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请回答基因工程方面的问题：
（1）基因工程中目的基因的来源是_________________________和____________________。
（2）在免疫学中把腺病毒基因组的关键区域“删掉”，再把其它对人类更危险的病毒“装上”，这样腺病毒就会像小车一样，绑着一个危险病毒，在人类的免疫系统里“游街”，让免疫系统记住该危险病毒的样子，生成抗体。腺病毒作为基因工程的运载体，进入人体细胞需借助____________（填“显微注射技术”或“细胞自身的内吞作用”）。它除对靶细胞具有较高的转化效率、在宿主细胞中不会引起免疫排斥反应外，还应该具有运载体具备的其它条件_________________________（列举两点）。
（3）基因工程中的单酶切法是指某一种限制酶可将含有目的基因的DNA片段和运载体质粒进行切割；双酶切法是指两种限制酶分别对含有目的基因的DNA片段和运载体质粒进行切割。请分析当用DNA连接酶进行连接时，单酶切法产生的由2个DNA片段之间连接产物有________________________三种情况；双酶切法较单酶切法的优势在于________________________。
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请分析回答下列有关现代生物科技方面的问题：
（1）基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：第一步是目的基因的获取，第二步是基因表达载体的构建，第三步是将目的的基因导入受体细胞，第四步是 。
①通常在第一步和第二步的操作中都需要的工具酶是 。
②利用PCR技术扩增目的基因的过程中，目的基因受热形成单链并与引物结合，在 酶的作用下延伸形成DNA。
③采用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞后，培养该细胞再生成植株的过程中，往往需要使用植物激素，人为地控制 和 过程。
④蛋白质工程的基本程序是：
预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的 序列→找到相对应的 序列。
（2）请回答下列有关单克隆抗体制备的问题：
①与动物细胞融合过程相比，植物体细胞杂交在细胞融合之前要用 处理。作用是去除 ,诱导原生质体融合的化学方法是用 。
②经人工诱导后，骨髄痛细胞和产生免疫反应的动物的脾脏细胞中的B淋巴细胞融合。由于可能产生多种融合细胞，因此还需对融合细胞用 进行筛选，目的是选出 它的特点是 。单克隆抗体的特点是 。
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重叠延伸PCR技术是一种通过寡聚核苷酸链之间重叠的部分互相搭桥、互为模板，通过多次PCR扩增，从而获得目的基因的方法。该技术在扩增较长片段的DNA、不同来源的DNA片段拼接、基因的定点诱变等方面具有广泛的应用前景。右图是利用重叠延伸PCR技术扩增某目的基因的过程。其主要没计思路是用具有互补配对片段的引物（图中引物2、引物3），分别PCR，获得有重叠链的两种 DNA片段，再在随后的扩增反应中通过重叠链的延伸获得目的基因。结合所学知识，分析下列问题。
（1）引物中G+C的含量影响着引物与模板DNA结合的稳定性，引物中G+C的含量越高，结合稳定性______。
（2）在第一阶段获得两种具有重叠片段DNA的过程中，必须将引物l、2和引物3、4置于不同反应系统中，这是因为________。
（3）若在引物l和引物2组成的反应系统和引物3、引物4组成的反应系统中均复制一次，共产生________种双链DNA分子。
（4）在引物1、引物2组成的反应系统中，经第一阶段形成图示双链DNA至少要经过________ 次复制。
（5）若利用微生物扩增该目的基因，其基本步骤包括：________、________、微生物的筛选和培养、从菌群中获取目的基因。
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请分析回答下列有关现代生物科技方面的问题：
(1)基因工程的基本操作程序主要包括五个步骤：第一步是目的基因的获取，第二步是________，第三步是将目的基因导入受体细胞，第四步是________，第五步是实现功能表达。
①获取目的基因的方法很多，常用的有________、 ________（至少写出两种）。
②通常在第一步和第二步的操作中需要的工具酶是________、________。
③如果转基因植物的花粉中含有毒蛋白，将引起的安全性问题包括（多项选择）________。
A生物安全 B环境安全 C食品安全 D伦理道德问题
(2)请回答下列有关单克隆抗体制备的问题：
①与动物细胞融合过程相比，植物体细胞杂交在细胞融合之前要用________处理去除细胞壁，动物细胞融合与植物原生质体融合方法的不同之处是________。
②小鼠体内注入抗原后可获已免疫的B细胞，这种细胞的特点是________。从患骨髓瘤的小鼠体内可获取骨髓瘤细胞，这种细胞的特点是________。
③经人工诱导后，骨髓瘤细胞和已免疫的B淋巴细胞融合，还可能产生________、________的融合细胞（只考虑两两融合），因此还需对融合细胞进行筛选和检测。
④培养筛选出的杂交瘤细胞，可获得大量单克隆抗体，这种抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是________。
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请回答下列有关胚胎工程和基因工程等方面的问题：
（1）利用基因工程可以获得转基因羊。若要使获得的转基因羊分泌的乳汁中含有人抗凝血酶III蛋白，构建基因表达载体时必须把目的基因与_________________基因的______________结合，使用该启动子的原因是 _____________________________ 。
（2）应用PCR扩增目的基
因时，需要在基因组数据库中査询目的基因的________________序列，以便合成引物。PCR过程第一轮循环的模板是________________。（3）目前常用的措施是将该基因表达载体导入羊的________________细胞，导入方法是_____________________。
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请回答基因工程方面的有关问题：
(1)利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。图中引物为单链 DNA 片段，它是子链合成延伸的基础。
①从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物 A 的 DNA 片段所占的比例为________。
②在第________轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的 DNA 片段。
(2)设计引物是 PCR 技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物(只标注了部分碱基序列)都不合理(如下图)，请分别说明理由。
①第 1 组：________________________；
②第 2 组：________________________。
(3)PCR反应体系中含有热稳定 DNA 聚合酶，下面的表达式不能正确反映 DNA 聚合酶的功能，这是因为____________________________________________________________。
(4)用限制酶 EcoRV 、MboⅠ单独或联合切割同一种质粒，得到的 DNA 片段长度如下图(1 kb 即 1 000 个碱基对)，请画出质粒上 EcoRV 、MboⅠ的切割位点。
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请回答基因工程方面的有关问题：
（1）利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似（如下图所示）。图中引物中为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。
①从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占比例为_________。
②在第_______轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段，第四轮出现了_______个等长的DNA片段。
（2）设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物（只标注了部分碱基序列）都不合理（如上图），请分别说明理由。
第一组：____________________________________________________；
第二组：__________________________。
（3）用限制酶EcoRV、MboI单独或联合切割同一种质粒，得到DNA片段长度如下图（1kb即1000个碱基对），请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、MboI的切割位点，并标注片段的长度。____________
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请回答基因工程方面的有关问题:
（1）利用PCR技术扩增目的基因,其原理与细胞内DNA复制类似（如下图所示）。图中引物为单链DNA片段,它是子链合成延伸的基础。
①理论上推测,第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为 。
②在第 轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。
（2）设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物（只标注了部分碱基序列）都不合理（如图）,请分别说明理由。
①第1组: ；
②第2组: 。
（3） PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶,下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能,这是因为 。
（4）用限制酶EcoRV、MboⅠ单独或联合切割同一种质粒,得到的DNA片段长度如下图（1 kb即1000个碱基对）,请画出质粒上EcoRV、MboⅠ的切割位点。
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请回答PCR技术方面的有关问题：利用 PCR 技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。图中引物为单链 DNA 片段，它是子链合成延伸的基础。
（1）从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物 A 的 DNA 片段所占的比例为________。
（2）经4轮循环后产物中 有_______种不同长度的DNA分子，其中只含等长目的基因DNA分子有______个。
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下列有关生物技术安全和伦理问题的观点合理的是（ ）
A.若转基因植物的外源基因来源于自然界，则不会存在安全性问题
B.转基因生物带来的安全性问题主要包括食物、环境、生物等方面
C.转基因作物被动物食用后，目的基因会转入动物体细胞中
D.转抗虫基因的植物，不会导致昆虫群体抗性基因频率增加
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因时，需要在基因组数据库中査询目的基因的________________序列，以便合成引物。PCR过程第一轮循环的模板是________________。