某学者利用“影印培养法”研究大肠杆菌抗链霉素性状产生的原因，先将原始菌种接种在1号培养基上...

某学者利用“影印培养法”研究大肠杆菌抗链霉素性状产生的原因，先将原始菌种接种在1号培养基上，培养出菌落后，将灭菌绒布在1号上印模，绒布沾上菌落并进行转印，使绒布上的菌落按照原位接种到2号和3号培养基上。待3号上长出菌落后，在2号上找到对应的菌落，然后接种到不含链霉素的4号培养液中，培养后再接种到5号培养基上，并重复以上步骤。实验过程如右图所示。下列相关叙述正确的是（　　 ）

A.大肠杆菌抗链霉素的性状是由链霉素的选择作用引起的

B.1号和5号采用平板划线法将菌种接种在相应选择培养基上

C.4号与8号培养液中，大肠杆菌抗链霉素菌株的比例逐渐增大

D.该实验缺乏对照实验，无法确定抗链霉素性状属于可遗传的变异

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某学者利用“影印培养法”研究大肠杆菌抗链霉素性状产生的原因，先将原始菌种涂布在1号培养基上，培养出菌落后，将灭菌绒布在1号上印模，绒布沾上菌落并进行转印，使绒布上的菌落按照原位接种到2号和3号培养基上。待3号上长出菌落后，在2号上找到对应的菌落，然后接种到不含链霉素的4号培养液中，培养后再涂布到5号培养基上，并重复以上步骤。实验过程如图所示。下列相关叙述错误的是（　　 ）

A.大肠杆菌抗链霉素的性状是由基因突变引起的

B.大肠杆菌的抗链霉素突变是由链霉素诱导产生的

C.4号与8号培养液中，抗链霉素菌株的比例逐渐增大

D.在一定时间内4号培养液中大肠杆菌的数量逐渐增多

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（11分）1952年，莱德伯格夫妇通过“影印培养法”，研究大肠杆菌抗链霉素的突变与环境因素的关系。实验的过程如下图所示：

说明：将原始菌种培养在1号培养基中，待长出很多菌落后，将灭菌绒布面按到1号培养基上，使绒布面沾上各个菌落。然后再将绒布面分别按到2号和3号培养基上，使绒布面上的菌落按照原位接种到2号和3号培养基上，这种接种方法称为“影印接种”。同理，6号和7号接种自5号培养基，10号和11号接种自9号培养基。

请据此实验回答下列问题：

（1）细菌抗药性变异的来源属于________。如果3中没有细菌长出，说明________。

（2）根据3中菌落所在的部位，挑取2号培养基中相应部位的菌落在4中扩大培养。同理，进行5~12的操作。5或9培养基中菌落数的多少与________有关，大肠杆菌的分裂方式是________。

（3）3号与2号培养基中的菌落数的比值，是抗性菌落（株）占全部菌落（株）的比例。观察实验结果，判断4、8、12中抗性菌落（株）的比例最大的是________，其中的细菌及其亲代有没有接触过链霉素？________。

（4）可见，细菌抗药性的形成是在施加链霉素之________（前或后）。链霉素对细菌抗性菌落（株）的作用在于________，其内在实质是________。

（5）尽管环境中细菌菌群中存在抗药性基因，但是目前仍使用抗生素治疗由细菌感染引起的疾病。原因在于菌群中________。如果不加节制的滥用抗生素，可能导致的后果是抗生素的药效________。

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（8分）1952年，莱德伯格夫妇通过“影印培养法”，研究大肠杆菌抗链霉素的突变与环境因素的关系。实验的过程如下图所示：

说明：将原始菌种培养在1号培养基中，待长出很多菌落后，将灭菌绒布面按到1号培养基上，使绒布面沾上各个菌落。然后再将绒布面分别按到2号和3号培养基上，使绒布面上的菌落按照原位接种到2号和3号培养基上，这种接种方法称为“影印接种”。同理，6号和7号接种自5号培养基，10号和11号接种自9号培养基。

请据此实验回答下列问题：

（1）细菌抗药性变异的来源属于________。如果3中没有细菌长出，说明________。

（2）3号与2号培养基中的菌落数的比值，是抗性菌落（株）占全部菌落（株）的比例。观察实验结果，判断4、8、12中抗性菌落（株）的比例最大的是，其中的细菌及其亲代有没有接触过链霉素？________。

（3）可见，细菌抗药性的形成是在施加链霉素之________（前或后）。链霉素对细菌抗性菌落（株）的作用在于________，其内在实质是________。

（4）尽管环境中细菌菌群中存在抗药性基因，但是目前仍使用抗生素治疗由细菌感染引起的疾病。原因在于菌群中。但如果不加节制的滥用抗生素，可能导致的后果是抗生素的药效降低。

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为证明青霉素在某种细菌产生抗药性过程中所起的作用是选择而非诱变,有如下实验方案。其中,平板影印指用无菌绒布轻盖在已长好菌落的原培养基上,然后不转动任何角度,“复印”至新的培养基上进行接种。请回答:

（1）图中扩大培养的过程中应选用__________培养基。利用__________分离法可获得培养皿上菌落。

（2）图中②过程培养基的配方如下:

结合图形分析__________(“能”或“不能”)得出结论:该细菌可利用尿素作为氮源。理由是:__________。

（3） B组培养基中还添加了适宜浓度的青霉素,结果如图所示。欲证明青霉素所起的作用是选择,则应选取__________(A. a1 B. a2 C. b1或b2或3 D.任意一个菌落)菌落继续培养在空白的A2培养皿中,待长出菌落后影印到含相同浓度青霉素的C培养皿中。

（4）预测上述A2和C培养皿中菌落的生长情况为__________(“相同”或“不同”),由此证明青霉素所起的作用是选择。

（5）下列关于微生物培养的叙述,正确的是（_____）

A.实验过程中所有器皿和培养基都必须用高压蒸汽灭菌法进行灭菌

B.实验操作过程中必须打开超净台上的紫外灯和过滤风

C.涂布分离法,单菌落更易分开,但操作更复杂

D.采用划线分离时,在每次划线前都需蘸取菌液一次

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为了研究微生物的抗药性突变是自发产生的还是在环境因素的作用下产生的，1952年Lederbeg夫妇利用大肠杆菌设计了一个影印培养法实验。影印培养法的基本过程是：把长有菌落的母种培养皿倒置于包有一层灭菌丝绒布的木质圆柱体(直径略小于培养皿平板)上，使其均匀地沾满来自母种培养皿平板上的菌落，然后通过这一“印章”把此平板上的菌落“真实地”一一接种到不同的其他平板上。下图就是利用影印培养技术研究大肠杆菌产生抗链霉素突变的实验。

①首先将对链霉素敏感的大肠杆菌稀释涂布在不含链霉素的平板1上，待其长出密集的小菌落后，用影印法接种到不含链霉素的培养基平板2上，随即再影印到含有链霉素的培养基平板3上。经培养后，在平板3上出现了个别抗链霉素的菌落。

②对培养皿2和3进行比较，在平板2上找到与平板3上位置相同的那几个菌落。

③将平板2上与平板3上位置相同的菌落挑至不含链霉素的培养液4中，经培养后，再稀释涂布在平板5上。

④并重复以上各步骤，最后在试管12中获得了较纯的抗链霉素菌落。

根据以上材料回答下列问题：

(1)与酵母菌相比，大肠杆菌在细胞结构上的主要区别是　　　　　　　。

(2)3号、7号、11号培养基中加入链霉素的作用是　　　　　　　　，3号培养皿中的菌落比1号、2号中的菌落少很多，这说明了：　　　　　　　　。

(3)你认为该实验最关键的设计思路是　　　　　　　　　　　。

(4)该实验得到的结论是　　　　　　　　　　　。

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下面是筛选抗链霉素大肠杆菌的实验步骤及相关图解。

实验步骤：

①把大量对链霉素敏感的大肠杆菌接种在不含链霉素的培养基1的表面，进行培养。

②待其长出密集的小菌落后，用影印法接种到不含链霉素的培养基二上，随即在影印到含链霉素的培养基3上，进行培养。

③在培养基3上，出现了个别抗链霉素的菌落，将其挑选出，以此类推，如下图：

请分析回答：

（1）菌落是指____________，从生态学角度分析，菌落实质上属于____________。

（2）配制培养大肠杆菌的培养基，一般都含有水、碳源、无机盐和氮源等四类营养物质。试从细胞的元素组成分析，其原因是____________。配制培养基时除了满足基本的营养条件外，还需满足微生物生长对特殊营养物质、____________的要求。

（3）从功能上看，含有链霉素的培养基3、7、11属于____________。由上图可知，原始菌种接种到培养基1、5、9的方法是____________。

（4）对2和3进行比较，在2上找到与3上相应的菌落，挑取其中一个菌落接种到______________（含链霉素/不含链霉素）的培养基上，如果有较多的菌落出现，则说明该抗性基因突变发生在该菌接触链霉素之_________（前/后）。

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如图是筛选抗链霉素大肠杆菌的实验步骤及相关图解。实验步骤：

①把大量对链霉素敏感的大肠杆菌接种在不含链霉素的培养基1的表面，进行培养。

②待其长出密集的小菌落后，用影印法接种到不含链霉素的培养基二上，随即再影印到含链霉素的培养基3上，进行培养。

③在培养基3上，出现了个别抗链霉素的菌落，将其挑选出。请分析回答：

（1）配制培养大肠杆菌的培养基除了满足基本的营养条件外，还需满足微生物生长对___________、__________和___________的要求。若在培养基中加入伊红美蓝，则培养皿中长出的菌落颜色为_____________。

（2）从功能上看，含有链霉素的培养基3属于_________________。

（3）由上图可知，原始菌种接种到培养基1的方法是___________________。

（4）对培养基2和培养基3上的菌落进行比较，在培养基2上找到培养基3上相应的菌落。挑取其中一个菌落，接种到________________（含链霉素/不含链霉素）培养基4上。经培养，发现有较多的菌落。则发生抗链霉素基因突变发生在_______________________（填“接触到链霉素之前”或“接触到链霉素之后”）。

（5）3中的菌落比1，2中的菌落少很多，这说明了基因突变具有______________的特点。

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下面是筛选抗链霉素大肠杆菌的实验步骤及相关图解。

实验步骤：

①把大量对链霉素敏感的大肠杆菌接种在不含链霉素的培养基1的表面，进行培养。

②待其长出密集的小菌落后，用影印法接种到不含链霉素的培养基二上，随即在影印到含链霉素的培养基3上，进行培养。

③在培养基3上，出现了个别抗链霉素的菌落，将其挑选出。如下图：

请分析回答：

（1）配制培养大肠杆菌的培养基，一般都含有水、碳源、无机盐和氮源等四类营养物质。试从细胞的元素组成分析，其原因是____________________。

（2）从功能上看，含有链霉素的培养基3属于__________。

（3）由上图可知，原始菌种接种到培养基1的方法是__________。

（4）对培养基2和培养基3上的菌落进行比较，在培养基2上找到培养基3上相应的菌落。挑取其中一个菌落，接种到含链梅素的培养基4上。经培养，发现有较多的菌落。则发生抗链霉素基因突变与接触到抗链酶素的时间关系是__________。

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（四）微生物的培养及应用

为证明青霉素在某种细菌产生抗药性过程中所起的作用是选择而非诱变，实验方案如下图所示。图中③平板影印是指用无菌绒布轻盖在已长好菌落的原培养基上，然后不转动任何角度，“复印”至新的培养基上进行接种的方法。

1.图中扩大培养的过程中应选用___________________（固体/液体）培养基。加入菌种前应进行_______（消毒/灭菌），常用的方法是______。利用分离法可获得A1培养皿上菌落。

2.图中②过程所用培养基的配方如下（酚红可以用来检测尿素是否分解）：

根据图表分析无法得出该细菌可利用尿素作为氮源的结论，理由是______。

3.B组培养基中还添加了适宜浓度的青霉素，结果如图所示。欲证明青霉素所起的作用是选择，则应选取　　　　　 （A. a1　　 B. a2　　 C. b1或b2或b3　　 D. 任意一个落）菌落继续培养在空白的A2培养皿中，待长出菌落后影印到含相同浓度青霉素的C培养皿中。预测上述A2和C培养皿中菌落的生长情况为　　　　　 （“相同”/“不同”），由此证明青霉素所起的作用是选择。

4.下列关于微生物培养的叙述，错误的是（多选题）　　　　 。

A. 实验过程中所有器皿和培养基都必须用高浓度酒精消毒。

B. 实验操作过程中必须全程打开紫外灯消毒。

C. 采用平板划线法分离时，在每次划线前都要灼烧接种环。

D. 采用平板划线法分离时，在每次划线前都需蘸取菌液一次。

5.如果这对等位基因位于常染色体上，能否确定该女孩的2个显性基因A来自于祖辈4人中的具体哪两个人？_____为什么？_____。

6.如果这对等位基因位于X染色体上，能否确定该女孩的2个显性基因A来自于祖辈4人中的具体哪两个人？_____请分析原因_____。

下图显示一种单基因遗传病(甲病 G-g)在两个家族中的遗传系谱，其中，Ⅱ-9 不携带致病基因，Ⅲ-14是女性。

7.甲病的遗传方式是。Ⅲ-14的基因型是_____。

8.除患者外，Ⅲ-13的直系血亲中，携带有甲病基因的是______。

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