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【生物——选修3:现代生物科技专题】
我国培育的转基因抗虫棉是转入了从苏云金芽孢杆菌中分离出来的Bt毒蛋白基因，请回答有关问题:
（1）基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：目的基因的获取、基因表达载体的构建、________、___________。
（2）在基因工程中，获取目的基因主要有两大途径，即___________和从___________中分离。若想得到大量的抗虫基因，需用到PCR技术，在该技术操作过程中目的基因受热形成单链并与_______________结合，在___________酶的作用下延伸形成DNA。
（3）表达载体中还必须有标记基因，其作用是______________________。如果要将表达载体导入植物细胞，常用的方法是____________________________________________。
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【生物——选修3：现代生物科技专题】
Bt毒蛋白基因是从苏云金芽孢杆菌中分离出来的抗虫基因，因其表达产物Bt毒蛋白具有杀虫效果好、安全、高效等优点而成为应用最为广泛的基因。请回答下列有关转基因抗虫植物的问题:
（1）要从苏云金芽孢杆菌中获取Bt毒蛋白基因，可根据Bt毒蛋白基因的部分已知序列，设计特异性①_________，再利用②_________技术扩增出Bt毒蛋白基因。
（2）构建重组质粒时，常用Ti质粒作为载体，是因为Ti质粒上具有③_________，它能把目的基因整合到受体细胞（植株细胞）的 ④_________上。这种将基因表达载体导入受体细胞的方法是⑤ _________法。
（3）要确定抗虫基因导入棉花细胞后，是否赋予了棉花抗虫特性，在个体水平上还需要做⑥_________ 实验；若要检测具有抗虫基因的棉花是否产生了相应毒蛋白，在分子水平上可利用⑦_________ 方法进行检测。
（4）目前，转基因植物的安全性问题是社会争论的热点。如有些人认为转基因植物的种植会威胁环境安全；但也有人认为转基因植物的种植减少了⑧_________ 的使用，有利于减轻污染。
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【生物～选修3现代生物科技专题】 下图表示科学家通过基因工程培育抗虫棉时，从苏云金芽孢杆菌中提取抗虫基因“放入”棉花细胞中与棉花的DNA分子结合起来而发挥作用的过程示意图。请据图回答下列有关问题：
（1）图中科学家在进行①操作时，要使用________酶。
（2）在获得目的基因的过程中，PCR技术相当重要。PCR扩增反应需要在一定的缓冲溶液中加入DNA模板、分别与两条模板链相结合的两种________、四种脱氧核苷酸和 的DNA聚合酶。
（3）图中的Ⅱ是________，II由目的基因、________组成。
（4）将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是________，约80%的转基因植物都是通过这种方法获得的，除此之外，还有________。
（5）图中的Ⅲ是导入了目的基因的受体细胞，经植物组织培养获得一株棉花，这株棉花是否具有抗虫特性可进行________水平的鉴定。
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【生物——选修3：现代生物技术专题】苏云金芽孢杆菌产生的Bt毒蛋白在害虫的消化道内能被降解成有毒的多肽，最终造成害虫死亡，因此Bt基因广泛用于培育转基因抗虫植物。
(1)培育转基因抗虫棉所需的目的基因来自________的基因组，再通过PCR技术扩增。PCR反应中温度呈现周期性变化，其中加热到90～95℃的目的是______， 然后冷却到55—60℃使引物与互补DNA链结合，继续加热到70～75℃，目的是___________。
(2)限制酶主要是从_______中获得，其特点是能够识别DNA分子某种________，并在特定位点切割DNA。
(3)科研人员培育某品种转基因抗虫棉的过程中，发现植株并未表现抗虫性状。可能的原因是________。（至少答两点）
(4)在基因表达载体中，目的基因的首端和尾端必须含有_______这样目的基因才能准确表达。
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转基因抗虫棉是将从苏云金芽孢杆菌中分离出来的Bt毒蛋白基因转入植物细胞培育获得，回答下列相关问题。
（1）从苏云金芽孢杄菌获得Bt毒蛋白基因后，可通过PCR技术进行扩增，该过程需要有________作为引物，该技术中所用的酶是________。
（2）将Bt毒蛋白基因导入植物细胞常用________法，该方法中需将Bt基因插入到Ti质粒的________上，其原因是________________________。
（3）检测Bt毒蛋白基因是否导入植物细胞，可以用________________________________作为探针进行检测，导入成功的标志是________________________________。将含有Bt毒蛋白基因的植物细胞培育成抗虫植株需通过________技术。
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【生物——选修3 现代生物科技专题】（15分）
下图表示科学家通过基因工程培育抗虫棉时，从苏云金芽孢杆菌中提取抗虫基因“放入”棉花细胞中与棉花的DNA分子结合起来而发挥作用的过程示意图。请据图回答下列有关问题：
(1)图中科学家在进行①操作时，要用同一种___________________分别切割目的基因和运载体，运载体的黏性末端与目的基因DNA片段的黏性末端就可通过__________（键名）而结合，遵循________。
(2)在获得目的基因的过程中，PCR技术相当重要。PCR扩增反应需要在一定的缓冲溶液中加入DNA模板、分别与两条模板链相结合的两种 、四种脱氧核苷酸和________的DNA聚合酶。
(3)图中的III是导入了目的基因的受体细胞，经培养、筛选最终获得一株有抗虫特性的转基因植株。经分析，该植株含有一个携带目的基因的DNA片段，因此可以把它看作是杂合子。理论上，在该转基因植株自交产生的F1中，仍具有抗虫特性的植株占总数的________，原因是_________
________。
(4)将上述抗虫棉植株的后代种子种植下去后，往往有很多植株不再具有抗虫性，原因是_________
________，要想获得纯合体，常采用的方法是________ ___________。
(5)科学家最初在做抗虫棉实验时，虽然用一定的方法已检测出棉花的植株中含有抗虫基因，但让棉铃虫食用棉的叶片时，棉铃虫并没有被杀死，这说明________。科学家在研究的基础上又一次对棉花植株中的抗性基因进行了修饰，然后再让棉铃虫食用棉的叶片，结果食用的第2 天棉铃虫就死亡了。
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[生物——选修3：现代生物科技专题]
转基因农作物的安全性问题和癌症治疗问题是目前讨论的热点话题，请回答下列相关问题：
（1）在培育抗虫棉的过程中，从苏云金芽孢杆菌中获得抗虫基因后，常利用__________技术进行扩增。一个基因表达载体的组成，包括目的基因、启动子、终止子和__________，其中启动子的作用是__________。
（2）将抗虫基因导入棉花细胞最常用的方法是____________________，在分子水平检测棉花细胞中是否含有抗虫毒蛋白的方法是____________________技术。
（3）“生物导弹”是将抗癌细胞的__________与化学药物等结合并注入人体内，借助其导向作用，定向杀死癌细胞，它的制备所运用的生物技术主要有____________________（答出2个）。
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我国科学家利用Bt毒蛋白基因转入普通棉花，培育出转基因的抗虫棉，对棉铃虫有较强抗性。回答下列问题：
(1)从苏云金芽孢杆菌中分离出Bt毒蛋白基因，构建__________导入棉花细胞。获得的抗虫棉也能产生相同的Bt毒蛋白，从翻译的角度分析,其原理是______。 。
(2)从分子水平检测抗虫棉是否培育成功，可以利用抗原-抗体杂交来检测。若有________出现，说明已形成Bt毒蛋白。在该检测方法中，Bt毒蛋白属于_____。
(3)从个体水平鉴定抗虫棉是否培育成功，取一定量长势良好的转基因棉花植株接种适量的棉铃虫作为实验组，对照组如何设置：______。在相同且适宜的条件下培养一段时间，观察并统计两组棉花叶片的受损程度。获得的抗虫棉若要扩大生产， 可以通过________技术进行微型繁殖。
(4)在农业生产中，抗虫棉大面积种植的区域还需配套种植一定量的普通棉花，从进化的角度分析，原因是___________。
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我国科研人员克隆了100多个重要基因，取得了抗虫棉、抗虫玉米、耐除草剂大豆等一批重大转基因成果。请回答下列问题：
（1）抗虫棉中转入的Bt毒蛋白基因是从苏云金（芽孢）杆菌中分离出来的，该基因编码的Bt蛋白对哺乳动物 （填“有”或“无”）毒害作用。
（2）每一种Bt毒蛋白的杀虫范围有限，对现有的毒蛋白进行 ，使其具有更广杀虫范围，属于 （生物工程）的范围。
（3）随着转基因成果的不断涌现，人们对转基因生物的安全性的关注与日俱增，在食物安全、生物安全和
三个方面发生了激烈争论。
（4）来自原核生物中有重要价值的外源基因，无需改造和修饰就可在叶绿体中高效表达，据此分析，原因是 。
（5）请简述获得转基因植株的完整过程： 。
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[生物——选修3：现代生物科技专题]
I.我国科研人员克隆了100多个重要基因，取得了抗虫棉、抗虫玉米、耐除草剂大豆等一批重大转基因成果。请回答下列问题：
（1）抗虫棉中转入的Bt毒蛋白基因是从苏云金(芽孢)杆菌中分离出来的，该基因编码的Bt蛋白对哺乳动物 （填“有”或“无”）毒害作用。
（2）每一种Bt毒蛋白的杀虫范围有限，对现有的毒蛋白进行 ，使其具有更广杀虫范围，属于 （生物工程）的范围。
（3）随着转基因成果的不断涌现，人们对转基因生物的安全性的关注与日俱增，在食物安全、生物安全和
三个方面发生了激烈争论。
II.关
注生态工程的建设。（1）与传统的工程相比,生态工程是一类少消耗、 、可持续的工程
体系。（2）“无废弃物农业”是我国古代传统农业的辉煌成就之一,也是生态工程最早和最生动的一种模式，该模式主要遵循生态工程的 原理。我国西北一些地区年降雨量少
，适宜种植灌木和草，却被硬性规定种植属于乔木的杨树，致使许多地方的杨树长成半死不活状，结果防护林成了残败的“灰色长城”。其失败的原因主要是违背了 原理。（3）甘肃陇南地区的“九子登科”模式是哪种生态工程建设的实例？（ ）
A. 草原生态恢复工程 B.城市环境工程
C. 小流域综合治理生态工程 D.湿地生态恢复工程
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注生态工程的建设。