质粒是常用的基因工程载体。下图是某种天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图（标示了部分基因及部分...

质粒是常用的基因工程载体。下图是某种天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图(标示了部分基因及部分限制酶的作用位点)，据图分析下列说法正确的是

A．图中的终止子是由三个相邻碱基组成的终止密码

B．用农杆菌转化法可将该质粒构建的表达载体导入动物细胞

C．用限制酶Ⅱ处理能防止该质粒构建的表达载体引起植物疯长

D．用限制酶Ⅰ和DNA连接酶改造后的质粒无法被限制酶Ⅱ切割

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质粒是常用的基因工程载体。下图是某种天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图（标示了部分基因及部分限制酶的作用位点），据图分析下列说法正确的是（　　 ）

A．图中的终止子是由三个相邻碱基组成的终止密码

B．可直接将该质粒构建的表达载体导入动物细胞

C．用限制酶Ⅰ和DNA连接酶改造后的质粒无法被限制酶Ⅱ切割

D．用限制酶Ⅱ处理能防止该质粒构建的表达载体引起植物疯长

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质粒是常用的基因工程载体。下图是某种天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图（标示了部分基因及部分限制酶的作用位点），据图分析下列说法正确的是（　　 ）

A．图中的终止子是由三个相邻碱基组成的终止密码

B．可直接将该质粒构建的表达载体导入动物细胞

C．用限制酶Ⅰ和DNA连接酶改造后的质粒无法被限制酶Ⅱ切割

D．用限制酶Ⅱ处理能防止该质粒构建的表达载体引起植物疯长

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基因工程常用土壤农杆菌Ti质粒作为载体，需把目的基因插入Ti质粒的T-DNA才能整合到植物染色体DNA上。下图表示抗虫棉培育中使用的三种限制酶A.B.C的识别序列以及Ti质粒上限制酶切割位点的分布，抗虫基因内部不含切割位点，两侧标明序列为切割区域。下列叙述错误的是

A. 应该使用酶B和酶C切取抗虫基因

B. 应该使用酶A和酶B切割Ti质粒

C. 成功建构的重组质粒含1个酶A的识别位点

D. 成功建构的重组质粒用酶C处理将得到2个DNA片段

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下列关于基因工程的说法正确的是

A. 天然质粒都含有标记基因和限制酶识别位点，故常作为基因工程的载体

B. 噬菌体作为基因工程载体可以将重组DNA导入到动物受体细胞而获得转基因动物

C. 农杆菌可将以其质粒为载体的重组质粒导入植物细胞以获得相关转基因植物

D. 采用乳腺细胞为目的基因的受体细胞，可获得乳汁中含有相应的产物的转基因动物

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如图为大肠杆菌及质粒载体的结构模式图，据图回答下列问题：

（1）a所在的区域叫做__________。质粒 DNA分子上有__________　　 个限制酶切割位点，供外源 DNA 片段（基因）插入其中。

（2）携带外源 DNA 片段的质粒进入细胞后，停留在细胞中进行__________或整合到染色体DNA上，随染色体DNA进行________。

（3）质粒DNA分子上有特殊的标记基因，其作用是__________。

（4）在基因工程中使用的载体除质粒外，还有__________。（写出2个即可）

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下图表示某质粒载体，图2表示植物甲的抗旱基因，该基因两端分别包括EcoRⅠ、BamHⅠ在内的多种限制酶的酶切位点。据图回答下列问题：

（1）目前获取目的基因的常用方法有：①从_______________中获取目的基因；②利用__________扩增目的基因。

（2）若目的基因和质粒载体分别用EcoRⅠ酶切，酶切产物用DNA连接酶处理后，两两连接对的产物有_________种类型。将上述连接产物导入无任何抗药性的宿主细胞中，再将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能正常生长的宿主细胞所含有的连接产物是__________________________________________________ 。实验中，为了防止目的基因和质粒载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时因选用的酶是_________________。

（3）为大量培养抗旱新品种植物，将基因表达载体构建完成后一般不直接导入农杆菌，而是先将其转入处于________的大肠杆菌中，导入大肠杆菌的目的是_______________________。

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下图中显示含目的基因的DNA片段、限制性核酸内切酶MunⅠ和EcoRⅠ的识别序列（其中箭头所指部位为限制性核酸内切酶的切割位点）、四种质粒的阴影部分表示标记基因。适于作为图示目的基因载体的质粒是

A．①④　　 B．②③　　 C．①　　 D．③

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下列关于基因工程的说法正确的是

A．质粒都含有标记基因和限制性内切酶识别位点，故常作为基因工程的载体

B．噬菌体作为基因工程载体可以将重组DNA导入到受体细胞获得转基因动物

C．农杆菌可将以其Ti质粒为载体的重组质粒导入植物细胞以获得相关转基因植物

D．采用乳腺细胞为目的基因的受体细胞，可获得乳汁中含有相应的产物的转基因动物

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下图表示某抗虫水稻主要培育流程。请据图分析回答问题：

（1）过程①需要的工具酶有　　　　 。过程②常用　　 溶液处理土壤农杆菌，使其成为感受态。

过程④依据的生物学原理是　　　　 。

（2）组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造。下图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图

（图上标注了部分基因及部分限制酶作用位点）。请据图分析回答问题：

①人工改造时，要使抗虫基因表达，还应插入　　　 。

②人工改造时用限制酶Ⅱ处理，其目的是：第一，去除质粒上的　　　　 两个基因（用图中基因字母符号表示），以保证T-DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长；第二，使质粒带有单一限制酶作用位点，有利于　　　 的准确插入。第三，使质粒大小合适，可以提高转化效率等。

③若用限制酶Ⅰ分别切割改造过的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子，并构成重组Ti质粒。分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞，结果是在含　　　　 的培养基上能够生长。

（3）限制酶Ⅱ识别的核苷酸序列及切割位点为-G↓ACGTC-（“↓”表示切割位点），请在答题纸提供的双链上标出切割DNA分子后形成的黏性末端上的碱基　　　　 。

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