医学研究发现,人体肝细胞中产生的抗凝血酶Ⅲ在抗凝血、防血栓方面具有重要作用。研究人员通过培育山羊乳腺生物反应器大量生产抗凝血酶Ⅲ。请回答下列问题:
(1)应从人的肝细胞中提取并分离mRNA,逆转录成单链DNA。根据已知的抗凝血酶Ⅲ基因的碱基序列设计特异性________,经PCR和电泳,可得到大量抗凝血酶Ⅲ基因,此过程所用原料为__________。
(2)重组后的人抗凝血酶Ⅲ基因表达载体由山羊β-酪蛋白基因启动子、抗凝血酶Ⅲ基因、标记基因和终止子组成,其中__________决定了人抗凝血酶Ⅲ基因只能在山羊乳腺细胞中特异性表达。
(3)山羊的ES细胞来自早期胚胎干细胞。在饲养层细胞上培养时,ES细胞具有________的特性。将重组人抗凝血酶Ⅲ基因表达载体包埋在由磷脂双分子层构成的脂质体内并转染ES细胞时,目的基因表达载体进入ES细胞的方式为__________。
(4)对山羊进行同期发情和超数排卵处理,得到代孕母羊和多个卵母细胞,当卵母细胞培养至_______________时,可去核并移入上述ES细胞的细胞核,完成核移植。为选择雌性胚胎,可在囊胚时取___________细胞做DNA分析用以鉴定性别。检测羊奶中是否含有抗凝血酶Ⅲ的方法是_________。
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医学研究发现,人体肝细胞中产生的抗凝血酶Ⅲ在抗凝血、防血栓方面具有重要作用。研究人员通过培育山羊乳腺生物反应器大量生产抗凝血酶Ⅲ。请回答下列问题:
(1)应从人的肝细胞中提取并分离mRNA,逆转录成单链DNA。根据已知的抗凝血酶Ⅲ基因的碱基序列设计特异性________,经PCR和电泳,可得到大量抗凝血酶Ⅲ基因,此过程所用原料为__________。
(2)重组后的人抗凝血酶Ⅲ基因表达载体由山羊β-酪蛋白基因启动子、抗凝血酶Ⅲ基因、标记基因和终止子组成,其中__________决定了人抗凝血酶Ⅲ基因只能在山羊乳腺细胞中特异性表达。
(3)山羊的ES细胞来自早期胚胎干细胞。在饲养层细胞上培养时,ES细胞具有________的特性。将重组人抗凝血酶Ⅲ基因表达载体包埋在由磷脂双分子层构成的脂质体内并转染ES细胞时,目的基因表达载体进入ES细胞的方式为__________。
(4)对山羊进行同期发情和超数排卵处理,得到代孕母羊和多个卵母细胞,当卵母细胞培养至_______________时,可去核并移入上述ES细胞的细胞核,完成核移植。为选择雌性胚胎,可在囊胚时取___________细胞做DNA分析用以鉴定性别。检测羊奶中是否含有抗凝血酶Ⅲ的方法是_________。
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[生物——选修3:现代生物科技专题] 人抗凝血酶Ⅲ由人体肝细胞产生,具有抗凝血、防血栓的作用。研究人员通过培育山羊乳腺生物反应器大量生产人抗凝血酶Ⅲ。请回答下列问题:
(1)获取人抗凝血酶Ⅲ基因常用方法有两种,一种是从人的_______中获取该基因mRNA,逆转录成cDNA。另一种是PCR,根据人抗凝血酶Ⅲ基因上游及下游的碱基序列,设计2种特异性引物,从染色体DNA上获取并扩增人抗凝血酶Ⅲ基因。在PCR过程中,两个引物是_________的结合位点,也是子链延伸的起点,dNTP(dATP、dCTP、dGTP、dTTP)在此过程中的作用是提供______________。
(2)重组人抗凝血酶Ⅲ基因表达载体由山羊β–酪蛋白基因启动子、人抗凝血酶Ⅲ基因、标记基因和终止子组成,其中__________决定了人抗凝血酶Ⅲ基因只能在山羊乳腺细胞中特异性表达。
(3)山羊的ES细胞来自早期胚胎干细胞。在饲养层细胞上培养时,ES细胞具有__________________的特性。将重组人抗凝血酶Ⅲ基因表达载体包埋在由磷脂双分子层构成的脂质体内并转染ES细胞时,该表达载体进入ES细胞的方式为__________。
(4)对山羊进行同期发情和超数排卵处理,得到代孕母羊和多个卵母细胞,当卵母细胞培养至_________时,可去核并移入上述ES细胞的细胞核,完成核移植。为选择雌性胚胎,可在囊胚时取滋养层细胞做________分析用以鉴定性别。对于羊奶中是否含有人抗凝血酶Ⅲ,可用抗原–抗体杂交方法检测。
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人抗凝血酶Ⅲ由人体肝细胞产生,具有抗凝血、防血栓的作用。研究入员通过培育山羊乳腺生物反应器可以大量生产人抗凝血酶Ⅲ。回答下列问题:
(1)获取人抗凝血酶Ⅲ基因时,可以从人的________中获取该基因的mRNA,再逆转录成cDNA。目的基因可以通过PCR扩增,在PCR过程中,两个引物是___________的结合位点,也是子链延伸的起点,dNTP在此过程中的作用是______________。
(2)人抗凝血酶Ⅲ基因表达载体由人抗凝血酶Ⅲ基因、山羊β-酪蛋白基因启动子、________等组成,其中__________决定了人抗凝血酶Ⅲ基因只能在山羊乳腺细胞中特异性表达。
(3)导入基因表达载体的山羊ES细胞可在饲养层细胞上培养,此时ES细胞具有_______的特性。将山羊的卵母细胞培养至_________时,可去核并移入上述ES细胞的细胞核,完成核移植。对于羊奶中是否含有人抗凝血酶Ⅲ,可用_____________方法检测。
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干扰素是一种重要的免疫活性物质,具有抗病毒、调节免疫等功效。研究人员利用基因工程通过培育山羊乳腺生物反应器大量生产干扰素。请回答下列问题:
(1)基因工程获取的人干扰素基因一般来自cDNA文库,cDNA中______________(填“有”或没有”)启动子。获取的目的基因可通过______________大量扩增,扩增需要的条件有_______________。(至少答出3项)
(2)重组人干扰素基因表达载体由山羊酪蛋白基因启动子,人干扰素基因,标记基因和终止等组成,其中______________决定了人干扰素基因只能在山羊乳腺细胞中特异性表达,将该重组表达载体导入受体细胞一般采用____________________________。
(3)一般需要将重组人干扰素基因表达载体导入______________(填“雄性”或“雌性”)胚胎细胞中。在转基因羊发育成熟时,为了检测羊奶中是否有人干扰素,可用______________方法。
(4)如果我们采用蛋白质工程来合成人干扰素,可以通过______________,对现有蛋白质进改造,或制造新的蛋白质,以满足人类生产和生活的需要。
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科研人员利用胚胎干细胞培育转基因羊,以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子IX医用蛋白,其技术路线如图,下列说法不正确的是
A. 过程①取供体囊胚的内细胞团培养胚胎干细胞,原理是细胞增殖
B. 过程②利用的人凝血因子K基因可以从人的基因组文库中获取
C. 过程③中通过选择培养基,可筛选出含有目的基因的胚胎干细胞
D. 凝血因子IX只在乳腺细胞中表达,原因是其他细胞不含有该基因
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青岛“崂山奶山羊乳腺生物反应器的研制”项目生产的药用蛋白具有表达效率高、成本低、安全性高、易于分离纯化的优点,可产生乙肝表面抗原及抗凝血酶Ⅲ等医药产品,造福人类。据图回答下列问题:
(1)在基因工程中,A表示___________,如果直接从苏云金芽孢杆菌中获得抗虫基因,①过程使用的酶区别于其他酶的特点是_________________________________________。
(2)在研究过程中,研究人员首先从相关基因组中获取了目的基因,并采用________对目的基因进行扩增,然后将目的基因与质粒等载体组合形成了重组载体。在重组载体的构建过程中需要的工具酶有______________________________。
(3)将目的基因导入玉米(玉米是单子叶植物)受体细胞的过程中,在③过程中一般采用___________,在②过程中一般采用________。
(4)由于转基因表达产物存在于山羊的乳汁中,检测其乳汁中是否出现药用蛋白,在分子水平上的检测方法及结果是什么?__________________________________________。
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科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊,以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子IX医用蛋白,其技术路线如图所示:
(1)研究人员在过程①中,利用PCR技术扩增人凝血因子IX基因时,除了酶、引物、模板以外,还需要加入____________作为合成DNA的原料;PCR过程中需要不断调整反应体系的温度,一般情况下,至少需要______个不同的反应温度。
(2)通过步骤②获得的A,除了人凝血因子IX基因外,还含有_______________________(至少三个)等结构。
(3)过程④指_______________,重组胚胎可以与普通代孕母羊的子宫建立正常的生理和组织联系,但是出生后的转基因绵羊依然具有生产人凝血因子IX医用蛋白的能力,原因是___________________________________。
(4)理论上,可以通过少量整合有目的基因的成纤维细胞,克隆出大量转基因绵羊,请对这一问题做出两个合理的解释: ___________________;____________________。
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科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊,以便通过乳腺生物反应器生产人 凝血因子IX医用蛋白,其技术路线如图。
(1)要想目的基因只在乳腺组织中表达,在构建基因表达载体A 时,需要将_________基因和__________等调控组件重组在一起。
(2)将A导入绵羊胎儿成纤维细胞中常用的方法是__________。将 A 导入受精卵能否获得转基因绵羊? ______ ,判断依据是________________.
(3)核移植的受体应选用__________期卵母细胞?。
(4)移植应选择胚胎发育到________阶段时进行;转基因绵羊的性状基本上与代孕母羊无关的原因是__________.
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科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊,以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子IX医用蛋白,其技术路线如下图所示(成纤维细胞可增殖)。下列叙述错误的是
A. 过程②常用的方法是显微注射法
B. 代孕母羊要注射免疫抑制剂防止发生免疫排斥反应使移植胚胎死亡
C. 卵母细胞去核的目的是保证核遗传物质来自含目的基因的成纤维细胞
D. 整合有目的基因的成纤维细胞可进行传代培养从而获得大量的细胞群
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科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊,以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子IX医用蛋白,其技术路线如图。
(1)A为含目的基因的(基因)表达载体,其化学本质是___ _ _。
(2)过程①中用到的工具酶有 将A导入绵羊胎儿成纤维细胞中常用的方法是___ _ 。
(3)核移植的受体应选用___ 期卵母细胞。在核移植之前,必须先去掉受体卵母细胞的核,目的是___ 。重组细胞能发育成绵羊,是因为细胞核中具有___ 。
(4)移植应选择胚胎发育到___ _ 阶段时进行;代孕母羊对移入子宫的重组胚胎基本上不发生___ _ ,这为重组胚胎在代孕母羊体内的存活提供了可能。
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