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请分析回答下列有关现代生物科技方面的问题：
（1）基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：第一步是目的基因的获取，第二步是基因表达载体的构建，第三步是将目的的基因导入受体细胞，第四步是 。
①通常在第一步和第二步的操作中都需要的工具酶是 。
②利用PCR技术扩增目的基因的过程中，目的基因受热形成单链并与引物结合，在 酶的作用下延伸形成DNA。
③采用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞后，培养该细胞再生成植株的过程中，往往需要使用植物激素，人为地控制 和 过程。
④蛋白质工程的基本程序是：
预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的 序列→找到相对应的 序列。
（2）请回答下列有关单克隆抗体制备的问题：
①与动物细胞融合过程相比，植物体细胞杂交在细胞融合之前要用 处理。作用是去除 ,诱导原生质体融合的化学方法是用 。
②经人工诱导后，骨髄痛细胞和产生免疫反应的动物的脾脏细胞中的B淋巴细胞融合。由于可能产生多种融合细胞，因此还需对融合细胞用 进行筛选，目的是选出 它的特点是 。单克隆抗体的特点是 。
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请分析回答下列有关现代生物科技方面的问题：
(1)基因工程的基本操作程序主要包括五个步骤：第一步是目的基因的获取，第二步是________，第三步是将目的基因导入受体细胞，第四步是________，第五步是实现功能表达。
①获取目的基因的方法很多，常用的有________、 ________（至少写出两种）。
②通常在第一步和第二步的操作中需要的工具酶是________、________。
③如果转基因植物的花粉中含有毒蛋白，将引起的安全性问题包括（多项选择）________。
A生物安全 B环境安全 C食品安全 D伦理道德问题
(2)请回答下列有关单克隆抗体制备的问题：
①与动物细胞融合过程相比，植物体细胞杂交在细胞融合之前要用________处理去除细胞壁，动物细胞融合与植物原生质体融合方法的不同之处是________。
②小鼠体内注入抗原后可获已免疫的B细胞，这种细胞的特点是________。从患骨髓瘤的小鼠体内可获取骨髓瘤细胞，这种细胞的特点是________。
③经人工诱导后，骨髓瘤细胞和已免疫的B淋巴细胞融合，还可能产生________、________的融合细胞（只考虑两两融合），因此还需对融合细胞进行筛选和检测。
④培养筛选出的杂交瘤细胞，可获得大量单克隆抗体，这种抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是________。
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（12分）回答下列有关现代生物技术的有关问题：
（1）基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤，其中的核心步骤是_____________；PCR技术扩增目的基因是基因工程中常用的技术手段，这一技术的原理是_____________。
（2）克隆动物实际上是用_____________方法得到的动物，也就是将一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的_____________细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，最终发育为动物个体。
（3）受精卵是胚胎发育的开端，参与体外受精的卵细胞必须达到_____________期才具备受精的能力，而精子必须经过_____________过程才能和卵细胞结合。哺乳动物受精过程中防止多精入卵的两道屏障分别是_____________反应和_____________反应。
（4）桑基鱼塘体现了__________________________等生态工程的基本原理（选答两项）。
（5）我国禁止生殖性克隆，但不反对治疗性克隆的研究，而美国国会反对治疗性克隆。请你谈谈为什么要反对克隆人？__________________________
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（9分）下图是利用多种生物工程技术获得转基因牛的基本操作流程，请分析回答：
（1）在基因工程的操作程序中，基因工程的核心是 。
（2）在获取目的基因和构建目的基因表达载体的一个目的基因表达载体的组成包括
标记基因和 、 、 。
（3）一般将受精卵作为目的基因的受体，将目的基因导入受精卵常用的方法称 法。
（4）流程A和B分别指 和 。
（5）农场放牧要考虑环境承载力，牛粪可以用于沼气生产，它们分别应用了生态工程的____________和______________原理。
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基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤，其中基因工程的核心是
A．目的基因的获取
B．基因表达载体的构建
C．将目的基因导入受体细胞
D．目的基因的检测与鉴定
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根据基因工程的有关知识，回答下列问题：
（1）基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤： 、 、 、 。
（2）在基因工程的操作过程中需要用到两种工具酶——限制酶和DNA连接酶。其中限制酶能切割ＤＮＡ分子切割后产生 末端和
末端；DNA连接酶能将目的基因和载体连接起来，按其来源不同可分为两类，即 和 。（3）质粒载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下：
为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性
内切酶切割，该酶必须具有的特点是 。（4）基因工程中常用的载体有质粒、 和 。
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下面是将某细菌的基因A导入大肠杆菌内，制备“工程菌”的示意图．
请据图回答：
（1）制备“工程菌”的基本操作程序主要包括四个步骤，其中的核心步骤是_____________。
（2）若A为未知的目的基因，获得A常用的方法是_____________。
（3）A、B形成C的过程中，需要的工具酶有_____________和_____________。为了利于C进入D,常用__________________处理D。
（4）制备所得的“工程菌”用LB____________培养基进行扩大培养，操作过程中要用________和______________来配制该培养基，还要加入一定量的________，以维持一定的渗透压；培养基使用前必须用___________进行灭菌处理。
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依据基因工程技术和细胞工程有关原理回答下列问题：
（1）基因工程操作的基本步骤是：
① ____ __； ② ____；
③ ____； ④ __。
（2）获取目的基因途径有 、 。
（3）下图是将人类的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图，所用的载体为质粒A。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因，质粒导入细菌B后，其上的基因能得到表达。简述重组质粒的主要过程包括：
①________；
②________；
③。
④导入细菌B细胞的目的基因成功表达的标志是什么？______。
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回答基因工程的基本操作程序中的有关问题。
（1）目的基因的获取：为在短时间内大量获得目的基因，可用________扩增的方法，其原理是________。
（2）基因表达载体的构建：基因表达载体的组成，除具有复制原点、目的基因外，还必须具有启动子、 、标记基因等。启动子是一段有特殊结构的DNA片段，是 识别和结合的部位。标记基因的作用是为了________。
（3）将目的基因导入受体细胞：将目的基因导入某单子叶植物细胞，常采用的方法是____；将目的基因导入动物细胞，常采用的受体细胞是________；将目的基因导入大肠杆菌，大肠杆菌应先用________处理，使其处于能吸收周围DNA的状态。
（4）目的基因的检测与鉴定：检测目的基因是否表达，在分子水平上可采用的检测办法是_________；在个体水平上，如抗虫棉，需要做 。
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（10分）依据基因工程技术和细胞工程有关原理回答下列问题：
（1）基因工程操作的基本步骤是：
a ；
b ________ ；
c ________ ；
d ________ 。
（2）获取目的基因途径有 、 。
（3）下图是将人类的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图，所用的载体为质粒A。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因，质粒导入细菌B后，其上的基因能得到表达。简述重组质粒的主要过程包括：①________；
②________；
③________。
④导入细菌B细胞的目的基因成功表达的标志是什么？。
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标记基因
