-
回答下列（一）、（二）小题：
（一）请回答与微生物培养和植物组织培养有关的问题：
（1）高压蒸汽灭菌是常见的无菌操作。在对培养基进行高压蒸汽灭菌时，发现灭菌锅内压力达到1kg/cm2而温度未达到121℃，为同时达到设定的温度和压力要求，此时应该___________（填操作过程）。利用果酒制作果醋时，___________（填“能”或者“不能”）对果酒进行高压蒸汽灭菌。
（2）制作泡菜时，蔬菜入坛前在开水中浸1 min和坛内加入一些___________以减少发酵时间。测定泡菜汁样品液亚硝酸盐的含量时，如果错将光照波长550nm变成450nm，OD值会变___________。
（3）在超净台内接种目标菌种时，紫外灯应该关闭，这是因为___________（至少写出两点）。
（4）在配制MS培养基时，常先配成母液后用时稀释，这样做的优点是___________。在对菊花茎段进行组织培养时，一般先选用___________培养基。
（二）回答与基因工程和植物克隆有关的问题：
科研工作者将TaNHX2基因转移到某植物细胞内，获得了转基因耐盐植株新品种。下图是获取的含有目的基因的DNA片断，Sau3AⅠ、 EcoRⅠ、 BamhⅠ三种限制性核酸内切酶的识别序列分别是↓GATC、G↓AATTC、G↓GATCC，质粒上各有一个Sau3AⅠ和 ECoRⅠ的酶切位点。请分析回答问题：
（1）若用BamH Ⅰ切割图中所示的DNA片段获得了目的基因，则需选用___________酶切割质粒，以便构建重组质粒，该方案的缺陷是会出现目的基因和质粒的自我环化以及___________。故切割图中所示DNA片段的最佳方案是选用___________酶。实验中酶作用的强弱可用___________表示。
（2）将获得的重组质粒导入原生质体，导入方法有农杆菌转化法和___________。原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇，其作用是___________。原生质体经过细胞壁再生，进而分裂和脱分化形成___________。
（3）为了从个体水平检测成果，需要进行的操作是___________。
-
无菌操作是微生物接种技术的关键；传统发酵技术和微生物分离、纯化、应用过程及植物组织培养和动物细胞培养过程中，均要无菌操作。回答下列相关问题：
（1）消毒和灭菌是两个不同的概念，灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力。消毒仅指杀死一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害。下列哪些事物适用于消毒处理 。
①皮肤 ②饮用水 ③牛奶 ④注射器 ⑤培养皿
⑥接种环 ⑦培养基 ⑧果汁 ⑨酱油 ⑩手术刀
A．①②③⑧⑨ B．④⑤⑥⑦⑩ C．①②③④⑤⑥⑧ D．以上全部
（2）配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行调整 ，接种前要进行 ，在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在无菌条件下进行。
（3）在微生物的实验室培养中，获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。下图是利用 法进行大肠杆菌接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。为达到这一目的，操作上应注意：
① 每次划线前要 ；
② 冷却后从上一区划线末端开始划；
③ 首尾区 。
（4）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被
污染。对固体培养基应采用的检测方法是 ，观察培养基上是否有菌落产生。
（5）有位同学在家制作泡菜时，为避免杂菌污染而向泡菜坛中加入了青霉素，结果发酵失败，原因可能是 。
-
下列有关微生物实验室培养的叙述，正确的是（ ）
A．在熔化琼脂时，需要控制火力并不断搅拌，以免发生焦糊
B．灼烧、高压蒸汽灭菌、紫外线照射等都属于无菌技术
C．样品中活菌数量统计时，接种方法应采用划线法
D．用平板培养基培养微生物时，应将平板倒过来放置
-
下列有关微生物实验室培养的叙述,正确的是（ ）
A．在熔化琼脂时,需要控制火力并不断搅拌,以免发生焦糊
B．灼烧、高压蒸汽灭菌、紫外线照射等都属于无菌技术
C．样品中活菌数量统计时,接种方法应采用划线法
D．用平板培养基培养微生物时,应将平板倒过来放置
-
下列有关生物技术工程的说法正确的是（ ）
A.动物细胞培养所用的液体培养基需要高压蒸汽灭菌
B.PCR体系中应该加入解旋酶和耐高温的DNA聚合酶
C.核移植获得的克隆动物只具有供体亲本的遗传性状
D.植物组织培养培养到愈伤组织即可获得细胞分泌物
-
下列关于无菌操作技术的说法，正确的是( )
A. 消毒仅能杀死物体表面的芽孢和孢子 B. 液态的牛奶可用巴氏消毒法消毒
C. 培养皿、胶头吸管可用干热灭菌法灭菌 D. 高压蒸汽灭菌时间达到后立即排气降温
-
回答下列（一）、（二）小题：
（一）回答与微生物培养及应用有关的问题：
（1）对培养基进行高压蒸汽灭菌时，灭菌时间应从__________时开始计时。对于不耐热的液体培养基，一般可将其转人G6玻璃砂漏斗中，采用__________方式可较快地进行过滤灭菌。
（2）酿造果醋相比，利用大米、高粱等富含淀粉的原料制醋，需增加__________的过程。某醋化醋杆菌培养基由蛋白胨、酵母提取物和甘露醇组成，其中甘露醇的主要作用是__________。
（3）为筛选胞外A–淀粉酶分泌型菌种，一般从__________（A.果园树下 B.肉类加工厂周围 C.米酒厂周围 D.枯树周围）获得土样，用无菌水稀释，涂布到含有淀粉的选择培养基上培养，一段时间后在培养基表面滴加碘液，可在菌落周围观察到透明的水解圈。若要筛选酶活性较高的菌种，需挑选若干个__________比值大的菌落，分别利用液体培养基振荡培养进行扩增。然后将培养液离心，取__________用于检测酶活性。
（二）某农业生态工程示意图如下，回答下列问题；
（1）该农业生态工程体现的生态工程原理主要是__________。对该工程的经济效益分析，可从系统内部的投入和产出、__________、系统的有效贡献等三方面进行核算。
（2）若要提高该工程的经济效益，可采用农业生产的__________技术在桑基上再种植大豆，也可采用农业生态工程的__________技术放养适量的鸡鸭等动物以调整该工程的产业结构。
（3）某小组应用基因工程方法开展适用于该生态工程的抗虫植物改良研究。为提高将重组DNA分子导入受体细胞的效率，除考虑导入方法、筛选条件、防止污染外，还需考虑的主要因素有____________________（答出2点即可）。农杆菌介导法是目前植物转基因的常用方法，该方法的基本过程是农杆菌感染植物时，__________，并将其插入到受体细胞的基因组中。欲获得稳定遗传的抗虫性强的转基因植物品种，则转入的抗虫基因必须能在受体细胞中__________。
-
请分析回答下列有关生物技术专题方面的问题：
（1）表是一种培养基配方，请回答下列问题：
①该培养基高压蒸汽灭菌时要在 g/cm2压力下灭菌30分钟，为了防止尿素加热分解，需要单独用 过滤去除细菌。
②该培养基属于什么培养基（多选）___________。
A．液体
B．固体
C．鉴定
D．选择
E．天然
③如果要对培养的菌落进行纯化，一般采用 方法，操作的第一步及每次画线之前都要对接种环进行 处理，目的是对接种环进行_________。
④制备培养基的操作步骤是__________。（用下列字母排序）
a．倒平板
b．计算
c．溶化
d．称量
e．灭菌
A．a→b→c→d→e B．e→b→d→c→a
C．b→d→c→a→e D．b→d→c→e→a
（2）如图是植物组织培养的示意简图，请回答下列问题：
①B表示的是____________，它是由高度液泡化的、呈无定型状态的薄壁细胞组成。
②A能被培养成为C的根本原因是________；
③植物激素中___________是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。
-
下列关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述中，不正确的是( )
A. 用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高压蒸汽灭菌后倒平板
B. 取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL涂布到不同平板上培养
C. 将实验组和对照组平板倒置，37 ℃恒温培养24～48小时
D. 确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的平板进行计数
-
下列关于无菌操作的叙述，错误的是（ ）
A.煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢
B.加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌
C.利用组织培养技术繁殖脱毒苗时，需要对植物的外植体进行消毒
D.接种时灼烧接种环要冷却后再对菌种划线
