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玉米是我国重要的粮食作物和饲料来源，低温会影响玉米的产量和品质。研究者将从微生物中获得的CSP（冷激蛋白）基因与玉米基因的ubi启动子相连后构建基因表达载体，并将其导入玉米细胞中，获得了具有低温耐受性的玉米植株，过程如图1所示。
（1）研究者提取玉米的DNA，利用PCR技术将ubi启动子扩增出来。该过程需设计合适的引物，引物设计时需已知___________，为便于进行后续操作还在引物中添加了限制酶的识别序列。在反应体系内，至少需___________次扩增才能获得所需的ubi启动子。
（2）图1所示的流程图中，过程①需___________的催化，获得的ubi-CSP基因在构建基因表达载体时，在Ti质粒上的插部位为___________。过程②需要用CaCl2溶液处理农杆菌，其目的是___________。过程③完成后，将玉米愈伤组织转入含___________的培养基中进行筛选，筛选后的愈伤组织再经培育获得转基因玉米。
（3）研究者分别提取了野生型玉米及5株转基因玉米的染色体DNA，用限制酶处理后进行电泳。电泳后的DNA与基因探针进行杂交，得到图2所示放射性检测结果，该基因探针应为___________片段，实验结果表明___________。
（4）在个体水平上对转玉米植株进行___________实验，可检测CSP基因是否已在玉米中表达。
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I．玉米是重要经济作物，常受到玉米螟危害而减产。研究人员发现玉米螟若食用某种原核生物分泌的γ-蛋白后将会死亡，由此他们将γ-蛋白基因转入到玉米体内，使玉米获得抗玉米螟危害的能力．回答下列问题：
（1）若用限制酶E和F从原核生物基因组DNA上切下γ-蛋白的基因，并将之取代质粒Zl上相应的E-F区域（0．4kb，lkb=1000对碱基）。图中E、F、G、H是4种识别序列完全不同的限制酶及其部分识别位点，已知用限制酶G切割Zl，可得到2．5kb的DNA片段，用限制酶E和F切割Zl时，可得到0．4kb和4．6kb的DNA片段。
①质粒Zl上有____个限制酶G的酶切位点，若图中所形成的重组质粒Z2的大小为5．4kb，则目的基因的大小是_____________________。
②若用含重组质粒的土壤农杆菌直接感染玉米植株根部伤口，则该植株产生的种子中______（填“含有”或“不含”）γ-蛋白基因。
（2）将获得的目的基因在体外大量扩增，可以用PCR技术，DNA的两条链是反向平行的，当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后，DNA聚合酶就能从引物的_______________（填“3”或“5”）端开始延伸DNA链。 PCR反应体系中加入dNTP（三磷酸碱基脱氧核苷酸，结构与ATP类似）后，不再单独添加ATP等能源物质，请推测其原因是____________。
（3）下图表示利用PCR技术扩增目的基因的部分过程，下列叙述错误的是_____
A．从理论上推测，第二轮循环产物中含有引物A的DNA片段占3/4
B．在第二轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段
C．引物之间或引物自身发生碱基互补配对则不能扩增目的基因
D．PCR的反应过程需要耐高温的解旋酶和聚合酶
II．基因疫苗指的是DNA疫苗，即将编码外源性抗原的基因插入到质粒上，然后将质粒直接导入人或动物体内，让其在宿主细胞中表达出抗原蛋白，诱导机体产生免疫应答。口蹄疫是一种危害严重的偶蹄动物传染病，近年来国内外在口蹄疫基因疫苗研究方面有了许多新的突破。回答下列问题：
（1）将编码外源性抗原的基因插入到质粒上，此过程目的是___________________。
（2）DNA疫苗导入宿主细胞后首先经过__________过程表达出抗原蛋白，然后由抗原蛋白诱导机体产生免疫应答。
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马铃薯是全球第四大重要的粮食作物，仅次于小麦、水稻和玉米。近年来对马铃薯育种的研究越来越多。请回答下列问题。
（1）马铃薯在无性繁殖过程中感染的病毒易传播给后代，从而影响后代产量和品质。为了解决这一问题，可选取植物茎尖通过___________技术来脱除病毒，选择茎尖的原因是_____________________________。
（2）科学家常采用_______法将控制HPV-16病毒(人宫颈癌病毒)外壳蛋白合成的基因导入马铃薯细胞，培育出可生产的且抗该病毒的转基因马铃薯，人食用后可获得抗性。若要使目的基因在受体细胞中表达，需要构建________，而不能直接将目的基因导入受体细胞，原因是目的基因缺乏___________________。 科学家发现某些细菌的质粒上存在抗生素基因，该基因在基因工程中可作为_________________。
（3）实验发现，该转基因马铃薯经烹煮后抗病毒效果较差，分析其原因可能是________。若要确定某食品是不是转基因生物或是通过转基因技术加工而成的，可以从检测其是否含有外源基因或DNA、____________________等方面进行检测。
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马铃薯是全球第四大重要的粮食作物，仅次于小麦、水稻和玉米。近年来对马铃薯育种的研究越来越多。请回答下列问题
(1)马铃薯在无性繁殖过程中感染的病毒易传播给后代，从而影响后代的产量和品质，可采用___________技术来脱除病毒，原因是_________________________________。
(2)科学家常采用___________法将控制HPV-16病毒(人宫颈癌病毒)外壳蛋白合成的基因导入马铃薯细胞，培育出可生产的且抗该病毒的转基因马铃薯，人食用后可获得抗性。若要使目的基因在受体细胞中表达，需要构建基因表达载体而不能直接将目的基因导入受体细胞，原因是______________________、______________________。实验发现，该转基因马铃薯经烹煮后抗病毒效果较差，分析其原因可能是______________________。
(3)转基因食品的安全性备受关注，若要确定某食品是不是转基因生物或是通过转基因技术加工而成的，可以从______________________、______________________等方面进行检测。
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玉米是全球最重要的农作物之一，寒冷条件下其产量降低，科研人员推测这可能与植物体内的一种酶(RuBisco)的含量有关。为探究其含量与低温(14℃)胁迫下玉米产量的关系，科研人员利用转基因玉米进行了一系列实验。
（1）将获得的目的基因(RAP1：编码RuBisco大小亚基组装的分子伴侣；LSSS：编码RUBisco的大小亚基)分别与质粒结合构建_______，然后用_______法导入普通玉米中，获得转基因玉米。
（2）在实验中(如下图)，这些转基因玉米(下图2、3、4)与作为___组的_____玉米(下图1)一起在25℃的温度下生长了三周，然后将温度降低到_____生长两周，然后又升高到25℃。
（3）描述上图所示实验果：____________。
（4）此外科研人员还对株高、干重及叶面积进行了测定，实验结果表明RuBisco可能是通过影响叶面积的大小来影响光合作用强度进而影响产量的。为进一步验证上述结论还需要________。
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玉米是全球最重要的农作物之一，寒冷条件下其产量降低，科研人员推测这可能与植物体内的一种酶(RuBisco)的含量有关。为探究其含量与低温(14℃)胁迫下玉米产量的关系，科研人员利用转基因玉米进行了一系列实验。
（1）将获得的目的基因(RAP1：编码RuBisco大小亚基组装的分子伴侣；LSSS：编码RUBisco的大小亚基)分别与质粒结合构建_______，然后用_______法导入普通玉米中，获得转基因玉米。
（2）在实验中(如下图)，这些转基因玉米(下图2、3、4)与作为___组的_____玉米(下图1)一起在25℃的温度下生长了三周，然后将温度降低到_____生长两周，然后又升高到25℃。
（3）描述上图所示实验果：____________。
（4）此外科研人员还对株高、干重及叶面积进行了测定，实验结果表明RuBisco可能是通过影响叶面积的大小来影响光合作用强度进而影响产量的。为进一步验证上述结论还需要________。
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玉米是全球最重要的农作物之一，寒冷条件下其产量降低，科研人员推测这可能与植物体内的一种酶(RuBisco)的含量有关。为探究其含量与低温(14℃)胁迫下玉米产量的关系，科研人员利用转基因玉米进行了一系列实验。
（1）将获得的目的基因(RAP1：编码RuBisco大小亚基组装的分子伴侣；LSSS：编码RUBisco的大小亚基)分别与质粒结合构建_______，然后用_______法导入普通玉米中，获得转基因玉米。
（2）在实验中(如下图)，这些转基因玉米(下图2、3、4)与作为___组的_____玉米(下图1)一起在25℃的温度下生长了三周，然后将温度降低到_____生长两周，然后又升高到25℃。
（3）描述上图所示实验果：____________。
（4）此外科研人员还对株高、干重及叶面积进行了测定，实验结果表明RuBisco可能是通过影响叶面积的大小来影响光合作用强度进而影响产量的。为进一步验证上述结论还需要________。
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我国玉米的栽培历史大约有470 多年，欲提高玉米的品质和产量，人们对其遗传特性进行了深入研究。已知玉米子粒黄色（A）对白色（a）为显性，非甜（B）对甜（b）为显性，这两对基因独立遗传。现有4个玉米纯合品种：黄色非甜、黄色甜、白色非甜和白色甜。请回答下列问题：
（1）下图为玉米中控制这两对相对性状的两对等位基因在染色体上的位置。图中竖线表示相关染色体，点表示相关基因位置，其中正确的是________。
（2）请设计一个杂交实验来同时验证：①玉米子粒黄色与白色这一对相对性状的遗传符合基因的分离定律；②玉米子粒黄色与白色、非甜与甜这两对相对性状的遗传符合基因的自由组合定律。请写出实验思路、预期结果及结论________。
（3）让黄色非甜玉米（AaBb）自交，若后代中黄色非甜∶黄色甜∶白色非甜∶白色甜=6∶3∶2∶1，则最可能的原因是________。
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（10分）玉米（2n=20）是一年生禾本科单性花草本植物。是重要的粮食作物和重要的饲料来源。请对以下问题作出回答：
（1）玉米常用作遗传实验材料与豌豆不同的理由有 。
（2）下图一是在培育玉米新品种过程中，一个细胞的核DNA变化坐标图。
①用适宜浓度秋水仙素处理如图二所示，秋水仙素的作用是 。处理后的玉米植株根细胞染色体数为 。
②该育种方式的原理是 。
③假如秋水仙素作用迅速，在BD时间段滴加适宜浓度秋水仙素 （填“一定”或“不一定”）能得到图一所示核DNA变化坐标图。
（3）玉米叶片非甜（H）对甜（h）为显性，基因位于常染色体上，H- 和h-表示该基因所在染色体发生部分缺失（缺失区段不包括H和h基因），缺失不影响减数分裂过程。染色体缺失的精子不育，而染色体缺失的卵细胞可育。
①现有基因型分别为HH、Hh、H-h、hh-、hh等5种玉米，欲设计实验验证“染色体缺失的精子不育，而染色体缺失的卵细胞可育”的结论，可选择基因型为 的测交亲本组合进行 实验。
②若上述结论成立，以H-h 个体为母本，Hh-个体为父本杂交得F1，F1植株间随机受粉，则后代的表现型及比例是 。
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玉米是重要的粮食作物，近年来由于虫害频发导致减产严重。研究人员将某细菌的抗虫基因C转入玉米细胞内，成功获得了抗虫转基因玉米。这在一定程度上减少了杀虫剂的使用，提高了作物的产量和质量。请回答下列问题：
（1）与细菌中的C基因相比，从cDNA文库中获取的抗虫基因C不具有__________等调控基因表达的组件。
（2）利用农杆菌转化法将C基因导入玉米体细胞，需先将C基因插入到质粒的T-DNA中，原因是__________。
（3）为培育出抗虫转基因玉米植株，应将__________接种到适宜培养基上。这个细胞先经过__________形成__________，再分化成胚状体，并逐渐发育成完整植物体。
（4）RT-PCR是以mRNA作为模板扩增得到DNA的技术，与传统PCR相比，进行RT-PCR时需额外添加的酶是__________。为检测转基因玉米植株不同部位中C基因在转录水平的表达差异，可分别提取转基因玉米的籽粒、叶、茎、根组织的总RNA，利用RT-PCR技术进行扩增，筛选出高表达C基因的部位，推测其判断指标是__________。
（5）由于科学发展水平的限制，目前对__________及基因的调控机制等都了解得相当有限。因此，在将转基因玉米应用于商业化生产之前，必须对其进行安全性评估。