到的目的基因。可以防止含目的基因的外源DNA片段切割后自身环化。
（4）人体细胞内含有抑制癌症发生的某基因，生物技术可对此类基因的变化进行检测。该基因含有800对碱基对(bp)，用BamHⅠ切割得到的400bp，200bp，200bp,．用EcoRⅠ再次切割得到100bp,300bp,150bp，50bp,200bp．而患者体内获取的这段基因，用BamHⅠ切割得到的区段变为400bp，400bp ，用EcoRⅠ再次切割得到100bp,300bp,150bp，250bp．在正常人体内BamHⅠ和EcoRⅠ识别序列分别有 _______个和_______个，患者体内发生了 ________________。
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科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高，可以在相对寒冷的环境中生长．质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ等四种限制性核酸内切酶切割位点，如图是转基因抗冻番茄培育过程的示意图（ampr为抗氨苄青霉素基因），其中①∽④是转基因抗冻番茄培育过程中的相关步骤，Ⅰ、Ⅱ表示相关结构或细胞．请据图作答：
（1）在构建重组DNA时，可用一种或多种限制性核酸内切酶进行切割，为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接，在此实验中应该选用限制性核酸内切酶 ______ 分别对 ______ 、 ______ 进行切割，切割后产生的DNA片段分别为 ______ 、 ______ 种。
（2）培养基中的氨苄青霉素会抑制番茄愈伤组织细胞的生长，要利用该培养基筛选已导入鱼的抗冻蛋白基因的番茄细胞，应使I重组DNA中含有 ______ 作为标记基因。
（3）研究人员通常采用 ______ 法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内。
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科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高，可以在相对寒冷的环境中生长。质粒上有PstI、SmaI、HindIII、AIuI等四种限制性核酸内切酶切割位点，下图是转基因抗冻番茄培育过程的示意图（ampt为抗氨苄青霉素基因），其中①∽④是转基因抗冻番茄培育过程中的相关步骤，I、II表示相关结构或细胞。请据图作答：
（1）在构建重组DNA时，可用一种或多种限制性核酸内切酶进行切割，为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接，在此实验中应该选用限制性核酸内切酶______________分别对鱼抗冻蛋白基因和质粒进行切割，切割后产生的DNA片段分别为__________、_________种。
（2）基因工程中核心步骤是_________（填序号）,该步骤的目的是_________________________。为了使目的基因正常表达，其首端必须有启动子，它是___________识别和结合的部位。若限制酶切出了平末端，要选择___________进行连接。（填“E·coliDNA连接酶”或“T4DNA连接酶”）
（3）图中将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞的方法称为____________________。它是利用运载体Ti质粒中含有___________，可以将目的基因整合到宿主细胞的染色体上。
（4）检测番茄植株细胞中鱼抗冻蛋白基因是否成功表达，从分子水平常采用的方法是________。
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（10分）科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高，可以在相对寒冷的环境中生长。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ等四种限制酶切割位点，下图是转基因抗冻番茄培育过程的示意图（ampr为抗氨苄青霉素基因），其中①～④是转基因抗冻番茄培育过程中的相关步骤，Ⅰ、Ⅱ表示相关结构或细胞。请据图作答：
（1）在构建基因表达载体时，可用一种或者多种限制酶进行切割。为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接，在此实例中，应该选用限制酶___________和限制酶___________分别对___________（2分）和质粒进行切割。
（2）培养基中的氨苄青霉素会抑制番茄愈伤组织细胞的生长，要利用该培养基筛选已导入含鱼的抗冻蛋白基因的番茄细胞，应使基因表达载体Ⅰ中含有______作为标记基因。
（3）研究人员通常采用___________法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内。在分子水平检测目的基因是否翻译形成了相应的蛋白质通常采用___________（2分）技术。
（4）利用组织培养技术将导入含鱼的抗冻蛋白基因的番茄组织细胞培育成植株。图中③、④依次表示组织培养过程中番茄组织细胞的___________和___________过程。
高二生物综合题简单题查看答案及解析
科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄,使番茄的耐寒能力大大提高,可以在相对寒冷的环境中生长。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ四种限制酶切割位点,下图是转基因抗冻番茄培育过程的示意图(ampr为氨苄青霉素抗性基因),其中①~④是转基因抗冻番茄培育过程中的相关步骤,Ⅰ、Ⅱ表示相关结构或细胞。请据图回答下列问题。
在构建基因表达载体时,可用一种或者多种限制酶进行切割。为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接,在此实例中,应该选用限制酶____________和限制
酶_____分别对__________ 和_________进行切割,切割后产生的DNA片段分别为_____和____种。
培养基中的氨苄青霉素会抑制番茄愈伤组织细胞的生长,要利用该培养基筛选已导入含鱼的抗冻蛋白基因的番茄细胞,应使基因表达载体Ⅰ中含有_________作为标记基因。
(3)研究人员通常采用__________法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内。通常采
用__________技术,在分子水平检测目的基因是否翻译形成了相应的蛋白质。
(4)利用组织培养技术将导入含鱼的抗冻蛋白基因的番茄组织细胞培育成植株。图中③④依次表示组织培养过程中番茄组织细胞的________和____________过程。
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