蛋白质的提取和分离在分子生物学研究中具有重要意义。回答下列与蛋白质的提取和分离相关的问题:
(1)血红蛋白提取和分离一般分为四步,即样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。
①样品处理中红细胞的洗涤要用_________反复冲洗、离心,在洗涤红细胞时,离心速度过高和时间过长会使_________等一同沉淀,达不到分离的效果。洗涤干净的标志是_________。
②在_________的作用下,洗涤好的红细胞破裂,释放出血红蛋白。
③粗分离过程中,透析的目的是_________。
(2)在洗脱过程中加入物质的量浓度为20mmol/L的磷酸缓冲液(pH为7.0)的目的是_________。
(3)在装填色谱柱时不得有气泡存在,因为_________。
高三生物综合题中等难度题
蛋白质的提取和分离在分子生物学研究中具有重要意义。回答下列与蛋白质的提取和分离相关的问题:
(1)血红蛋白提取和分离一般分为四步,即样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。
①样品处理中红细胞的洗涤要用_________反复冲洗、离心,在洗涤红细胞时,离心速度过高和时间过长会使_________等一同沉淀,达不到分离的效果。洗涤干净的标志是_________。
②在_________的作用下,洗涤好的红细胞破裂,释放出血红蛋白。
③粗分离过程中,透析的目的是_________。
(2)在洗脱过程中加入物质的量浓度为20mmol/L的磷酸缓冲液(pH为7.0)的目的是_________。
(3)在装填色谱柱时不得有气泡存在,因为_________。
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蛋白质提取、分离在分子生物学研究中具有重要意义。
(1)蛋白质提取和分离的步骤一般分为__________、____________ 、纯化和纯度鉴定。
(2)若要从红细胞中提取血红蛋白,则要对获得的红细胞进行洗涤、_________和分离血红蛋白溶液、____________,才能获得含杂质较少的血红蛋白溶液。
(3)分离血红蛋白溶液环节,试管溶液明显分为四层,我们保留其中的第________层(自上而下计算)。溶液特征是__________(颜色等)。
(4)通过__________法将样品进一步纯化,经__________方法(使用最多的)进行纯度鉴定。
高三生物非选择题中等难度题查看答案及解析
蛋白质提取、分离在分子生物学研究中具有重要意义。
(1)蛋白质提取和分离的步骤一般分为__________________。
(2)提取血红蛋白时,选用猪血,而不选用鸡血。理由是_______________。
(3)实验前采取新鲜的猪血,要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠,目的是________。若要从红细胞中提取血红蛋白,则要对获得的红细胞进行______、________和分离血红蛋白溶液、透析,才能获得含杂质较少的血红蛋白溶液。
(4)通过__________法将样品进一步纯化,经__________方法进行纯度鉴定。
(5)在凝胶色谱法制作过程中,装填凝胶柱时,不得有气泡存在,原因是____________。
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某同学对“血红蛋白的提取和分离“实验进行改进和研究,实验步骤如图1所示。请回答下列问题:
(1)蛋白质的提取和分离一般分为______________________________等四步。
(2)血红蛋白由4条肽链组成,包括______,血红蛋白因含有______而呈红色,这有利于对提取过程的监测。
(3)洗涤红细胞的目的是______。将样品稀释后转移至离心管中,离心后选取______(上层或下层)暗红色的红细胞液体并将其转入烧杯中,加入5倍体积的______进行洗涤。
(4)待红细胞破裂释放血红蛋白后,将得到的混合溶液充分搅拌并离心,结果如图2所示。血红蛋白分布在图2的______(填序号)层,用滤纸过滤,可得到含血红蛋白的滤液。
(5)将滤液装入透析袋中,可除去______的杂质。
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蛋白质的分离与提纯技术是研究蛋白质的重要技术,DNA的提取和分离及PCR技术是研究DNA的重要技术。根据所学的知识回答下列问题。
(1)样品处理,红细胞的洗涤要用______反复冲洗、离心。血红蛋白粗分离阶段,若要尽快达到理想的透析效果,可以采用的方法是____________。
(2)分离蛋白质时,用凝胶色谱法将样品纯化的目的是___________。
(3)DNA粗提取时,常用鸡血作为实验材料,原因是_________________。实验前中,以通过_________两种方法使鸡血细胞沉淀于试管底部,以便除去血清。实验中有两次使用蒸馏水,第一次使用的目的是____________.
(4)PCR反应过程中的延伸是指____________,在PCR技术中所需要的引物实质上是一种_______________。
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【生物——选修模块1:生物技术实践】(15分)
家蝇体内存在一种具有极强抗菌能力的抗菌蛋白,请回答下列有关分离和提取抗菌蛋白的问题:
(1)分离该抗菌蛋白可用________法,其原理是根据蛋白质分子的带电性质差异、大小及形状不同,________不同而实现分离。
(2)蛋白质的提取和分离一般分为四步:样品处理、________、________、和________。
(3)可用金黄色葡萄球菌来检验该蛋白质的体外抗菌特性。抗菌实验所用培养基中的牛乳膏和蛋白胨主要为细菌生长提供________和________。
(4)分别在加入和未加入该抗菌蛋白的培养基中接种等量菌液,培养一定时间后,比较两种培养基中菌落的___________,确定该蛋白质的抗菌效果。
(5)抗菌培养常用的接种方法有___________和_____________。实验结束后,对使用过的培养基应进行________处理。
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研究发现柚皮精油和乳酸菌素(小分子蛋白)均对致病菌有抑制作用,回答下列问题。
(1)柚皮精油的提取宜采用 法,不宜采用水中蒸馏的方法的原因是水中蒸馏会导致 。
(2)分离纯化乳酸菌时常采用 法或 法。培养基中的尿素可为乳酸菌的生长提供 ,培养基的pH需调至 。乳酸菌中的乳酸杆菌通常还可用于生产 。
(3)抑菌实验时,在长满致病菌的平板上,可通过测定以抑菌物质为中心的 的大小来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。
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红细胞内含有大量血红蛋白,我们可以选用猪、牛、羊或其他哺乳动物的血液进行实验,来提取和分离血红蛋白。请回答下列有关问题:
(1)血红蛋白的提取和分离一般可分为四步:________、粗分离、纯化和________。
(2)实验前取新鲜的血液,要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠,取血回来,马上进行处理、离心后,收集血红蛋白溶液。
以上所述的过程即是样品处理,它包括红细胞的洗涤、____________________、____________________。
(3)收集的血红蛋白溶液要进行粗分离,其方法是________。然后通过________将样品进一步纯化,最后经________进行纯度鉴定。
(4)下图是凝胶色谱法分离血红蛋白时样品加入和洗脱示意图。请据图回答下列问题。
①在加样品示意图中,正确的顺序是___________________。
②用吸管加样品时,应注意正确操作,分别是______________、______________、________________。
③待________________时,才加入缓冲溶液。
④待________接近色谱柱底端时,用试管收集流出液,每________mL收集一管,连续收集。
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回答下列有关血红蛋白的提取和分离的问题:
(1)血红蛋白的提取和分离一般可分为四步:样品处理、粗分离、________和纯度鉴定。
(2)实验前取新鲜的血液,要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠,取血回来,马上进行离心,收集血红蛋白溶液。
①加入柠檬酸钠的目的是__________________________________。
②样品处理包括____________、___________、分离血红蛋白溶液和透析。
(3)收集的血红蛋白溶液在透析袋中进行透析,这就是样品的粗分离。
①透析的目的是:将样品中分子量较小的杂质蛋白除去。
②透析的原理是_____________________________________________________。
(4)通过凝胶色谱法将样品进一步纯化,样品纯化的目的是______________________。
(5)最后经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行_____________________。
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试回答下列“血红蛋白质提取与分离实验”的有关问题:
(1)血红蛋白质的提取和分离一般分为四步:_______、________、纯化、__________。
(2)对红细胞进行洗涤时应使用生理盐水而不使用蒸馏水的原因是______。
(3)图1装置的作用是________________________________。
(4)粗分离后纯化蛋白质采用的方法是___________法。装填凝胶色谱柱时,色谱柱内不能有气泡的存在,原因是______。a、b均为蛋白质分子,其中先从凝胶色谱柱中洗脱出来的是a,是因为a蛋白质分子的相对分子质量______(“大”、“小”)。
(5)图2表示电泳法分离蛋白质的结果。不同蛋白质得以分离是原因是______。
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