正常细胞不能合成干扰素,但含有干扰素基因。我国科学家釆用基因工程技术生产干扰素a-2b已实现量产。具体做法是将产生干扰素的人白细胞的mRNA分离,反转录得到干扰素基因。将含有四环素、氨苄青霉素抗性基因的质粒PBR322和干扰素基因进行双酶切,用连接酶连接。将重组载体DNA分子在一定条件下导入大肠杆菌,在培养基中筛选培养,检测干扰素的表达量,选出高效表达的工程菌。请回答:
(1)在分化诱导因子作用下,正常细胞可以摆脱抑制、合成干扰素,该过程发生的实质是________________________________
(2)据下图分析,构建重组载体DNA分子时,可以选用_____两种限制酶对质粒pBR322和干扰素基因进行双酶切,目的是既能保证目的基因和质粒正向连接,又能防止_____________________________(答两点)。
(3)将重组质粒导入大肠杆菌中,然后将细菌涂布到含_____的选择培养基上培养,就可得到含质粒PBR322或重组质粒的细菌单菌落;再从每一个单菌落中挑取部分细菌转涂到含有_____的培养基上,不能生长的绝大部分是含有重组质粒的细菌,原因是_____
(4)干扰素在体外保存非常困难,如果将其分子中的一个半胱氨酸变成丝氨酸,在-70°C 条件下可以保存半年。实现这一转变需要直接对_____进行修饰或改造,这属于蛋白质工程的范畴。
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正常细胞不能合成干扰素,但含有干扰素基因。我国科学家釆用基因工程技术生产干扰素a-2b已实现量产。具体做法是将产生干扰素的人白细胞的mRNA分离,反转录得到干扰素基因。将含有四环素、氨苄青霉素抗性基因的质粒PBR322和干扰素基因进行双酶切,用连接酶连接。将重组载体DNA分子在一定条件下导入大肠杆菌,在培养基中筛选培养,检测干扰素的表达量,选出高效表达的工程菌。请回答:
(1)在分化诱导因子作用下,正常细胞可以摆脱抑制、合成干扰素,该过程发生的实质是________________________________
(2)据下图分析,构建重组载体DNA分子时,可以选用_____两种限制酶对质粒pBR322和干扰素基因进行双酶切,目的是既能保证目的基因和质粒正向连接,又能防止_____________________________(答两点)。
(3)将重组质粒导入大肠杆菌中,然后将细菌涂布到含_____的选择培养基上培养,就可得到含质粒PBR322或重组质粒的细菌单菌落;再从每一个单菌落中挑取部分细菌转涂到含有_____的培养基上,不能生长的绝大部分是含有重组质粒的细菌,原因是_____
(4)干扰素在体外保存非常困难,如果将其分子中的一个半胱氨酸变成丝氨酸,在-70°C 条件下可以保存半年。实现这一转变需要直接对_____进行修饰或改造,这属于蛋白质工程的范畴。
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正常细胞不能合成干扰素,但含有干扰素基因。我国科学家釆用基因工程技术生产干扰素a-2b已实现量产。具体做法是将产生干扰素的人白细胞的mRNA分离,反转录得到干扰素基因。将含有四环素、氨苄青霉素抗性基因的质粒PBR322和干扰素基因进行双酶切,用连接酶连接。将重组载体DNA分子在一定条件下导入大肠杆菌,在培养基中筛选培养,检测干扰素的表达量,选出高效表达的工程菌。请回答:
(1)在分化诱导因子作用下,正常细胞可以摆脱抑制、合成干扰素,该过程发生的实质是________________________________
(2)据下图分析,构建重组载体DNA分子时,可以选用_____两种限制酶对质粒pBR322和干扰素基因进行双酶切,目的是既能保证目的基因和质粒正向连接,又能防止_____________________________(答两点)。
(3)将重组质粒导入大肠杆菌中,然后将细菌涂布到含_____的选择培养基上培养,就可得到含质粒PBR322或重组质粒的细菌单菌落;再从每一个单菌落中挑取部分细菌转涂到含有_____的培养基上,不能生长的绝大部分是含有重组质粒的细菌,原因是_____
(4)干扰素在体外保存非常困难,如果将其分子中的一个半胱氨酸变成丝氨酸,在-70°C 条件下可以保存半年。实现这一转变需要直接对_____进行修饰或改造,这属于蛋白质工程的范畴。
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a干扰素是由人的白细胞产生的一种蛋白质,是抗病毒的一类特效药,人类利用基因工程技术已经大批量生产a干扰素。请分析回答下列问题:
(1)利用逆转录的方法合成干扰素基因,不能从上皮细胞中提取mRNA,原因是______;这种方法合成的基因与细胞内的基因相比,一般没有______、启动子、终止子等结构。
(2)根据α干扰素基因的脱氧核苷酸序列设计并合成引物,利用______技术可得到大量的α干扰素基因。
(3)基因工程中利用的工具酶有______,最常用的载体是______。
(4)将重组DNA导入大肠杆菌细胞时,需用______处理细胞使其成为______细胞。
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a-干扰素是由人的白细胞产生的一种蛋白质,是抗病毒的一类特效药,人类利用基因工程技术已经大批量生产干扰素。回答下列问题:
(1)利用逆转录的方法合成a-干扰素基因时,所用的mRNA应从白细胞中提取,原因是_______这种方法合成的基因要比细胞内-干扰素基因短的原因是___________。
(2)在体外可利用PCR技术扩增a-干扰素基因,扩增过程是:目的基因DNA受热变性后解链为单链,___________与单链相应互补序列结合,然后在DNA聚合酶作用下进行延伸,如此循环多次。该过程中,反应体系将温度调控到70-75℃时,反应体系内进行的反应是_____。
(3)将扩増的-干抗素基因与运载体拼接成重组DNA需要用到的工具酶是____________.将重组DNA导入大肠杆菌内需用到钙离子,原因是_____________________。
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干扰素是动物或人体细胞受到病毒侵袭后产生的一种糖蛋白,干扰素几乎能抵抗所有病毒引起的感染。科学家利用人干扰素基因运用动物乳腺生物反应器技术生产干扰素。回答下列问题。
(1)基因工程中获取目的基因的常用方法有___________、___________。
(2)将获得的人干扰素基因进行PCR扩增,目前在PCR体系中使用Taq酶而不使用哺乳动物体内的DNA聚合酶的主要原因是______________________。
(3)利用动物乳腺生物反应器技术生产干扰素,必须将人的干扰素基因与___________的启动子等调控组件重组在一起导入哺乳动物受精卵中,进而培育出转基因动物。
(4)利用动物乳腺生物反应器生产干扰素需对受精卵形成的早期胚胎进行性别鉴定,该过程需选择性染色体组成为___________的胚胎进行培养。为检测人干扰素基因是否被导人受精卵中,并在动物体内正常表达,可采用的分子检测方法有___________、___________。
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干扰素是治疗癌症的重要物质,人血液中每升只能提取0.05 mg干扰素,因而其价格昂贵,平民百姓用不起。但美国有一家公司用遗传工程方法合成了价格低廉、药性一样的干扰素,其具体做法是:
(1)从人的淋巴细胞中提取能指导干扰素合成的________,并使之与一种叫质粒的DNA结合,然后移植到酵母菌内,从而让酵母素来________________________。
(2)酵母菌能用________方式繁殖,速度很快,所以能在较短的时间内大量生产________。利用这种方法不仅产量高,并且成本较低。
(3)科学家陈炬在这方向也作出了突出贡献,他成功地把人的干扰素基因嫁接到了烟草的DNA分子上,其物质基础和结构基础是________________________________。
(4)烟草具有了抗病毒能力,这表明烟草体内产生了________,由此可见,烟草和人体合成蛋白质的方式是________,从进化的角度来考虑,证明了人和植物的起源________。
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干扰素是治疗癌症的重要物质,人血液中每升只能提取0.05mg干扰素,因而其价格昂贵,平民百姓用不起。但美国有一家公司用遗传工程方法合成了价格低廉、药性一样的干扰素,其具体做法是:
(1)从人的淋巴细胞中提取能指导干扰素合成的_______,并使之与一种叫质粒的DNA结合,然后移植到酵母菌内,从而让酵母素来_______________。
(2)酵母菌能用__________方式繁殖,速度很快,所以能在较短的时间内大量生产_______。利用这种方法不仅产量高,并且成本较低。
(3)科学家陈炬在这方向也作出了突出贡献,他成功地把人的干扰素基因嫁接到了烟草的DNA分子上,其物质基础____________和结构基础是___________________。
(4)烟草具有了抗病毒能力,这表明烟草体内产生了_________,由此可见,烟草和人体合成蛋白质的方式是_____________,从进化的角度来考虑,证明了人和植物的起源______________。
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科学家利用基因工程培育出了耐盐的转基因水稻新品系。下列叙述错误的是
A.目前还不能用化学方法合成目的基因
B.可通过多种方法以实现重组质粒导入受体细胞
C.含耐盐基因的水稻细胞可经植物组织培养获得植株
D.可用较高浓度的盐水浇灌来鉴定水稻植株的耐盐性
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近年来,生物工程运用分子生物学的最新成就,发展出一系列的技术,可以为人类健康、生产、生活等服务。运用所学知识回答下列问题。
(1)科学家为了建立生产“干扰素”的乳房生物反应器,利用基因工程技术,构建含有启动子、______________、目的基因、复制原点和 _________等元件的基因表达载体,其中启动子的作用是__________________________________________,最后通过显微注射法,导入羊的_________中,最终发育成能生产干扰素的转基因羊。
(2)在单克隆抗体制备过程中,诱导______细胞与骨髓瘤细胞融合获得杂交瘤细胞,此过程需要两次筛选,笫二次筛选出_____________________________,单克隆抗体的优点有____________________________________________________________________。
(3)在胚胎工程中,通过对供体母羊注射_______________激素,促进其_______________,从而获得大量羊的卵母细胞;获取的卵母细胞需要培养至减数第二次分裂中期,才能与_________的精子结合。
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近年来,生物工程运用分子生物学的最新成就,发展出一系列的技术,可以为人类健康、生产、生活等服务。运用所学知识回答下列问题。
(1)科学家为了建立生产干扰素的乳腺生物反应器,利用基因工程技术,构建含有启动子、目的基因、终止子、复制原点和___________的基因表达载体,一般通过___________法导入哺乳动物的___________中,然后再将它送入母体内,最终发育成能生产干扰素的转基因哺乳动物。
(2)单克隆抗体具有特异性强、___________、并可以大量制备等优点。制备单克隆抗体有两个重要的理论基础:一是在动物免疫反应的过程中每一个B淋巴细胞___________;二是小鼠骨髓瘤细胞能够___________。
(3)在胚胎工程中,通过对供体母羊注射___________,促进其超数排卵,从而获得大量羊的卵母细胞;获取的卵母细胞需要培养至___________,才能与获能的精子结合。
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