乳腺炎和口蹄疫分别是由细菌和病毒引起的危害奶牛养殖业的两种严重疾病。研究者利用生物技术培育...

乳腺炎和口蹄疫分别是由细菌和病毒引起的危害奶牛养殖业的两种严重疾病。研究者利用生物技术培育出转乳铁蛋白肽(抗细菌）和人干扰素(抗病毒）的双转基因奶牛新品种。下图1为基因表达载体，图2为培育流程。

（1）培育双转基因奶牛涉及的生物技术有___________(至少2项）。

（2）牛乳铁蛋白肽基因能在转基因奶牛的乳腺细胞表达，人干扰素基因则可在全身细胞表达，这与构建表达载体时_____________的选择有关。据图可知，干扰素基因与___________基因可同时转录，但在翻译时，核糖体可识别mRNA上IRES序列的对应部分，启动另一种肽链的合成，因此用含有新霉素的培养基可筛选出__________。

（3）将基因导入牛胎儿成纤维细胞前，需用______________将其处理成单个细胞。成纤维细胞无法直接发育成个体，需要去核卵母细胞的细胞质诱导，以实现细胞核的_______________。

（4）研究者利用___________技术筛选出___________(填“牛乳铁蛋白基因”或“干扰素基因”)成功表达的胚胎进行移植。

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乳腺炎和口蹄疫分别是由细菌和病毒引起的危害奶牛养殖业的两种严重疾病。研究者利用生物技术培育出转乳铁蛋白肽(抗细菌）和人干扰素(抗病毒）的双转基因奶牛新品种。下图1为基因表达载体，图2为培育流程。

（1）培育双转基因奶牛涉及的生物技术有___________(至少2项）。

（2）牛乳铁蛋白肽基因能在转基因奶牛的乳腺细胞表达，人干扰素基因则可在全身细胞表达，这与构建表达载体时_____________的选择有关。据图可知，干扰素基因与___________基因可同时转录，但在翻译时，核糖体可识别mRNA上IRES序列的对应部分，启动另一种肽链的合成，因此用含有新霉素的培养基可筛选出__________。

（3）将基因导入牛胎儿成纤维细胞前，需用______________将其处理成单个细胞。成纤维细胞无法直接发育成个体，需要去核卵母细胞的细胞质诱导，以实现细胞核的_______________。

（4）研究者利用___________技术筛选出___________(填“牛乳铁蛋白基因”或“干扰素基因”)成功表达的胚胎进行移植。

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乳腺炎和口蹄疫分别是由细菌和病毒引起的危害奶牛养殖业的两种严重疾病。研究者利用生物技术培育出转乳铁蛋白肽(抗细菌）和人干扰素(抗病毒）的双转基因奶牛新品种。下图1为基因表达载体，图2为培育流程。

（1）培育双转基因奶牛涉及的生物技术有___________(至少2项）。

（2）牛乳铁蛋白肽基因能在转基因奶牛的乳腺细胞表达，人干扰素基因则可在全身细胞表达，这与构建表达载体时_____________的选择有关。据图可知，干扰素基因与___________基因可同时转录，但在翻译时，核糖体可识别mRNA上IRES序列的对应部分，启动另一种肽链的合成，因此用含有新霉素的培养基可筛选出__________。

（3）将基因导入牛胎儿成纤维细胞前，需用______________将其处理成单个细胞。成纤维细胞无法直接发育成个体，需要去核卵母细胞的细胞质诱导，以实现细胞核的_______________。

（4）研究者利用___________技术筛选出___________(填“牛乳铁蛋白基因”或“干扰素基因”)成功表达的胚胎进行移植。

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乳腺炎和口蹄疫分别是由细菌和病毒引起的危害奶牛养殖业的两种严重疾病。研究者利用生物技术培育出转乳铁蛋白肽（抗细菌）和人干扰素（抗病毒）基因的双转基因奶牛品种。下图1为基因表达载体，图2为培育流程。请据图回答问题：

（1）构建基因表达载体时需要用到的工具酶是___________。

（2）基因表达过程包括___________，图1中一般能同时表达的基因是___________。新霉素抗性基因的作用是___________。

（3）图2中研究者可利用___________技术筛选出干扰素基因成功表达的胚胎进行移植。

（4）若利用PCR技术增加目的基因的数量，由图3可知，A、B、C、D四种单链DNA片段中应选取__________作为引物（DNA复制子链的延伸方向5′→3′）。若上图所示基因复制2次，则共需要这两种引物各___________个；PCR程序中“适温延伸”中的适温是___________酶的最适温度。

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乳腺炎和口蹄疫分别是由细菌和病毒引起的危害奶牛养殖业的两种严重疾病。研究者利用生物技术培育出转乳铁蛋白肽(抗细菌)和人干扰素(抗病毒)基因的双转基因奶牛新品种。下图1为基因表达载体，图2为培育流程。

(1)培育双转基因奶牛涉及的生物技术有_______________________________________________(至少2项)。

(2)牛乳铁蛋白肽基因能在转基因奶牛的乳腺细胞中表达，人干扰素基因则可在全身细胞表达，这与构建表达载体时________的选择有关。据图可知，干扰素基因与____________基因可同时转录，基因工程过程中主要的工具酶有________________。

(3)将基因导入牛胎儿成纤维细胞前，需用________将其处理成单个细胞。成纤维细胞无法直接发育成个体，需要去核卵母细胞的细胞质诱导，以实现细胞核的________。

(4)研究者利用________________技术筛选出____________(填“牛乳铁蛋白肽”或“干扰素”)基因成功表达的胚胎进行移植。

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奶牛养殖业中乳腺炎和口蹄疫分别是由细菌和病毒引起的两种严重疾病。研究者利用生物技术培育出转乳铁蛋白肽（抗细菌）和人干扰素（抗病毒）的双转基因奶牛新品种。如图为基因表达载体，如图为培育流程。回答下列问题：

（1）构建基因表达载体时要用到的工具酶是______。作为基因表达载体，除了目的基因外，还必须具有______（答出两点即可）。如图中新青霉素抗性基因的作用是______。

（2）如图中④是处于______（时期）的卵母细胞，而③一般选传代10代以内的细胞，理由是______，对于⑦在移植胚胎前要进行______处理。重组胚胎性别不需要进行鉴定的理由是______。

（3）研究者利用含有乳铁蛋白肽基因和人干扰素基因的DNA片段分别制成探针进行目的基因的检测与鉴定，首先与产下牛犊的乳腺细胞、口腔上皮细胞、蹄部细胞等提取的RNA进行杂交：结果如表：

根据以上结果可以得出结论为：______（答出两点）。

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奶牛养殖业中乳腺炎和口蹄疫分别是由细菌和病毒引起的两种严重疾病。研究者利用生物技术培育出转乳铁蛋白肽（抗细菌）和人干扰素（抗病毒）的双转基因奶牛新品种。下图1为基因表达载体，图2为培育流程。

（1）构建基因表达载体时要用到的工具酶是________。图1中新靑霉素抗性基因的作用是:_________。

（2）研究者利用含有乳铁蛋白肽基因和人干扰素基因的DNA片段分别制成探针，与乳腺细胞、口腔上皮细胞、蹄部细胞等提取的RNA进行杂交:结果如下表：

说明:牛乳铁蛋白肽基因只能在转基因奶牛的______________细胞中表达，人干扰素基因则可在转基因奶牛的___________细胞中表达，这与构建表达载体时___________的选择有关。

（3）图2中④是处于_______________（时期）的卵母细胞，而③一般选传代10代以内的细胞，理由是___________。

（4）不需要对重组胚胎性别进行鉴定，理由是：___________________________________________。

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奶牛养殖业中乳腺炎和口蹄疫分别是由细菌和病毒引起的两种严重疾病。研究者利用生物技术培育出转乳铁蛋白肽（抗细菌）和人干扰素（抗病毒）的双转基因奶牛新品种。下图1为基因表达载体，图2为培育流程。

（1）构建基因表达载体时要用到的工具酶是_______________________。图1中新青霉素抗性基因的作用是_______________________。

（2）研究者利用含有乳铁蛋白肽基因和人干扰素基因的DNA片段分别制成探针，与乳腺细胞、口腔上皮细胞、蹄部细胞等提取的RNA进行杂交:结果如下表：

说明:牛乳铁蛋白肽基因只能在转基因奶牛的______________细胞中表达，人干扰素基因则可在转基因奶牛的___________细胞中表达，这与构建表达载体时___________的选择有关。

（3）图2中④是处于_______________（时期）的卵母细胞，而③一般选传代10代以内的细胞，理由是：___________________________________________________________________________。

（4）不需要对重组胚胎性别进行鉴定，理由是：____________________________________________。

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科研人员利用现代生物技术培育出双转基因奶牛新品种，以便通过乳腺生物反应器生产人乳铁蛋白肽（抗细菌）和人干扰素（抗病毒）。下图1为重组质粒，图2为培育流程。

（1）构建重组质粒时，若人干扰素基因的序列是已知的，则可以通过_________获得该基因，然后再利用_________技术进行扩增。

（2）据图可知，人干扰素基因与_________基因可同时转录。人乳铁蛋白肽基因能在转基因奶牛的乳腺细胞中表达，人干扰素基因则可在全身细胞表达，这与构建重组质粒时_________的选择不同有关。

（3）通常利用_________（方法）将重组质粒导入③，在导入前需用_________将②进行分散处理培养。

（4）④过程涉及到的现代生物技术有_________、胚胎体外培养等。

（5）在培育转基因奶牛⑦时，下列有关叙述正确的是_________

A. 需从表达人干扰素基因的人体细胞中获取目的基因

B. 获得的重组胚胎需要进行性别鉴定才能进行⑤过程

C. 奶牛⑥为一般品种，需进行同期发情处理并未经配种

D. 通常利用DNA分子杂交技术检测转基因奶牛培育是否成功

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支原体是一种严重危害牛养殖业的病原体，在全球各地域广泛分布，能够造成肺炎、乳腺炎、耳炎、角膜结膜炎、关节炎等多种疾病，还能导致母牛流产与不孕，且发病率很高。研究表明，VspX蛋白是支原体表面的一种蛋白，科研人员通过制备抗VspX蛋白单克隆抗体来进行相关研究。请回答下列问题：

（1）将等量的纯化VspX蛋白分别注射到5组生长状况相同的小鼠体内，经过二次免疫后，测定小鼠抗VspX抗似的免疫效果，根据免疫效果，取__________组小鼠用于后面的融合实验。

（2）在融合实验开始前三天，对该组小鼠再次注射VspX蛋白，目的是____________________。

（3）从小鼠的脾脏中获取相应细胞与_______________融合，用选择培养基进行筛选。

（4）一段时间后，将筛选得到的杂交瘤细胞接种到多孔培养板上，进行抗体阳性检测。

（5）将阳性反应强的细胞经__________酶处理，制成细胞悬液，并置于__________（装置）中进行扩大培养。该装置中的作用是________________________________________。

（6）提取抗VspX单克隆抗体与不同抗原进行杂交检测，结果如图，该结果表明，抗VspX单克隆抗体的特点是_____________________。

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