白僵菌可感染农业害虫,因而可用来防治农业害虫。由于白僵菌对草丁膦(一种除草剂)敏感,且杀死害虫的能力较弱,科研人员将Bar基因(抗除草剂基因)和毒蛋白基因导入白僵菌进行基因工程改造,流程如图所示:
(1)从苏云金芽孢杆菌中获取的毒蛋白基因,通过_________技术可在体外大量扩增。该扩增过程所需添加的酶是________。
(2)图中形成重组质粒1时需要的限制酶是________;形成重组质粒2除了需要限制酶XbaⅠ外,还需要_______酶。
(3)将重组质粒2导入经_______处理成为感受态的白僵菌,一段时间后用含有______的培养基进行筛选,获得含有Bar基因的重组白僵菌。
(4)科研人员将重组白僵菌喷涂于植物叶片上,再________________,以判断重组白僵菌的杀虫效果。
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白僵菌可感染农业害虫,因而可用来防治农业害虫。由于白僵菌对草丁膦(一种除草剂)敏感,且杀死害虫的能力较弱,科研人员将Bar基因(抗除草剂基因)和毒蛋白基因导入白僵菌进行基因工程改造,流程如图所示:
(1)从苏云金芽孢杆菌中获取的毒蛋白基因,通过PCR技术可在体外大量扩增。该扩增过程需要提供__________种引物,所需添加的酶是_______________。
(2)图中形成重组质粒1时需要的限制酶是_____________;形成重组质粒2除了需要限制酶XbaⅠ外,还需要_____________酶。
(3)将重组质粒2导入经____________处理成为感受态的白僵菌,一段时间后用含有________的平板培养基进行筛选,获得含有Bar基因的重组白僵菌。
(4)为了判断重组白僵菌的杀虫效果,科研人员接下来应该___________________。
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白僵菌可感染农业害虫,因而可用来防治农业害虫。由于白僵菌对草丁膦(一种除草剂)敏感,且杀死害虫的能力较弱,科研人员将Bar基因(抗除草剂基因)和毒蛋白基因导入白僵菌进行基因工程改造,流程如图所示:
(1)从苏云金芽孢杆菌中获取的毒蛋白基因,通过_________技术可在体外大量扩增。该扩增过程所需添加的酶是________。
(2)图中形成重组质粒1时需要的限制酶是________;形成重组质粒2除了需要限制酶XbaⅠ外,还需要_______酶。
(3)将重组质粒2导入经_______处理成为感受态的白僵菌,一段时间后用含有______的培养基进行筛选,获得含有Bar基因的重组白僵菌。
(4)科研人员将重组白僵菌喷涂于植物叶片上,再________________,以判断重组白僵菌的杀虫效果。
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白僵菌可感染农业害虫,因而可用来防治农业害虫。由于白僵菌对草丁膦(一种除草剂)敏感,且杀死害虫的能力较弱,科研人员将Bar基因(抗除草剂基因)和毒蛋白基因导入白僵菌进行基因工程改造,流程如图所示:
(1)从苏云金芽孢杆菌中获取的毒蛋白基因,通过_________技术可在体外大量扩增。该扩增过程所需添加的酶是________。
(2)图中形成重组质粒1时需要的限制酶是________;形成重组质粒2除了需要限制酶XbaⅠ外,还需要_______酶。
(3)将重组质粒2导入经_______处理成为感受态的白僵菌,一段时间后用含有______的培养基进行筛选,获得含有Bar基因的重组白僵菌。
(4)科研人员将重组白僵菌喷涂于植物叶片上,再________________,以判断重组白僵菌的杀虫效果。
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白僵菌可感染农业害虫,常作为防治害虫的菌剂。由于白僵菌对除草剂草丁膦敏感,且杀死害虫的能力较弱,科研人员对其进行基因工程改造,流程如图所示。
(1)苏云金芽孢杆菌产生的毒蛋白,能有效杀死害虫。已知该基因的全部序列,科研人员通过__________法和PCR技术获得大量毒蛋白基因片段。据图分析将毒蛋白基因和质粒连接获得重组质粒1的过程需要用到的工具酶是______________________________。
(2)重组质粒1和Bar基因(草丁膦抗性基因)各自用XbaⅠ酶处理,得到酶切片段。重组质粒1的酶切片段再用去磷酸化酶处理,使末端游离的磷酸基团脱离,目的是防止______________________________。
(3)将重组质粒2与感受态的白僵菌菌液混合进行转化,重组质粒2在白僵菌细胞内被修复。一段时间后用含有__________的平板培养基进行筛选,获得含有Bar基因的重组白僵菌。
(4)提取上述重组白僵菌全部mRNA,加入____________________酶,获得cDNA,再加入毒蛋白基因引物进行PCR反应,用以检测毒蛋白基因是否完成了__________。在PCR反应体系中除引物、模板外还需加入____________________。
(5)科研人员将重组白僵菌喷涂于植物叶片上,以此饲喂饥饿处理的害虫,记录单位时间内的__________,以判断重组白僵菌的杀虫效果。
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白僵菌可感染农业害虫,常作为防治害虫的菌剂。由于白僵菌对除草剂草丁膦敏感,且杀死害虫的能力较弱,科研人员对其进行基因工程改造,流程如图所示。
(1)苏云金芽孢杆菌产生的毒蛋白,能有效杀死害虫。已知该基因的全部序列,科研人员通过__________法和PCR技术获得大量毒蛋白基因片段。据图分析将毒蛋白基因和质粒连接获得重组质粒1的过程需要用到的工具酶是______________________________。
(2)重组质粒1和Bar基因(草丁膦抗性基因)各自用XbaⅠ酶处理,得到酶切片段。重组质粒1的酶切片段再用去磷酸化酶处理,使末端游离的磷酸基团脱离,目的是防止______________________________。
(3)将重组质粒2与感受态的白僵菌菌液混合进行转化,重组质粒2在白僵菌细胞内被修复。一段时间后用含有__________的平板培养基进行筛选,获得含有Bar基因的重组白僵菌。
(4)提取上述重组白僵菌全部mRNA,加入____________________酶,获得cDNA,再加入毒蛋白基因引物进行PCR反应,用以检测毒蛋白基因是否完成了__________。在PCR反应体系中除引物、模板外还需加入____________________。
(5)科研人员将重组白僵菌喷涂于植物叶片上,以此饲喂饥饿处理的害虫,记录单位时间内的__________,以判断重组白僵菌的杀虫效果。
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白僵菌可感染农业害虫,常作为防治害虫的菌剂。由于白僵菌对除草剂草丁膦敏感,且杀死害虫的能力较弱,科研人员对其进行基因工程改造,流程如图所示。
(1)苏云金芽孢杆菌产生的毒蛋白,能有效杀死害虫。已知该基因的全部序列,科研人员通过_______法和PCR 技术获得大量毒蛋白基因片段。据图分析,将毒蛋白基因和质粒连接获得重组质粒l的过程需要用到的工具酶是________________________。
(2)重组质粒1 和Bar 基因(草丁膦抗性基因)各自用XbaI 酶处理,得到酶切片段。重组质粒l的酶切片段再用去磷酸化酶处理,使末端游离的磷酸基团脱离,目的是防止____________。将未用去磷酸化酶处理的Bar 基因与重组质粒l 连接,获得重组质粒2。获得的重组质粒2 的是下图中的____________。
(3)将重组质粒2 与感受态的白僵菌菌液混合进行转化,重组质粒2 在白僵菌细胞内被修复。 一段时间后用含有___________的平板培养基进行筛选,获得含有Bar基因的重组白僵菌。
(4)提取上述重组白僵菌全部mRNA,加入___________酶,获得cDNA,再加入毒蛋白基 因引物进行PCR 反应,用以检测毒蛋白基因是否完成了___________。
(5)科研人员将重组白僵菌喷涂于植物叶片上,以此饲喂饥饿处理的害虫,记录单位时间内的_________,以判断重组白僵菌的杀虫效果。
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白僵菌可感染农业害虫,常作为防治害虫的菌剂。由于白僵菌对除草剂草丁膦敏感且杀死害虫的能力较弱,科研人员对其进行基因工程改造,流程如图所示。
(1)苏云金芽孢杆菌产生的毒蛋白,能有效杀死害虫。已知该基因的全部序列,科研人员通过________法和PCR技术获得大量毒蛋白基因片段。据图分析,将毒蛋白基因和质粒连接获得重组质粒l的过程需要用到的工具酶是_____。
(2)重组质粒1和Bar基因(草丁膦抗性基因)各自用XbaI酶处理,得到酶切片段。重组质粒l的酶切片段再用去磷酸化酶处理,使末端游离的磷酸基团脱离,目的是防止________。将未用去磷酸化酶处理的Bar基因与重组质粒l连接,获得重组质粒2。获得的重组质粒2的是下图中的_______________。
(3)将重组质粒2与感受态的白僵菌菌液混合进行转化,重组质粒2在白僵菌细胞内被修复。一段时间后用含有_________的平板培养基进行筛选,获得含有Bar基因的重组白僵菌。
(4)提取上述重组白僵菌全部mRNA,加入________酶,获得cDNA,再加入毒蛋白基因引物进行PCR反应,用以检测毒蛋白基因是否完成___________。
(5)科研人员将重组白僵菌喷涂于植物叶片上,以此饲喂饥饿处理的害虫,记录单位时间内的_________,以判断重组白僵菌的杀虫效果。
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白僵菌可感染农业害虫,常作为防治害虫的菌剂。由于白僵菌对除草剂草丁膦敏感且杀死害虫的能力较弱,科研人员对其进行基因工程改造,流程如图所示。
(1)苏云金芽孢杆菌产生的毒蛋白,能有效杀死害虫。已知该基因的全部序列,科研人员通过__________法和PCR技术获得大量毒蛋白基因片段。据图分析,将毒蛋白基因和质粒连接获得重组质粒1的过程需要用到的工具酶是_____________和DNA连接酶。
(2)重组质粒1和Bar基因(草丁膦抗性基因)各自用Xba I 酶处理,得到酶切片段。重组质粒1 的酶切片段再用去磷酸化酶处理,使末端游离的磷酸基团脱离,目的是防止__________。将未用去磷酸化酶处理的Bar 基因与重组质粒1 连接,获得重组质粒2。获得的重组质粒2的是下图中的____________。
(3)将重组质粒2与经 处理过的白僵菌菌液混合进行转化,重组质粒 2在白僵菌细胞内被修复。一段时间后用含有_____________的平板培养基进行筛选,获得含有Bar 基因的重组白僵菌。
(4)提取上述重组白僵菌全部mRNA,加入_________酶,获得cDNA。在获得的产物中加入毒蛋白基因引物进行PCR反应,用以检测毒蛋白基因是否完成了_______________。
(5)科研人员将重组白僵菌喷涂于植物叶片上,以此饲喂饥饿处理的害虫,记录单位时间内的_________,以判断重组白僵菌的杀虫效果。
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白僵菌可感染农业害虫,常作为防治害虫的菌剂。由于白僵菌对除草剂草丁膦敏感,且杀死害虫的能力较弱,科研人员将Bar基因(抗除草剂基因)和毒蛋白基因导入白僵菌进行基因工程改造,流程如图所示:
(1)从苏云金芽孢杆菌中获取的毒蛋白基因,通过____技术可在体外大量扩增。该扩增过程需要____种引物,所需添加的酶是____。
(2)图中形成重组质粒1过程需要的限制酶是____;形成重组质粒2除了需要限制酶 XbaⅠ外,还需要____。
(3)将重组质粒2导入经____处理成为感受态的白僵菌。一段时间后用含有____的平板培养基进行筛选,获得含有Bar基因的重组白僵菌。
(4)科研人员将重组白僵菌喷涂于植物叶片上,以此饲喂饥饿处理的害虫,记录单位时间内的____,以判断重组白僵菌的杀虫效果。
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白僵菌和绿僵菌是两种寄生在昆虫体内的真菌,现广泛应用于农林害虫的防治。科研人员利用基因工程术将绿僵菌的毒力蛋白相关基因M导入白僵菌细胞内,发现白僵菌杀虫能力大幅提高。请回答下列问题:
(1)利用PCR技术扩增M基因前,首先需获得绿僵菌的___________再根据___________序列设计2种特异性引物。科研人员还在2种引物上加入了不同的限制酶切位点,主要目的是便于目的基因与运载体连接及___________。在PCR反应体系中除了加入模板DNA,还需要添加__________(答出2点)。
(2)若要使M基因在受体细胞中稳定表达,需要___________,而不能将目的基因直接导入受体细胞。
(3)为检验M基因是否在白僵菌细胞内稳定存在,可提取连续培养3代的白僵菌基因组DNA,与__________进行分子杂交。若要检测M基因是否成功表达,需要提取白僵菌中的__________进行抗原抗体杂交。
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