ACC合成酶是番茄细胞合成乙烯的关键酶。转反义ACC合成酶基因的番茄果实中乙烯含量显著降低...

ACC合成酶是番茄细胞合成乙烯的关键酶。转反义ACC合成酶基因的番茄果实中乙烯含量显著降低，具有耐储存、宜运输的优点。如图为反义ACC合成酶基因表达载体的部分结构示意图。其中35S为特异启动子，ACC合成酶基因反向接在35S后构成反义ACC合成酶基因。下列相关叙述正确的是（　　 ）

A.若提取ACC合成酶的mRNA，不宜选用成熟番茄的组织

B.可用ACC合成酶基因片段做探针去检测反义基因是否整合到番茄植株染色体DNA上

C.反义基因转录的mRNA与ACC合成酶基因转录的mRNA碱基排列顺序完全相反

D.反义基因转录的mRNA与ACC合成酶基因转录的mRNA结合，阻断ACC合成酶合成

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乙烯生物合成酶基因可以控制乙烯的合成，科学家将该基因的反义基因导入番茄细胞内，培育转基因延熟番茄，延长其储藏期。反义基因的作用机制如下图所示，下列说法错误的是（　　 ）

A.有意义mRNA和反义mRNA是通过相应基因转录而来的

B.乙烯生物合成酶基因的模板链的序列与反义基因的是互补的

C.乙烯是乙烯生物合成酶基因的表达产物，可促进果实成熟

D.因为mRNA形成双链后无法进行翻译，所以无乙烯生物合成酶生成

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番茄不易储存与多聚乳糖醛酸酶（PG）有关，科学家将人工合成的反义多聚乳糖醛酸酶基因导入番茄，获得转基因延熟番茄，是番茄的存储时间大大延长。已知质粒上有Pst I、Sma I 、Hind III 、 Alu I 等四种限制酶切割位点。下图是转基因延熟番茄培育过程的示意图（a mpr为抗氨苄青霉素基因），其中1~ 4是培育过程中的相关步骤，I 、II是相关结构或细胞。请据图作答。

例1  在构建含反义多聚乳糖醛酸酶基因的表达载体时，若用Sma I与Pst I完全酶切含目的基因的DNA后，反应管中有________种片段。为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接，实际操作中，一般应选用限制酶___________，分别同时对_____________进行切割。

例2  通过农杆菌转化法，可将带有目的基因的T-DNA（重组质粒）导入番茄细胞。导入番茄细胞的目的基因，通常插入到细胞核某一条染色体的DNA上，使目的基因的遗传特性得以____________________。上述途径所获得的番茄，其后代并非每一个个体都含目的基因，原因是________。

(3) 为了检测番茄细胞是否导入了目的基因，可以采用特定的DNA分子探针进行检测，也可以向植物组织培养基中加入_______________，以筛选获得导入上述重组质粒的特定受体细胞。

向正常番茄细胞内导入反义多聚乳糖醛酸酶基因后，发现多聚乳糖醛酸酶基因能正常转录形成mRNA，但细胞内却不再合成多聚乳糖醛酸酶（PG），其原因最可能是____________。

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为研究脱落酸对果实内乙烯的生物合成的影响，某研究小组用外源脱落酸（ABA）和脱落酸生物合成抑制剂（ABAI）分别处理桃果实，以ACC合成酶（乙烯生物合成的关键酶）为观测指标，实验数据如图所示，下列分析合理的是

A．实验期间ABAI处理组的ACC合成酶活性最低

B．ABAI处理有利于桃果实的贮藏

C．ABA处理可延缓桃果实的成熟

D．前3天乙烯释放量随外源ABA浓度增大而增大

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普通番茄细胞中有多聚半乳糖醛酸酶基因（PG基因），可产生多聚半乳糖醛酸酶（PG），该酶能破坏细胞壁．番茄果实细胞中，PG合成显著增加，使番茄软化，不耐贮藏．科学家们利用基因工程技术在普通番茄中转入PG基因的反义基因抑制PG基因的表达，培育出了抗软化、保鲜时间长的番茄新品种，过程如图

（1）过程①表示转录过程，发生在番茄细胞的 ______ （场所）中，过程②所需要的原料是 ______ 。

（2）过程③形成重组质粒需要的工具酶有 ______ ，Ti质粒上必须含有 ______ ，以便检测农杆菌细胞中是否导入了 含反义基因的重组质粒 。

（3）过程⑥中运用的技术手段是 ______ 技术．其中，愈伤组织要经过 ______ 过程最终形成完整植株，此过程除营养物质外还必须向培养基中添加 ______ 。

（4）由于导入的目的基因能转录出反义RNA，且能与 含反义基因的重组质粒  互补结合，直接阻碍了PG合成时的翻译过程，抑制PG基因的正常表达．最终使番茄番茄获得抗软化的性状．若 ____________（性状） ，则可确定转基因番茄培育成功。

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下列有关植物激素的叙述，错误的是(　　 )

A.植物激素作为信息分子，并不直接参与细胞内的代谢活动

B.植物不同发育阶段，激素含量的差异是基因选择性表达的结果

C.乙烯在植物体的各个部位都可合成，具有促进果实发育的作用

D.植物的生长发育过程，在根本上是基因组程序性表达的结果

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多聚半乳糖醛酸酶（PG）能降解果胶使细胞壁破损。番茄果实成熟

中，PG合成显著增加，能使果实变红变软，但不利于保鲜。利用基因工程的方法减少

PG基因的表达，可延长果实保质期。科学家将PG基因反向接到Ti质粒上，导入到

番茄细胞中，得到转基因番茄。请据图回答：

（1）   提取目的基因：①若已获取PG的mRNA，

可通过获取PG基因。

②在该基因上游加结构A可确保基因的反向

转录，结构A上应具有的结合

位点。得到的目的基因两侧需人工合成

BamHI黏性末端。

已知BamHI的识别序列如图甲所示，请在图乙相应位置上，画出目的基因两侧的黏性末端。

③重组质粒转化到大肠杆菌中的目的是。

（2）用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，可用含有________的培养基进行筛选，与此同时，为能更好地达到培养目的，除营养物质外还需在培养基中加入。培养24～48h后取样，在质量分数为25%的蔗糖溶液中，观察细胞是否发生现象，鉴别细胞壁是否再生。

（3）由于导入的目的基因能转录反义RNA，且能与________互补结合，抑制PG基因的正常表达。若转基因番茄的保质期比非转基因番茄，则可确定转基因番茄成功。

（4）获得的转基因番茄产生的种子不一定保留目的基因，科研人员常采用________技术，使子代保持转基因的优良性状。

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多聚半乳糖醛酸酶(PG)能降解果胶使细胞壁破损。成熟的番茄果实中，PG合成显著增加，能使果实变红变软，但不利于保鲜。利用基因工程减少PG基因的表达，可延长果实保质期。科学家将PG基因反向接到Ti质粒上，导入番茄细胞中，得到转基因番茄，具体操作流程如下图。据图回答下列问题：

(1)若已获取PG的mRNA，可通过_____方法获取PG基因。PCR技术扩增目的基因的前提是_____，以便根据这一序列合成引物。

(2)该质粒含14000碱基对（14kb），若同时使用两种限制酶切割，产生的片段有5kb、7．5kb、1．5kb,则只用限制酶BamHⅠ切割时产生的片段长度分别是_____和_____。

(3)用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，可用含有_____的培养基进行筛选。如果想通过实验鉴别细胞壁是否再生，可将其置于质量分数为30%的蔗糖溶液中，观察细胞_____现象进行判断。

(4)由于导入的目的基因能转录出反义RNA，且能与_____互补结合，因此可抑制PG基因的正常表达，使番茄果实的保质期延长。

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下列关于植物激素的叙述，错误的是（　 ）

A. 乙烯可促进果实的发育和成熟

B. 植物激素的合成受基因组控制

C. 赤霉素可促进细胞伸长和种子萌发

D. 生长素在植物体内可进行非极性运输

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番茄在运输和贮藏过程中，由于过早成熟而易腐烂。应用基因工程技术，通过抑制某种促进果实成熟激素的合成能力，可使番茄贮藏时间延长，培育成耐贮藏的番茄新品种，这种转基因番茄已于1993年在美国上市。请回答：

在培育转基因番茄的基因操作中，所用的基因的“剪刀”是__________________________；基因“针线”是________________________；基因的“运输工具”是___________________，其中包括病毒和______________。

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