在一定剂量范围内苜蓿中的黄酮对动物乳腺上皮细胞增殖具有一定促进作用。为研究不同浓度苜蓿黄酮...

在一定剂量范围内苜蓿中的黄酮对动物乳腺上皮细胞增殖具有一定促进作用。为研究不同浓度苜蓿黄酮对乳腺上皮细胞的增殖及其对乳酸脱氢酶（LDH）活性的影响，科研人员用MTT法以细胞悬液OD值为观测指标测定细胞增殖能力，进行了相关实验研究。请完善实验思路，并根据实验结果进行分析。

实验材料与仪器：

用二甲基亚砜（DMSO）配置的浓度为25、50、75和100µ/mL苜蓿黄酮溶液、用动物细胞培养液配制的一定密度的动物乳腺上皮细胞悬液、光电比色计、MTT法细胞增殖测定仪器等

（要求与说明：MTT法测定细胞增殖具体操作不作要求；乳酸脱氢酶（LDH）活性检测不作要求；在一定细胞数范围内，OD值与细胞数成正比；培养过程中培养液变化忽略不计；实验条件适宜）

（1）完善实验思路

①取若干培养瓶，各加入998mL的细胞悬液，分为5组，编号甲~戊，每组5个重复。

②甲组：加入2mL二甲基亚矾；_______。

③________。

④实验第5天，_______。

⑤________。

（2）结果分析与结论

苜蓿黄酮对某动物乳腺上皮细胞增殖及其乳酸脱氢酶（LDH）活性的影响

注：表中*表示与对照组比较有统计学上的显著差异，不带*数据表示与对照组无显著差异；（单位：略）

根据上表可得实验结论：

结论一：作用时间较短时（3天），苜蓿黄酮对细胞增殖无明显作用；

结论二：_______；

结论三：_______。

（3）实验分析

细胞呼吸中，乳酸脱氢酶（LDH）催化的反应_______（填“产生”或“不产生”）ATP，这一催化反应发生在_______（填“需氧”或“厌氧”）呼吸中。本实验中还可用细胞培养上清液中LDH的浓度代表细胞的受损程度的原因是_______。为减少微生物对实验结果带来的干扰，实验中的动物细胞培养基中添加的胎牛血清可采用_______（方法）去除杂菌。

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某研究小组发现药物M对人乳腺癌细胞MCF-7的增殖有抑制作用，并具有明显的浓度和时间依赖性，其实验结果如下图所示。请根据以下提供的实验材料与用具，完善实验思路，并得出实验结论。

材料与用具：培养瓶若干，不同浓度的药物M溶液，生理盐水，人乳腺癌细胞MCF-7细胞悬液，含10%胎牛血清的细胞培养液，C02培养箱，酶标仪（测定细胞培养液的吸光度值）等。

[要求与说明：细胞数量通过测定相应培养液的吸光度值表示，细胞抑制率=（1-相应组吸光度值）/对照组吸光度值]

请回答：

（1）实验思路：

①取若干培养瓶均分成四组，编号A、B、C、D，均加入等量的____________。

②分组处理：________________________。

③细胞培养：________________________。

④数据收集与处理：________________________。

（2）实验结果：请你绘制一张用于记录实验数据的表格。

（3）实验结论：________________________________________________。

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【加试题】蓝莓果实中富含花青素，研究表明花青素对癌细胞的增殖具有一定的抑制作用。为了研究不同浓度、不同时间的花青素的抑制效果，请利用以下材料进行探究。

实验材料：癌细胞悬液（含培养液）、蓝莓花青素（浓度200μg/ml)、生理盐水、卡氏瓶、血细胞计数板、显微镜等。

(要求与说明：2天内每隔12小时计数一次，计数具体操作过程不作要求；癌细胞置于卡氏瓶中培养；实验条件适宜）

(1)实验思路：________________。

……

(2)请设计一个表格用于记录实验数据________________。

(3)①除了利用血细胞计数板对癌细胞进行计数外，也可以利用___________测定癌细胞培养液的浑浊度。

②分析数据时，发现某个花青素浓度下的一组实验数据存在明显的偏差，如何处理？___________。

A.保留，继续求平均值　　　　 B.舍弃，其他组别求平均值

C.重新实验得到实验数据　　　 D.取中间值

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蓝莓果实中富含花青素，研究表明花青素对癌细胞的增殖具有一定的抑制作用。为了研究不同浓度、不同时间的花青素的抑制效果，请利用以下材料进行探究。

实验材料：癌细胞悬液(含培养液)、蓝莓花青素(浓度200 μg/mL)、生理盐水、卡氏瓶、血细胞计数板、显微镜等。

(要求与说明：2天内每隔12小时计数一次，计数具体操作过程不作要求；癌细胞置于卡氏瓶中培养；实验条件适宜)

(1)实验思路：______________________

(2)请设计一个表格用于记录实验数据。__________________

(3)①除了利用血细胞计数板对癌细胞进行计数外，也可以利用________测定癌细胞培养液的浑浊度。

②分析数据时，发现某个花青素浓度下的一组实验数据存在明显的偏差，如何处理？________。

A．保留，继续求平均值

B．舍弃，其他组别求平均值

C．重新实验得到实验数据

D．取中间值

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蜂毒素是工蜂毒腺分泌的多肽，体外研究发现，蜂毒素对多种癌细胞具有强烈的杀伤作用。癌细胞在适宜的条件下进行体外培养，能够无限增殖。如图表示癌细胞在一定浓度的蜂毒素培养液中培养几小时后，DNA含量不同的细胞数。请据图分析：

（1）据图1结果推测，蜂毒素能将癌细胞阻断在有丝分裂的　　　　　　 期。

（2）研究人员在实验过程中用表格和直方图形式分别记录了实验结果，但记录表因故遗失，请根据直方图还原实验结果记录表：

（3）研究表明，阻断癌细胞增殖周期可引起细胞凋亡。研究人员为研究蜂毒素对人胃癌细胞的影响及作用机制，进行了以下实验。

①方法步骤：a．取若干只相同的培养瓶，分　　　　 组并编号，分别加入等量的完全培养液并接种等量的离体胃癌细胞。

b．

c．培养48 h后，检测并统计　　　　　　　　 ，结果如图2所示。

d．重复a、b步骤，检测凋亡基因（Bax、Bel-2）的表达，结果如图3所示。

②结果分析：　 图2和图3表明蜂毒素对胃癌细胞的作用机制是　　　　　　　　 。

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正常子宫内膜上皮细胞具有合成某种细胞周期蛋白（简称P蛋白）的能力，该蛋白可促进子宫内膜上皮细胞的增殖，雌性激素也能促进子宫内膜上皮细胞的增殖，子宫肌瘤多并发子宫内膜增生。有人试图研究雌性激素是否通过诱导P蛋白的合成来促进子宫内膜上皮细胞的增殖，下列有关叙述错误的是

A．该实验需要不能合成P蛋白的子宫内膜上皮细胞和正常（或能合成P蛋白的）子宫内膜上皮细胞两种实验材料

B．该实验对照组的培养液中也需要加入雌性激素

C．子宫内膜上皮细胞增殖的方式是减数分裂

D．子宫肌瘤的发生与长期的雌性激素含量过高导致内分泌失调有关

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动物细胞体外培养时，通常要在培养基中补充一定浓度的某些物质。图3是血清对正常细胞和癌细胞培养影响的实验结果。相关结论不正确的是   （   ）

A．血清对癌细胞增殖的促进作用高于对正常细胞的促进作用

B．癌细胞的增殖速率主要取决于癌细胞自身的特性

C．培养基中是否补充血清对正常细胞的培养影响很大

D．此结果可为“动物细胞培养需要补充血清”提供证据

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研究发现两种现象：①动物体内的B细胞受到抗原刺激后，在物质甲的促进作用下，可增殖、分化为效应B细胞；②给动物注射从某种细菌获得的物质乙后，此动物对这种细菌具有了免疫能力。则这两种物质中（   ）

A．甲是抗体，乙是抗原决定簇

B．甲是抗体，乙是淋巴因子

C．甲是淋巴因子，乙是抗原决定簇

D．甲是淋巴因子，乙是抗体

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为探究物质P抑制癌细胞增殖的效应，研究人员使用不同浓度的物质P处理人的离体肝癌细胞，实验结果如下图所示。下列相关叙述正确的是

A．随着物质P浓度的增加，其促进肿瘤细胞凋亡作用越明显，但与处理时间无关

B．随着物质P处理时间的延长，其抑制癌细胞增殖作用越明显，但与浓度无关

C．物质P对肿瘤细胞的作用机制，可能与调控细胞凋亡相关基因的表达有关

D．通过本实验可以得出结论，物质P抑制癌细胞增殖的最适浓度为1．00 g/L

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为探究物质P抑制癌细胞增殖的效应，研究人员使用不同浓度的物质P处理人的离体肝癌细胞，实验结果如下图所示。下列相关叙述正确的是

A．随着物质P浓度的增加，其促进肿瘤细胞凋亡作用越明显，但与处理时间无关

B．随着物质P处理时间的延长，其抑制癌细胞增殖作用越明显，但与浓度无关

C．物质P对肿瘤细胞的作用机制，可能与调控细胞凋亡相关基因的表达有关

D．通过本实验可以得出结论，物质P抑制癌细胞增殖的最适浓度为1.00 g/L

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