如图是利用转基因技术生产干扰素的简化流程。回答下列问题:
(1)进行过程I的前提是要根据干扰素基因的____________设计引物。
(2)过程I需加热至90~95℃,然后冷却至55~60℃,如此操作的目的是____________。据图可知欲获得干扰素基因,至少需要复制____________次。
(3)图中A的名称是___________,A上与RNA聚合酶识别和结合的部位称为___________。
(4)为检测干扰素基因在酵母菌细胞中是否转录,可用_____________作探针,与从细胞中提取的____________进行分子杂交。
高三生物综合题中等难度题
如图是利用转基因技术生产干扰素的简化流程。回答下列问题:
(1)进行过程I的前提是要根据干扰素基因的____________设计引物。
(2)过程I需加热至90~95℃,然后冷却至55~60℃,如此操作的目的是____________。据图可知欲获得干扰素基因,至少需要复制____________次。
(3)图中A的名称是___________,A上与RNA聚合酶识别和结合的部位称为___________。
(4)为检测干扰素基因在酵母菌细胞中是否转录,可用_____________作探针,与从细胞中提取的____________进行分子杂交。
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科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图所示,请回答相关问题:
(1)过程①获得重组胚胎之前需要通过___________技术获得重组细胞,通过显微操作去除MⅡ期卵母细胞中的核,用微型吸管可一并吸出______________________。
(2)步骤②中,重组胚胎培养到囊胚期时,可从其________________分离出ES细胞。步骤③中,需要构建含有干扰素基因的________________。构建之前可以利用PCR技术对目的基因进行扩增,PCR技术的原理是___________。
(3)将基因导入ES细胞常用的方法是_____________。体外诱导ES细胞向不同方向分化是利用了ES细胞的___________。
(4)为检测干扰素基因的转录情况,可采用___________方法,若有杂交带出现,表明目的基因已成功转录出mRNA。
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利用基因工程培育抗病香蕉的流程如下:
回答下列问题:
(1)获得抗病基因后,常利用 技术进行扩增,利用该技术扩增的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便根据这一序列合成___ _。
(2)使用农杆菌将抗病基因导入香蕉细胞中,农杆菌中的Ti质粒上的________________可将抗病基因转移至香蕉细胞 上。
(3)卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长。欲利用添加了卡那霉素的培养基筛选已导人抗病基因的香蕉细胞,则基因表达载体A的构建时应含有__________,以作为标记基因。
(4)抗病基因进入香蕉细胞内,并在香蕉细胞内维持稳定和表达,该过程称为 。
(5)欲检测抗病基因是否表达出蛋白质,可从转基因抗病香蕉中提取蛋白质,用 ___ 予以检测。
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利用基因工程培育抗病香蕉的流程如下,回答下列问题:
(1)获得抗病基因后,常利用__________技术进行扩增,利用该技术扩增的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便根据这一序列合成 。该技术的完成需要_____________ 酶。
(2)使用农杆菌将抗病基因导入香蕉细胞中,农杆菌中的Ti质粒上的_________可将抗病基因转移至香蕉细胞的___________________上。
(3)卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长。欲利用添加了卡那霉素的培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞,则基因表达载体A的构建时,应含有___________, 以作为标记基因。
(4)抗病基因进入香蕉细胞内,并在香蕉细胞内维持稳定和表达,该过程称为 _______________。
(5)欲检测抗病基因是否表达出蛋白质,可从转基因抗病香蕉中提取蛋白质,用_______________ 予以检测。
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科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗,其技术流程如下图。请回答相关问题:
(1)过程①获得重组胚胎之前,需要通过____________技术获得重组细胞。
(2)将基因导入ES细胞而不是导入到上皮细胞,是因为__________________。
(3)步骤③中,需要构建含有干扰素基因的__________。由于DNA复制时,子链只能由5′向 3′方向延伸,故构建前利用PCR技术扩增干扰素基因时,可以从图2中A、B、C、D四种单链DNA片段中选取_______________作为引物。对干扰素基因片段和质粒进行酶切时,可选用限制酶的组合为________________或_______________。
(4)将步骤③获得的ES细胞在荧光显微镜下观察,选择发___________色荧光的细胞进行体外诱导。为检测干扰素基因是否表达,可以采用_____________的方法。
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干扰素是动物和人体细胞受到病毒感染后产生的一种糖蛋白,具有抗病毒、抑制细胞增殖及抗肿瘤作用。利用基因工程技术培育能生产干扰素的植物流程如图所示。请回答下列问题:
(1)首先获取的动物干扰素基因称为____________。利用PCR技术扩增干扰素基因时,设计引物序列的主要依据是____________。
(2)过程①中剪切质粒和目的基因时所需要的工具酶是________和________。酶切后,目的基因形成的两个黏性末端序列____________。
(3)过程②中将重组质粒导入根瘤农杆菌时。常用____________处理根瘤农杆菌,其目的是____________。
(4)在培育愈伤组织的固体培养基中,除了无机盐、有机营养物质、琼脂、植物激素外,还需添加卡那霉素。卡那霉素的作用是________________________________。在分子水平上通常采用____________技术检测干扰素基因是否导入受体细胞。
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(12分)科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如下图,请回答相关问题:
(1)过程①获得重组胚胎之前需要通过__________________技术获得重组细胞,接受细胞核的去核卵母细胞应该处于___________________时期。
(2)步骤②中,重组胚胎培养到囊胚期时,可从其_______________分离出ES细胞。步骤③中,需要构建含有干扰素基因的__________________。构建之前可以利用_____________________技术对目的基因进行扩增。
(3)将基因导入ES细胞常用的方法是________________________。体外诱导ES细胞向不同方向分化是利用了ES细胞的_________________。
(4)为检测干扰素基因的表达情况,可采用__________________方法,若有杂交带出现,表明目的基因已成功表达。
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某转基因牛的生产技术流程如图。请回答:
(1)利用过程①的方法构建的基因文库是____________________(填“基因组文库”或“部分基因文库”);PCR技术大量扩增此目的基因的前提是__________________________,以便合成引物;PCR扩增过程经过变性、复性和__________三个步骤。
(2)转入生长激素基因的牛可通过乳腺细胞分泌乳汁来生产人生长激素,过程②中,将目的基因与_________的启动子等调控组件重组在一起构建重组质粒,通过________法导入受精卵中,然后利用胚胎工程的______________________________ (答出2项)技术手段获得转基因牛。
(3)该转基因牛进入泌乳期后,其分泌的乳汁中并未含有人的生长激素,可能的原因是_________________________。
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某转基因牛的生产技术流程如图。请回答:
(1)利用过程①的方法构建的基因文库是____________________(填“基因组文库”或“部分基因文库”);PCR技术大量扩增此目的基因的前提是__________________________,以便合成引物;PCR扩增过程经过变性、复性和__________三个步骤。
(2)转入生长激素基因的牛可通过乳腺细胞分泌乳汁来生产人生长激素,过程②中,将目的基因与_________的启动子等调控组件重组在一起构建重组质粒,通过________法导入受精卵中,然后利用胚胎工程的______________________________ (答出2项)技术手段获得转基因牛。
(3)该转基因牛进入泌乳期后,其分泌的乳汁中并未含有人的生长激素,可能的原因是_________________________。
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科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图,请回答下列问题:
(1)图中卵母细胞应在体外培养到______期,步骤①应先对卵母细胞进行______处理。
(2)由图可知,步骤②要分离出ES细胞,需将重组胚胎培养到______期。
(3)步骤③选择ES细胞作为受体细胞而不是上皮细胞,是因为ES细胞______,该过程需要先利用______技术扩增干扰素基因,其前提是要有一段已知干扰素基因的核苷酸序列以便合成______。
(4)步骤④应在培养液中加入______。为检测干扰素基因是否在小鼠体内成功表达,可以采用______技术。
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