运用基因工程手段可在酵母菌细胞中表达出乙肝疫苗,回答下列问题:
(1)在乙肝疫苗的生产中,应该选择__________(填“抗原”或“抗体”)基因作为目的基因,该目的基因在__________催化下,利用__________技术进行扩增。
(2)乙肝疫苗的主要成份是乙型肝炎病毒HBV的包膜蛋白(糖蛋白),其编码基因位于HBV基因组的S区,S区编码三种不同的包膜蛋白,其末端有226个氨基酸序列是相同的,三种蛋白共同构成完整的乙肝疫苗颗粒,由此推测基因组的S区有三个__________和同一个__________调控组件。除上述调控组件和复制原点外,构建表达载体还需要有__________,其作用是______________________________。
(3)用基因工程生产乙肝疫苗时,若选用细菌为受体细胞,则不能得到引起免疫反应的基因表达产物,其原因是:①乙肝病毒属于动物病毒,不适合寄生于原核生物;②___________________________。
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运用基因工程手段可在酵母菌细胞中表达出乙肝疫苗,回答下列问题:
(1)在乙肝疫苗的生产中,应该选择__________(填“抗原”或“抗体”)基因作为目的基因,该目的基因在__________催化下,利用__________技术进行扩增。
(2)乙肝疫苗的主要成份是乙型肝炎病毒HBV的包膜蛋白(糖蛋白),其编码基因位于HBV基因组的S区,S区编码三种不同的包膜蛋白,其末端有226个氨基酸序列是相同的,三种蛋白共同构成完整的乙肝疫苗颗粒,由此推测基因组的S区有三个__________和同一个__________调控组件。除上述调控组件和复制原点外,构建表达载体还需要有__________,其作用是______________________________。
(3)用基因工程生产乙肝疫苗时,若选用细菌为受体细胞,则不能得到引起免疫反应的基因表达产物,其原因是:①乙肝病毒属于动物病毒,不适合寄生于原核生物;②___________________________。
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(13分)Ⅰ.如图表示运用基因工程技术生产胰岛素的三条途径。据图结合所学知识回答下列问题:
(1)为了便于将含有目的基因的细胞筛选出来,所选择的质粒上应该具有__________________。
(2)培育转基因羊的过程中,科研人员通过感染或____________技术将重组质粒M转移到受体细胞A中,受体细胞A应该是________细胞。③过程中还用到了__________________技术。
(3)受体细胞B应该是莴苣的________(填“体细胞”“卵细胞”或“受精卵),导入该细胞后,需对该细胞进行培养,经________过程形成愈伤组织。
(4)莴苣为双子叶植物,过程②常用的方法是________________;过程⑥常用的方法是用________来处理大肠杆菌,使其易于吸纳重组质粒M。
Ⅱ、下图四种质粒含有E1和E2两种限制酶的识别位点,Apr表示抗青霉素的抗性基因,Tcr表示抗四环素的抗性基因。
(1)将两端用E1切开的APr基因与用E1切开的质粒X-1混合连接,连接后获得的质粒类型有________(2分)。(可多选)
A.X-1 B.X-2
C.X-3 D.X-4
(2)若将上图所示X-1、X-2、X-3、X-4四种质粒导入大肠杆菌,然后分别涂布在含有青霉素或四环素的两种培养基上。在四环素的培养基不能生长的大肠杆菌细胞类型有________、________、__________。
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用基因工程技术将乙肝病毒的蛋白A基因导入酵母菌细胞,可以大规模的生产乙肝疫苗,请回答下列相关问题:
(1)利用PCR技术扩增蛋白A基因时,需要在一定的缓冲溶液中进行,目的是____________________。反应体系中除了含有蛋白A基因、脱氧核苷酸、耐热的DNA聚合酶、还必须含有分別与两条模板链相结含的____________。
(2)大规模培养工程酵母菌时,培养液中需含有水、无机盐、碳源、氮源等营养物质,培养过程中还需通入无菌空气,目的是_______________________。
(3)利用凝胶色谱法从工程酵母菌中分离蛋白A时,凝胶色谱柱装填完毕后需立即连接缓冲液洗脱瓶,一段时间后加入蛋白A粗提样品进行洗脱。立即连接缓冲液洗脱瓶的目的是____________,若蛋白A的分子量较小,则洗脱时间相对____________(较短、较长)。
(4)以乙肝病毒蛋白A作为疫苗给人注射时,必须分多次进行,两次注射之间必须间隔一定的时间,目的是让人体____________;通过注射该疫苗无法预防流感病毒,原因是________________________。
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用酵母菌生产人的乙型肝炎病毒(HBV)疫苗是第一个真核细胞基因工程的商业化产品.回答下列问题:
(1)DNA重组技术的基本工具至少有三种,通常用加工处理过的动植物病毒或者质粒作为_____________,DNA连接酶可将HBV的遗传物质与目的基因连接起来,由此可以知道HBV是_____________(填“DNA”或“RNA”)病毒.
(2)早期基因工程操作常用大肠杆菌作为受体细胞,首先用_____________处理细胞,使细胞处于_____________,从而容易吸收外界DNA分子.导入受体细胞后,目的基因的检测包括检测转基因生物染色体的DNA上是否插入目的基因、目的基因是否_____________ 和目的基因能否_____________.
(3)用转基因动物生产药物时,转基因动物进入泌乳期后,可以通过分泌的乳汁来生产药物,因而称作_____________.科学家将基因表达载体用显微注射的方法注入受精卵中,受精卵在体外发育成胚胎后通过_____________技术,将其移入受体子宫内发育成转基因动物.
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基因疫苗指的是DNA疫苗,即将编码外源性抗原的基因插入到质粒上,然后将质粒直接导入人或动物体内,让其在宿主细胞中表达抗原蛋白,诱导机体产生免疫应答。回答下列问题:
(1)获取目的基因后,可利用______________技术获得大量该基因,该过程所利用的酶必须具有_______的特点。
(2)将编码外源性抗原的基因插入到质粒上,此过程在基因工程中称作_______________。
(3)将导入目的基因的受体细胞在体外培养至_______________阶段后进行胚胎移植,选用的受体动物应符合的性别条件是_______________。
(4)欲检验人或动物体内是否具有了抗原蛋白,在分子水平上检测的方法是从转基因人或动物中提取蛋白质,进行____________。
(5)现已通过基因工程和胚胎工程技术培育出一头具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛,可以采用__________技术形成多个重组细胞,经早期胚胎培养获得大量的重组胚胎,再进行______________就会得到大量具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛。
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基因疫苗指的是DNA疫苗,是将编码外源性抗原的基因插入到含真核表达系统的质粒
上,然后将质粒直接导人人或动物体内,让其在宿主细胞中表达抗原蛋白,诱导机体产生免疫
应答。回答下列问题:
(1)要获得编码抗原的基因,首先要提取出病原体的DNA或RNA,并将RNA ,要
大量获得表达特异抗原的基因,可采用____方法。
(2)将抗原基因插入质粒的过程,即构建基因表达载体的过程,通常一个基因表达载体的
组成,除了抗原基因(目的基因)外,还有 。
(3)一般将重组质粒利用 的方法送人受体细胞,进入细胞核并表达抗原蛋白。
(4)与传统疫苗相比,基因疫苗不仅能在宿主体内较长时间存在,还可以诱导产生(填“体液免疫”“细胞免疫”或“体液免疫和细胞免疫”)。
(5)-个质粒载体可插人多个抗原基因组成多价疫苗,导人这样的疫苗可达到 的目的。
(6)基因疫苗是在基因治疗技术的基础上发展而来的。基因治疗是把 导入病人体内,使该基因表达产物发挥功能,从而达到治疗疾病的目的。
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基因疫苗即DNA疫苗,是将编码外源性抗原的基因插入到含真核表达系统的质粒上,然后将质粒直接导入人或动物体内,让其在宿主细胞中表达抗原蛋白,诱导机体通过产生免疫应答来预防疾病。回答下列有关问题:
(1)要获得编码抗原的基因,首先要提取出病原体的DNA或RNA,并将RNA___________,要大量获得表达特异抗原的基因,可采用___________方法。
(2)将抗原基因插入质粒的过程,即构建基因表达载体的过程。通常一个基因表达载体的组成,除了抗原基因(目的基因)外,还有___________________。
(3)一般将重组质粒利用_______________的方法送入动物细胞并表达抗原蛋白;要想检测导入的抗原基因是否表达,在分子水平上可用_______法进行检测。
(4)基因疫苗不仅能在宿主体内较长时间存在,还可以诱导产生__________(填“体液免疫”“细胞免疫”或“体液免疫和细胞免疫”)。
(5)基因疫苗是在基因治疗技术的基础上发展而来的。基因治疗是把_____________导入病人体内,使该基因表达产物发挥功能,从而达到治疗疾病的目的。
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基因疫苗指的是DNA疫苗,是将编码外源性抗原的基因插入到含真核表达系统的质粒上,然后将质粒直接导入人或动物体内,让其在宿主细胞中表达抗原蛋白,诱导机体产生免疫应答。回答下列问题:
(1)要获得编码抗原的基因,首先要提取出病原体的DNA或RNA,并将RNA_________,要大量获得表达特异抗原的基因,可采用________方法。
(2)将抗原基因插入质粒的过程,即构建基因表达载体的过程,通常一个基因表达载体的组成,除了抗原基因(目的基因)外,还有___________、___________、___________。
(3)一般将重组质粒利用_____________的方法送入受体的肌肉细胞,进入细胞核并表达抗原蛋白。
(4)一个质粒载体可插入多个抗原基因组成多价疫苗,该多价疫苗可达到_______的目的。
(5)基因疫苗是在基因治疗技术的基础上发展而来的。基因治疗是把_____________导入病人体内,使该基因表达产物发挥功能,从而达到治疗疾病的目的。
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糖尿病是一种常见病,且发病率有逐年上升的趋势。如下图表示运用基因工程技术生产胰岛素的三条途径,据图结合所学知识回答下列问题:
(1)科研人员用显微注射技术将重组质粒M转移到受体细胞A中,细胞A应该是___________细胞;莴苣为双子叶植物,过程②常用的方法是______________________。
(2)科研人员用DNA分子杂交技术检测胰岛素基因是否整合到转基因羊的DNA上,以___________作为探针,使探针与羊基因组的DNA杂交,如果显示出___________,就表明胰岛素基因已插入染色体DNA中。
(3)图中过程③是先通过动物细胞培养成早期胚胎,然后将胚胎移植到经过___________处理的受体母羊子宫内。目前对动物细胞所需的营养条件还没有完全研究清楚,在早期胚胎的培养中,往往还需要添加______________________。
(4)若该“胰岛素羊”(已知重组DNA已进入细胞)乳汁中检测到胰岛素,其乳腺细胞分泌的胰岛素与转基因“胰岛素细菌”产生的胰岛素相比所具有的优点是______________,其原因是_____________。
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基因疫苗是指将编码外源性抗原的基因导入人和动物体内,让其在宿主细胞中表达抗原蛋白,诱导机体产生免疫应答。某科研所计划采用基因工程和胚胎工程技术培育具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛。请回答下列问题:
(1)基因表达载体的构建是基因工程的核心,一个完整的基因表达载体至少包括启动子、________、________、________。启动子位于基因的________________,有了它才可以驱动基因转录。
(2)制备基因疫苗的基因可以从基因文库中获取,基因文库实际上是含有某种生物不同基因的许多DNA片段的________________群体。
(3)检测高产奶牛体内是否出现口蹄疫病毒的抗原蛋白,在分子水平上的检测方法是________。
(4)胚胎工程最后一道工序的实质是________________________________________。
(5)为提高胚胎的利用率,可以采用胚胎分割技术,应该选用________________的桑椹胚或囊胚进行分割。
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