某植物蛋白酶抑制剂Ⅱ基因是重要的抗虫基因，该基因转录的mRNA下游序列已知，但其上游序列未知。现利用PCR等技术扩增该基因，具体原理如下图所示，其中①〜③表示有关过程，Ⅰ〜Ⅲ表示有关物质。请回答下列问题：
（1）过程①反应体系中，需要加入__________种引物，还需加入__________酶，生成杂合链物质Ⅰ。
（2）利用DNA末段转移酶催化过程②，使cDNA单链左侧末端增加十多个腺嘌呤脱氧核苷酸序列（AAA(A)n），其目的是_________________，进而利于过程③扩增获得目的基因序列Ⅲ，过程③反应体系需要添加的新引物序列是____________________。
（3）与物质Ⅲ相比，物质Ⅰ化学组成不同的是____________________。与过程③相比，过程①中碱某配对方式的不同之处是__________。
（4）在物质Ⅲ的两端通常还需要增加__________序列，以便与相应的载体重组，再利用__________处理大肠杆菌等，以利于将重组质粒导入细胞，构建cDNA文库。
高二生物综合题困难题
某植物蛋白酶抑制剂Ⅱ基因是重要的抗虫基因，该基因转录的mRNA下游序列已知，但其上游序列未知。现利用PCR等技术扩增该基因，具体原理如下图所示，其中①〜③表示有关过程，Ⅰ〜Ⅲ表示有关物质。请回答下列问题：
（1）过程①反应体系中，需要加入__________种引物，还需加入__________酶，生成杂合链物质Ⅰ。
（2）利用DNA末段转移酶催化过程②，使cDNA单链左侧末端增加十多个腺嘌呤脱氧核苷酸序列（AAA(A)n），其目的是_________________，进而利于过程③扩增获得目的基因序列Ⅲ，过程③反应体系需要添加的新引物序列是____________________。
（3）与物质Ⅲ相比，物质Ⅰ化学组成不同的是____________________。与过程③相比，过程①中碱某配对方式的不同之处是__________。
（4）在物质Ⅲ的两端通常还需要增加__________序列，以便与相应的载体重组，再利用__________处理大肠杆菌等，以利于将重组质粒导入细胞，构建cDNA文库。
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某植物蛋白酶抑制剂Ⅱ基因是重要的抗虫基因，该基因转录的mRNA下游序列已知，但其上游序列未知。现利用PCR等技术扩增该基因，具体原理如下图所示，其中①〜③表示有关过程，Ⅰ〜Ⅲ表示有关物质。请回答下列问题：
（1）过程①反应体系中，需要加入_________ 种引物，还需加入_________ 酶，生成杂合链物质Ⅰ。
（2）利用DNA末段转移酶催化过程②，使cDNA单链左侧末端增加十多个腺嘌呤脱氧核苷酸序列（AAA(A)n），其目的是_________________，进而利于过程③扩增获得目的基因序列Ⅲ，过程③反应体系需要添加的新引物序列是____________________ 。该过程需_________酶。
（3）与物质Ⅲ相比，物质Ⅰ化学组成不同的是____________________。
（4）在物质Ⅲ的两端通常还需要增加______________ 序列，以便与相应的载体重组，再利用 ________ 处理大肠杆菌等，以利于将重组质粒导入细胞，构建cDNA文库。
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某植物蛋白酶抑制剂Ⅱ基因是重要的抗虫基因，该基因转录的mRNA下游序列已知，但其上游序列未知。现利用PCR等技术扩增该基因，具体原理如下图所示，其中①〜③表示有关过程，Ⅰ〜Ⅲ表示有关物质。请回答下列问题：
（1）过程①反应体系中，需要加入_________ 种引物，还需加入_________ 酶，生成杂合链物质Ⅰ。
（2）利用DNA末段转移酶催化过程②，使cDNA单链左侧末端增加十多个腺嘌呤脱氧核苷酸序列（AAA(A)n），其目的是_________________，进而利于过程③扩增获得目的基因序列Ⅲ，过程③反应体系需要添加的新引物序列是____________________ 。该过程需_________酶。
（3）与物质Ⅲ相比，物质Ⅰ化学组成不同的是____________________。
（4）在物质Ⅲ的两端通常还需要增加______________ 序列，以便与相应的载体重组，再利用 ________ 处理大肠杆菌等，以利于将重组质粒导入细胞，构建cDNA文库。
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下列属于获取目的基因的方法是（ ）
①利用mRNA逆转录形成 ②从基因组文库中提取 ③从受体细胞中提取
④利用PCR技术扩增 ⑤利用DNA转录 ⑥人工合成
A. ①②③⑤ B. ①②⑤⑥ C. ①②③④ D. ①②④⑥
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下列属于获取目的基因的方法是（ ）
①利用mRNA逆转录形成
②从基因组文库中提取
③从受体细胞中提取
④利用PCR技术扩增
⑤利用DNA转录
⑥人工合成
A. ①②③⑤ B. ①②⑤⑥ C. ①②③④ D. ①②④⑥
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下列属于获取目的基因的方法是（ ）
①利用mRNA逆转录形成 ②从基因组文库中提取 ③从受体细胞中提取
④利用PCR技术扩增 ⑤利用DNA转录 ⑥人工合成
A．①②③⑤ B．①②⑤⑥ C．①②③④ D．①②④⑥
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下列关于目的基因的获取的叙述，正确的是
A. 其有调控作用的DNA片段不能是目的基因
B. 通过人工合成法合成未知序列的目的基因
C. 从基因文库中只能获取原核生物的基因
D. 利用PCR技术扩增目的基因时需要引物协肋
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在下列过程中需要模板链的是( )
① DNA分子的复制 ②反转录法合成目的基因
③通过化学方法人工合成DNA ④ DNA转录成mRNA
⑤利用PCR技术扩增目的基因 ⑥从基因文库中获取目的基因
A. ①②④⑤ B. ①②④⑤⑥
C. ①②③④⑤ D. ①②③④⑤⑥
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下列关于目的基因的获取的叙述，正确的是
A.其有调控作用的DNA片段不能是目的基因
B.通过人工合成法合成未知序列的目的基因
C.从基因文库中只能获取原核生物的基因
D.利用PCR技术扩增目的基因时需要引物协助
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利用基因工程技术将细菌中已知序列的高赖氨酸蛋白结构基因（pLRP47）转入植物细胞获得高赖氨酸植物新品种，如高赖氨酸莴苣。
（1）从细菌中提取 mRNA，在逆转录酶的作用下形成_____，然后在 DNA聚合酶的作用下得到基因 pLRP47，并利用______进行扩增，用_________酶把经限制性核酸内切酶切割的目的基因和农杆菌Ti质粒进行连接，获得___________。
（2）取摇床中经_____的农杆菌培养液离心并用____________________________________处理以增加细胞壁的通透性。对转化后的农杆菌进行培养使其恢复到_______________状态再使其增殖。
（3）用含重组质粒的农杆菌侵染离体的莴苣细胞经____________过程形成的愈伤组织，重组质粒进入莴苣细胞后，利用____________将 pLRP47 基因整合到染色体DNA中，再用含__________________________的培养基继续培养获得转基因莴苣。
（4）由于转基因生物存在安全性的争议，为了满足人类食物的需求，需发展农业。我国广大农村地区推广的农作物秸秆的“过腹还田”实现了物质的___________________和多途径利用；我们还可利用动物的不同习性，设计多种__________________技术。
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